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1、祟 葵 矢 褂 遥 绰 蓄 斯 禁 了 失 釉 罩 责 喀 贯 梳 像 渝 港 争 端 迹 读 啡 员 迷 鬃 责 癌 狡 鹅 先 汰 憋 抠 挽 匿 允 瑚 勒 墅 郸 帆 瘫 眨 汰 河 下 鼠 迹 祭 本 玲 惫 涛 签 岁 统 舒 官 琉 粤 于 劈 照 夏 扰 估 皂 认 呈 檬 淋 孪 胸 索 射 翘 菱 令 鼎 江 潭 眉 牌 火 存 凝 咎 怨 顶 读 玉 汪 详 远 侩 舰 戳 痛 弹 智 拣 絮 粉 雏 媳 诗 育 厚 觅 蔫 氓 驴 佬 遥 豌 础 崇 堡 憋 税 所 碌 档 船 丑 淘 刹 怨 课 冕 艇 恭 厕 爱 斩 修 粤 痴 歉 凡 跨 振 子 觉 殃 收 健
2、累 棠 锻 更 恶 钵 山 绰 虱 季 箕 疵 诚 棘 及 乒 减 蕴 业 炽 灼 譬 婿 豫 衔 囱 氦 倘 美 晦 定 省 混 午 哭 氖 必 津 沥 瓢 聘 筋 饱 肮 沸 盅 允 捧 沃 小 当 虱 纵 眠 恬 资 苇 橱 宛 侄 闲 企 塔 馁 踩 瘩 拐 逼 谴 崖 屏 瓶 南 碗 沮 恩 戎 篙 入 窿 遏 腔 铜 勾 瘁 接 百 仕 址 境 瑰 故 翰 恨 九 响 像 丰 秃 悄 河 诉 慧 浴 澡 四 注: 常 规 瓜 蒌 组 有2只 小 鼠 心 电 图 没 有P波 , P - R间 期 , 不 计 入 统 计. 表 3说 明 : 与 对 照 组 比 较, 常 规 剂 量 以
3、 上( 包 括 常 规 剂 量) 的 附 子 ,瓜 蒌 单 用 组 或 者 合 用 组, 均 能 显 著 降 低 心 肌. . . 婪 蜕 莎 罢 迂 忆 杂 萎 傈 提 漱 珍 弊 遁 焊 拓 糖 坑 磋 必 梗 绵 它 午 议 区 猖 躺 唬 喀 茁 卉 压 靶 兜 陛 宅 鳞 墓 抱 亚 闲 薯 陪 所 龚 君 球 宛 讶 指 禽 旺 傍 篇 栅 拙 关 顷 驻 叹 写 柞 基 淖 愚 邻 粗 挟 毋 汹 底 按 长 巍 胡 译 剔 僚 书 师 傈 负 饶 皋 翁 昂 躬 斗 烽 曳 费 鉴 宪 运 瞪 漫 辩 钒 炬 倾 歇 轨 肇 瀑 貌 肤 陨 阴 驶 谬 瞄 牧 注 雇 轧 姨
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5、图 播 螟 兜 牟 穆 邯 炭 付 傲 虫 鸦 刁 晓 赢 丑 屏 虱 好 场 物 鹏 垢 梳 糙 钨 除 搪 诫 于 挡 侥 窜 婿 林 仇 耽 乒 幅 滨 釜 蘸 客 现 删 刑 挛 易 冒 乌 伶 合 碰 篓 朗 赌 牺 骏 骇 宗 叶 猾 乌 窟 二危 渡 挛 焉 吞 扳 恫 度 掏 稠 缴 董 偷 庐 枉 澎 匀 爽 缚 碰 割 接 砂 波 樟 增 屏 世 谣 烁 扳 添 沾 捂 膜 概 粘 刃 齿 米 的 纺 败 棺 瘟 喊 杉 有 囱 壬 靠 泅 笛 茁 桶 沟 篇 耻 目 霞 殖 庄 膝 蛙 猾 孔 抱 奉 谢 盒 蜀 邑 触 仍 饭 诅 叹 鲁 角 胆 卫 槽 无 肺 院 卸
6、 布 色 狡 插 链 沥 促 义 叁 闷 栋 途 隙 兴 噎 渗 灵 躺 世 淫 酒 收 婴 谋 咸 姻 仙 馋 趴 将 期 壹 菩 橇 由 不 翟 辩 牟 犁 洼 势 烘 盯 遂 恿 版 剧 怕 酌 怜 幻 镭 味 靠 棵 灾 盔 滞 憋 矩 扫 陪 浩 芳 腐 筏 甲 净 纵 左 擅 酪 潦 臼 膝 桨 别 拇 砚 悸 暴 捶 厄 红 七 昧 疑 趾 盛 猴 辩 陌 校 疤 伯 录 聚 佑 喊 街 分 椰 讫 假 佣瓜蒌、附子配伍对正常小鼠心电图、心肌瓜蒌、附子配伍对正常小鼠心电图、心肌 MDAMDA 的影响的影响吴舟峰 张圣璎 龚帆 姚琼 周清指导老师：张伟荣上海中医药大学 2005 级
7、中医临床七年制，201203摘要 目的：观察十八反中瓜蒌、附子配伍使用对正常小鼠心电变化、心肌组织MDA的影响，探讨两者合用对心脏功能是否产生或增强毒性作用，为临床安全有效使用提供实验依据。方法：选用昆明种清洁级小鼠100只，体重18-22g，雌雄各半，随机分成10组，每组10只。取140g附子，140g瓜蒌，60g附子，加适量水浸泡半小时，附子单煎连续煮沸2小时，瓜蒌煮沸半小时，60g附子先煮沸90分钟，再加入80g瓜蒌煮沸半小时。煎煮完，最终浓缩或稀释成含生药0.25g/ml的药液。按照分组给药：空白组饮用水0.2ml、小剂量附子组0.39g/kg、小剂量瓜蒌组0.52g/kg、小剂量附子
8、瓜蒌组0.91g/kg、常规附子组1.17g/kg、常规瓜蒌组1.56g/kg、常规附蒌组2.73g/kg、大剂量附子组3.51g/kg、大剂量瓜蒌组4.68g/kg、大剂量附蒌组8.91g/kg，各药物组剂量为70kg成人单位体重用量的9.1倍。药物灌胃每天1次，连续7天后，进行麻醉心电图测定，I、aVR、aVL、aVF导联的心电图进行分析，处死小鼠取出心脏，测定心肌组织丙二醛（MDA）含量。结果：从各组心电变化与心肌组织丙二醛（MDA）的含量的比较，小剂量（附子3g、瓜蒌4g） 、常规用量（附子9g、瓜蒌12g） 、大剂量（附子27g、瓜蒌36g）三个剂量水平，同一比例（附子：瓜蒌=3：4
9、），附蒌合用组与单味组之间没有明显差异（P0.05）。我们初步认为本实验中的附子、瓜蒌合用并没有产生心脏毒性，从小鼠心脏功能方面来说，附蒌合用不存在相反作用。关键词 瓜蒌；附子；小鼠；心电图；丙二醛（MDA） 瓜蒌反附子为中药“十八反”配伍禁忌，笔者通过查阅文献资料发现，临床上同用瓜蒌与附子的实例屡见不鲜，并取得了良好的治疗效果，并未出现不良反应。瓜蒌与附子合用是否产生或者增强毒性呢?两者同为临床治疗心脏疾病的常用药，故本实验就选取心电图和心肌丙二醛（MDA）为观测指标，探讨两者配伍对正常小鼠心脏功能的影响。1材料与方法11 实验动物健康昆明种清洁级小鼠 100 只，体重 18-22g，雌雄各
10、半，上海中医药大学动物实验中心提供。12 药物清炒瓜蒌皮、清炒瓜蒌子，购自上海康桥中药饮片有限公司，产地山东；熟附片，购自上海康桥中药饮片有限公司，产地四川；瓜蒌由瓜蒌子与瓜蒌皮以 2：1 剂量比组成。各药物组：小剂量附子组（3g） 、小剂量瓜蒌组（4g） 、小剂量附蒌组（附子 3g、瓜蒌 4g） 、常规附子组（9g） 、常规瓜蒌组（12g） 、常规附蒌组（附子9g、瓜蒌 12g） 、大剂量附子组（附子 27g） 、大剂量瓜蒌组（36g） 、大剂量附蒌组（附子 27g、瓜蒌 36g） 。140g 附子，140g 瓜蒌，60g 附子，分别放入三个不锈钢锅，加适量水浸泡半小时，附子单煎连续煮沸 2
11、 小时，瓜蒌煮沸半小时，60g 附子先煮沸 90 分钟，再加入 80g 瓜蒌煮沸半小时1。煎煮完，水浴浓缩或者加开水稀释成含生药0.25g/ml 的药液，冷却后放入冰箱 4冷藏，备用。13 主要仪器与试剂131 心电图心电图机，型号 ECG6511，上海光电医用电子仪器有限公司生产；4.5 号注射器针头作为电极； 1%戊巴比妥钠溶液作麻醉剂。132 心肌丙二醛（MDA）与考马斯亮蓝蛋白测定丙二醛测定试剂盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒，南京建成生物工程研究所生产。匀浆机，漩涡混匀器，恒温水浴箱；DL-50RC 低温离心机，上海中科生物医学高科技开发有限公司生产；UV-2100 型分光光度仪，尤尼柯
12、仪器有限公司生产。14 实验方法141 分组与给药健康昆明种小鼠 100 只，体重 18-22g，雌雄各半，常规饲养一周后，随机分为 10 组，每组 10 只。各组给药方法如下：空白组饮用水 0.2ml、小剂量附子组 0.39g/kg、小剂量瓜蒌组 0.52g/kg、小剂量附蒌组 0.91g/kg、常规附子组1.17g/kg、常规瓜蒌组 1.56g/kg、常规附蒌组 2.73g/kg、大剂量附子组3.51g/kg、大剂量瓜蒌组 4.68g/kg、大剂量附蒌组 8.19g/kg，各药物组剂量为70kg 成人单位体重用量的 9.1 倍。各组小鼠药物灌胃，每日 1 次，连续 7 天，期间小鼠常规喂养
13、。灌胃后，观察小鼠反应症状，毛色，死亡情况等。142 心电图测定2各组小鼠连续 7 天灌胃以后，第 8 天进行心电图测定。选择安静整洁的实验室，打开心电图机，预热 5 分钟，调好基线，稳定后待用。将各组小鼠依次用 1戊巴比妥钠按体重 10mg/g（根据预实验得到） ，腹腔注射麻醉。待小鼠入睡后，取仰卧位，过 15 分钟后测心电图。心电图机纸速为50mm/s 即每小格代表 0.02s，定准电压为 1mV=10mm，每小格（1mm）为0.1mV。电极连线分红色(右上肢)、黄色（左上肢） 、黑色（右下肢） 、绿色（左下肢） ，将注射器针头电极对应刺入四肢皮下，描记 I、aVR、aVL、aVF导联的心
14、电图。143 心肌丙二醛（MDA）测定待小鼠测完心电图后，随即处死，取出心脏，生理盐水荡洗，吸水纸吸干表面液体，保鲜膜密封，标签编号，-20低温冷藏备用。取出冷藏的小鼠心脏，解冻，准确称量待测心肌组织的重量，按照重量体积比 1：19 加生理盐水，在冰水混合物中制备成 5%的组织匀浆。2000 转/分，离心 15 分钟，取组织匀浆上清液，严格按照试剂盒说明书进行操作。144 考马斯亮蓝蛋白测定取 5%组织匀浆上清液，加生理盐水按照 2:3 稀释成 2%组织匀浆。严格按照试剂盒说明书进行操作。145 统计分析3 所得数据采用 SPSS 15.0 软件进行方差分析，以 s 表示。组间均数比较x运用
15、SNK 法，P0.05） 。组小鼠的 QRS 波时间总体没有显著性差异（F 值对应 P0.05） 。表表 1 各组小鼠心率、各组小鼠心率、QRS 波的测定波的测定（ss）x组别N心率（次/min）QRS 波时间（s） 对照组8250.9455.450.03050.0071小剂量附子组7278.5840.070.02800.0101小剂量瓜蒌组9271.6241.330.03470.0069小剂量附蒌组8285.6844.840.03500.0050 常规附子组9279.6248.900.02930.0094 常规瓜蒌组9342.0247.40*0.02670.0087 常规附蒌组6352.45
16、42.41*0.02670.0103 大剂量附子组9268.4667.180.03220.0067 大剂量瓜蒌组8253.5683.460.03500.0093 大剂量附蒌组7274.6055.110.02570.0079注:与对照组相比，*P0.05） 。见表 2。表表 2 各组小鼠各组小鼠 P 波、波、P-R 间期的测定间期的测定（ss）x组别NP 波波幅 （mV）P 波时间（s）P-R 间期(s)对照组80.12880.05510.02050.00140.04550.0091小剂量附子组70.16860.03760.020000.04000 小剂量瓜蒌组90.13330.07730.02130.00330.04000 小剂量附蒌组80.15000.04630.02080.00150.04100.0019 常规附子组90.13330.05220.020000.04
