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1、遗传学实验报告王媛媛111140084 生命科学学院拔尖班1实验一果蝇的性状观察和饲养管理王媛媛111140084 生命科学学院拔尖班一、目的和要求了解果蝇的生活习惯， 掌握果蝇饲养管理的方法， 学习鉴定果蝇的雌雄性别和某 些遗传性状。二、预备知识果蝇（fruit fly ，vinegar fly ）广泛存在于全球温带及热带气候区，在人类的 栖息地如果园、菜市场等地皆可见其踪迹。目前已发现1000 多种，果蝇以酵母 菌为主要食料，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。 1、黑腹果蝇 (Drosophila ) ：双翅目，果蝇属。 特点：生活史短，每12 天左右即可完成一个世代；饲养容易，
2、以玉米粉等 做饲料就可以生长繁殖； 繁殖能力强， 每只受精的雌蝇可以产卵500 个左右；突 变型多，突变性状多，多数是形态变异，容易观察；染色体少、个体小，是一种 很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。 1908 年，遗传学家摩尔根把它带上了遗传学研究的历史舞台，约在此后30 年的 时间中，果蝇成为经典遗传学的“ 主角” 。摩尔根提出了基因在染色体上直线排列 以及连锁交换定律，并于1933 年被授予诺贝尔奖。 1946 年，摩尔根的学生，被 誉为“ 果蝇的突变大师 ” 的米勒，证明 X射线能使果蝇的突变率提高150 倍，因而 成为诺贝尔奖获得者。 在近代发育生物学研究领域中， 果蝇的发生遗传学
3、独领风 骚。1995 年，诺贝尔奖再次授予三位在果蝇研究中辛勤耕耘的科学家。 2、果蝇的生活史 果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4 个时期：卵、幼 虫、蛹和成虫。 最适培养温度 2025，温度越高，生长越快， 但高 于 30不育甚至死亡。 1 卵：白色，椭圆形，长约0.5mm，前端背面伸出一条触丝，附着在食物上。2幼虫：一龄二龄三龄， 三龄体长 4-5 mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。3蛹： 化蛹前三龄幼虫停止摄食， 爬到相对干燥的瓶壁上 ,形成菱形的蛹， 形状由淡黄、 柔软逐渐硬化为深褐 色。 4 成虫：刚羽化的果蝇虫体较肥大，体表呈半透明，颜色逐渐加深，硬化。1.卵 2.一龄幼
4、虫 3. 二龄幼虫4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫遗传学实验报告王媛媛111140084 生命科学学院拔尖班2三、实验材料黑腹果蝇品系： 野生型、突变型（三隐性、黑体）四、实验仪器培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、解剖镜、搪瓷杯、玻棒、镊子、培养瓶、海绵 塞、滤纸、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板。 乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖五、实验内容1.果蝇的饲养管理使用高温灭菌的培养瓶培养， 酵母菌是果蝇的主要食物， 凡能发酵的物质都 可以用来培养，常用的为玉米饲料。2.果蝇培养基配制清洁指管，盖上适当大小的瓶塞，置高压灭菌锅内，以121，1.5 大气压 消毒 15 分钟，冷却备用。 按配方称取
5、培养基各组分。 先取一半水加入琼脂于电磁炉上加热溶解，再加 入蔗糖煮沸。 取剩余的水将玉米粉调成糊状边搅拌边加入到琼脂糖溶液中，煮沸。 待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分调匀、分装（20 ml/管） 。果蝇培养基配方 玉米粉11.2 克 蔗糖8.9 克 干燥酵母粉1 克 琼脂1 克 水100 毫升 添加 0.8ml 丙酸作为防腐剂3果蝇的生活周期观察遗传学实验报告王媛媛111140084 生命科学学院拔尖班3果蝇的一生经过卵幼虫蛹成虫四个阶段。生活周期的长短受温 度影响很大，一般以2025为适宜。生活周期与饲养温度的关系见下表。在 25条件下，果蝇各发育阶段所需时间大致是： 羽化成虫 12 小时后
6、交配， 2 天产卵（培养基表层） ，1 天一龄幼虫， 1 天二 龄幼虫， 1 天三龄幼虫， 3 天化蛹（化蛹纸或贴在瓶壁上） ，34 天成虫（成虫 可活 15 天左右，低温时可活一个月左右） 。4果蝇的形态观察（1）转移和麻醉转移搬移果蝇至新培养瓶 取一新培养瓶，将瓶塞略为松动，放置于右手侧，取欲转移的果蝇培养瓶 置左手侧， 左手握住瓶颈， 两指轻扣瓶塞顶部， 以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培 养基表面， 将培养瓶置于左手侧， 拔起瓶塞以左手两指夹住瓶塞外端，再将置于 右手侧之新培养瓶瓶塞拔起， 以右手两指夹住瓶塞外端， 以右手将新培养瓶倒扣遗传学实验报告王媛媛111140084 生命科学学院拔尖
7、班于旧培养瓶上， 再以左手握住两瓶口相接处，翻转使新培养瓶位于下方， 然后以 右手掌心轻拍新培养瓶瓶底， 使果蝇掉落于新培养瓶瓶底， 然后迅速盖上各瓶瓶 塞。 麻醉 果蝇可用乙醚麻醉，以方便实验操作。麻醉方法： 取一麻醉瓶，瓶口应与培养瓶大小相仿，使两瓶口相对，培养瓶在上，用手 拍击培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶内，迅速盖上瓶塞，滴 加 3 滴乙醚于小管口中的棉花上，约一分钟左右果蝇倒 卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。 注意： 过度麻醉将导致果蝇死亡。 区分果蝇是否死亡： 如果果蝇的翅膀与身体呈45 度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏。即已死亡的果蝇 双翅展开，而被麻醉但未死亡的果蝇双翅并拢。 再麻
8、醉：观察或计数过程中， 如见果蝇翻身走动可将麻醉瓶口朝下，盖于 果蝇上方待其麻醉后再移开。（2）性别鉴定：前 肢 先 端 第 二 节 具 有 性 梳遗传学实验报告王媛媛111140084 生命科学学院拔尖班5(3) 果蝇观察、计数取白纸板平置于桌面， 将麻醉的果蝇倒于白纸板上， 解剖镜下进行性状观察。 果蝇具有丰富的外表形态差异，包括眼色、眼形、翅形，刚毛形状与数目等。进 行果蝇杂交实验时必须区分性别，务必熟悉雌雄果蝇的差异。 接种观察过的果蝇（ 2-3 对）到新配置的培养瓶中，为避免麻醉的果蝇直接 掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死，先将培养瓶横放， 将麻醉的果蝇用 毛笔转移到瓶壁，待其
9、苏醒后再将培养瓶正立。六、实验问题讨论我发到的果蝇是 雌性的果蝇，观察到其主要 特征如下： 1、体色灰。 2、眼睛颜色为砖红色，饱满的圆形。 3、头胸部以及复眼的周围具有平直，先端略 弯的长型粗黑硬毛刚毛。 4、翅膀呈圆卵型，有横隔脉。 5、体型较大，腹部椭圆末端较尖。 6、腹部背面有明显的5 条黑色条纹。 7、腹部腹面有较明显的6 个腹片。 8、在显微镜下第一节足底侧最上部足前表面观察不到性梳。借同学发到的 雄性 果蝇观察，与雌性果蝇的不同主要有： 1、与雌果蝇相比，体型较小，腹部末端圆钝。 2、肉眼观察腹部末端呈一明显黑点。 在解剖镜下观察到腹部背面有3 条黑色 条纹，前两条较细，后一条宽
10、，延至腹面。雌果蝇6 节，腹部底部为产卵管，呈现圆锥状凸出。雄果蝇 4 节，腹部底部为交尾器，呈现黑色圆形外观。遗传学实验报告王媛媛111140084 生命科学学院拔尖班63、腹部腹面有较明显的4 个腹片。4、在显微镜下观察其第一节足底侧最上部足 前表面有一列黑色鬃毛，即性梳。我认为，在鉴别中主要要看的特征有： 1、性梳。可以在显微镜下观察第一节足底侧最 上部足前表面有无性梳。 先用低倍镜找出大 体位置，再换用高倍镜具体观察。 其主要优 点是准确度高，不会搞错性别。 2、在解剖镜下，可以观察腹部背面的黑色条纹数和腹 部腹面的腹片数。主要优点是操作简单， 容易观察。 尤其是在没有显微镜设备或者观
11、察速度要求较高 的情况下使用。七、注意事项配制培养基时的注意事项有： 1、配制培养基用的饲养瓶以及瓶塞要经过严格的灭菌消毒，否则瓶中饲料极 易染菌，导致实验失败。 2、要严格按照配方称取培养基各组分并按规定顺序添加。尤其是pH不要调 过头，以避免回调而影响培养基内各离子的浓度。 3、在加热过程中要不断搅拌， 防止底部糊底烧焦， 同时也防止培养基溢出搪 瓷缸。 4、要趁热将饲料倒入已消毒的培养瓶中，防止琼脂的凝固作用使饲料固化而 无法进行转移。 5、分装时注意不要使培养基沾染在管口或瓶口，以免浸湿棉塞， 引起污染。 6、配好的培养基应放到干净的地方保存。果蝇观察时的注意事项有： 1、在接放果蝇时， 要注意正确使用乙醚麻醉剂，用完后应立即盖好， 同时实 验室保持通风。 2、麻醉要适度。过度麻醉将导致果蝇死亡。 当看到瓶内果蝇全部跌落不动时， 应立即将软木塞打开， 散放掉一部分乙醚。 如进行引种培养则作轻度麻醉 为宜，如进行结果观察，致死也无妨。 3、不能让实验果蝇逃离进入自然环境中。观察或计数过程中， 如见果蝇翻身 走动可进行再麻醉。将麻醉瓶口朝下，盖于果蝇上方待其麻醉后再移开。 4、移动果蝇时动作要轻， 最好用毛笔转换果蝇姿势。 以免果蝇的各种身体器 官遭到物理损坏（如缺腿等） 。 5、用显微镜观察果蝇有无性梳以判断性别时，要先用低倍镜找到合适的区域， 再用高倍镜仔细观察。
