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1、 08-07 Nucleic Acid Purification Kit MagExtractor-Plasmid- (Code No. : NPK 300,301) 使用说明书使用说明书 研究用研究用 TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN 目目 录录 1 前言. 1 2 使用前须知. 1 3 试剂盒中所包含的物品. 2 4 操作程序. 2 1试剂盒以外所需要的其他物品. 2 （1）试剂. 2 （2）器具器材. 3 2抽提流程. 3 3宿主菌的培养. 3 4集菌. 4 5试剂的制备. 5 6使用MFX-2000 抽提Plasm
2、id DNA的方法. 5 （1）操作程序的选择. 5 （2）加温block，回收block的温度设定*1. 7 （3）附带专用过滤器的tip头设置. 7 （4）专用试管的设置. 8 （5）试剂的设置. 8 （6）样品的前处理及其设置. 11 （7）抽提开始. 12 （8）样品回收. 12 （9）通过手动法抽提plasmid DNA的方法. 12 5 一般样品的分析. 14 （1）A260，A280，A320 的测定 . 14 （2）电泳. 14 （3）DNA 测序. 15 6 疑难解答. 16 1使用MFX-2000 的场合. 16 2使用手动操作的场合. 16 【 注意 】 本试剂盒中所包含
3、的试剂都是研究用试剂。请不要用于诊断，临床等场合。在使用本试剂盒的时候，请严格遵守实验室的基本注意事项，并注意安全。 1 前言前言 MagExtractor -Plasmid-利用在 Chaotrpic（盐）试剂存在的情况下，核酸能吸附在硅胶表面的特性，进行 plasmid DNA 的抽提纯化。磁性体使用的是封入的磁珠，所以能够利用永久磁石很容易地分离回收核酸。磁珠依据吸附条件，分别对蛋白质，DNA，RNA 等不同物质具有不同的吸附能力，所以能够简便地纯化核酸。本试剂盒除了作为用于全自动核酸抽提装置 MFX-2000 的试剂外，也可以作为手动抽提试剂盒来使用。 性能特征性能特征 能够从大肠菌中
4、抽提纯化出 plasmid DNA 能够回收 36g的plasmid DNA（50150ng/l）*1，可用于转化，限制酶处理，DNA 测序反应等。 能在 1015min 之内抽提出 plasmid DNA。 不使用苯酚、氯仿等危险溶液。 无需乙醇沉淀。 2 使用前须知使用前须知 1） 注意注意 MagExtractor -Plasmid-准备了四种对应于 MFX-2000， 二种对应于手动的操作程序。使用对磁珠不进行干燥处理的操作程序（手动操作程序以及MFX-2000 的”Speedy”和”Lowcost”等操作程序）所得到的回收液，需要注意以下几点。 对于限制酶及转化处理，可直接加以使用。
5、 琼脂糖电泳时的 Loading Dye 必须使用本试剂盒附带的产品。使 用一般的产品组分时，可能样品会无法沉淀。 当用于 DNA 测序时的模板时， 乙醇会阻碍测序反应， 可将回收液置于 1.5ml试管内，保持试管打开状态加温至 78 40min。 （也可只加温处理必要的剂量。参考 13 页。 ） 为了不让乙醇混入回收液中，请使用手动操作程序（参考 1213 页） ，http:/www.bio- 1东洋纺（上海）生物科技有限公司 如果是 MFX-2000 的场合下，请使用”Dryup”或”Fullauto”等操作程序。 *1 从M109/pUC19 过夜培养液中进行抽提的场合。 3 试剂盒中所
6、包含的物品试剂盒中所包含的物品 本试剂盒中含有能够进行 50 次 plasmid DNA 回收的试剂量。 13x 2ml. 吸附液（含有蛋白质变性剂）.4或者室温下保存 2ml. 磁珠.4或者室温下保存 2ml. 磁珠.4或者室温下保存 8ml. 再悬浮液.4下保存 16ml. 溶解液（含有蛋白质变性剂）4或者室温下保存 8ml. 溶解液（含有蛋白质变性剂）.4下保存 6.5ml. 中和液.4或者室温下保存 6ml. 溶出液.4下保存 1.1ml. 5 x Loading Dye.4下保存 试剂如果沾在手或衣服上或使用后，请彻底用清水清洗。万一不慎进入眼睛，立刻用清水彻底清洗，然后去看医生。 溶解液有时会产生析出物。请在室温40下完全溶解后再使用。 溶解液，的混合液在室温下保存超过三个星期后请不要再使用。*1溶解液，以外的试剂请在 4下保存。 使用本公司的核酸自动抽提装置 MFX-2000 的情况下，请在指定的瓶中注入必要
