液相色谱仪工作流程图 ( 原理)南京科捷 是分析仪器生产型厂家，专业生产气相色谱仪、液相色谱仪、 色谱仪配件、 色谱零件，并提供色谱仪售前售后服务与您共享技术文章：液相色谱仪工作流程，液相色 谱仪原理，欢迎您技术咨询、业务咨询025-83312752 13951691728 现在的液相色谱仪一般都做成一个个单元组件，然后根据分析要求将各所需单元组件组合起来最基本的组件是高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据系统( 记录仪、积分仪或色谱工作站) 此外，还可根据需要配置流动相脱气装置、梯度洗脱装置、自动进样系统、 柱后反应系统和全自动控制系统等图 8-1 是具有基本配置的液相色谱仪的工作流程图液相色谱仪的工作过程：输液泵将流动相以稳定的流速( 或压力 ) 输送至分析体系，在色谱柱之前通过进样器将样品导入, 流动相将样品带入色谱柱,在色谱柱中各组分因在固定相中的分配系数或吸附力大小的不同而被分离，并依次随流动相流至检测器，检测到的信号送至数据系统记录、处理或保存图8-1 是具有基本配置的液相色谱仪工作流程图：进样器从液相色谱仪工作流程图看出，进样器是将样品溶液准确送入色谱柱的装置，分手动和自动两种方式。
进样器要求密封性好，死体积小， 重复性好， 进样时引起色谱系统的压力和流量波动要很小 现在的液相色谱仪所采用的手动进样器几乎都是耐高压、重复性好和操作方便的六通阀进样器，其原理与气相色谱中所介绍的相同色谱柱1. 色谱柱的构成从液相色谱仪工作流程中看到，色谱柱是实现分离的核心部件，要求柱效高、 柱容量大和性能稳定柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关色谱填料：经过制备处理后，用于填充色谱柱的物质颗粒，通常是5-10 粒径的球形颗粒色谱柱管：内部抛光的不锈钢管典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm，长 250mm 色谱柱：也称固定相，是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的, 其结构如图8-8 所示2. 色谱柱的填充干法填充：在硬台面上铺上软垫，将空柱管上端打开垂直放在软垫上，用漏斗每次灌入50-100mg 填料，然后垂直台面墩10-20 次湿法填充：又称淤浆填充法，使用专门的填充装置( 图 8-9) 数据处理系统与自动控制单元数据处理系统：又称色谱工作站它可对分析全过程( 分析条件、仪器状态、分析状态)进行显示， 自动采集、 处理和储存分析数据一些配置了积分仪或记录仪的老型号液相色谱仪在很多实验室还在使用，但近年新购置的色谱仪，一般都带有数据处理系统，使用起来非常方便。
自动控制单元：将各部件与控制单元连接起来，在计算机上通过色谱软件将指令传给控制单元， 对整个分析实现自动控制，从而使整个分析过程全自动化也有的色谱仪没有设计专门的控制单元，而是每个单元分别通过控制部件与计算机相连，通过计算机分别控制仪器的各部分液相色谱仪流程图＋气相色谱仪流程图+高效液相色谱仪结构作者：杭州赛尔泰科技有限公司2009-08-04 点击 194 二元和四元都能做梯度洗脱， 不同的是二元是两个泵组成的高压泵，将两个流路 来的液体进行混合；而四元泵是一个泵，通过比例阀来调节流动相之间的配比 我看一般的实验都是二元就够用了，是不是流动相有多种成分 （超过两种） 要按 比例混合才会用到四元泵？还有一点，6 楼所说四元低压混合是泵后混合，8 楼说低压一般是泵前混合， 偶一直也认为低压混合是泵前混合，不知怎么解释？难 道是不同的厂家泵的结构原理以及混合方式都不同？ 在价格上二元高压与四元低压是相等的，只有四元高压才比四元低压贵，但你得 到了货真价实的四台泵，所以泵的寿命就可以相当于低压液相的几倍 在使用上二元高压已能满足分析要求，在最新的中国药典中安捷伦虽然采用四元 低压液相进行分析， 但是在分析方法上均采用二元梯度，而且没有一例是二元以 上的。
在性能上高压液相系统远远高于低压系统，低压系统唯一的优点只是更换流动相 方便些 通常来讲， 二元指二元高压溶剂输送系统，四元指四元低压溶剂输送系统二元高压是有两个高压输液泵， 分别输送一种流动相，实现梯度洗脱，也就是所谓的泵后混合；四元低压是由一个高压输液泵，通过时间比例阀次序选择不同流动相而实现梯度洗脱，就是通常所说的泵前混合二元高压形成的梯度比例，是依靠两个输液泵来计量，远比时间比例阀依靠时间分配更为准确，特别是两相比例相差较大时，所以高压梯度具有更高的梯度精度我们知道在梯度洗脱中，梯度延迟体积非常重要，特别是复杂样品的分析，低的延迟体积具有更快的梯度响应时间，能够实现更好的样本在同个色谱柱上的分辨率二元高压的延迟体积是从混合器后开始计算的，而四元低压是从比例阀混合部分开始计算的，多出了泵死体积、 泵到比例阀的管线和泵到混合器的管线，所以四元低压的梯度延迟梯度较二元高压要大，梯度响应慢我们知道流动相都会溶解一定的气体，二元高压是泵后混合，气体的溶解度随压力的增大而增大， 所以二元高压混合不会产生气泡当然有时我们会看到检测器明显有气泡产生的噪音， 那是由于流动相流出色谱柱后，压力降低， 气体从流动相中溢出产生的气泡，一般可以在流通池后增加一定的反压就可以解决。
而四元低压是泵前混合，是在常压下进行的，由于两种液体混合，会降低气体在混合溶液中的溶解度，所以通常会有气泡产生（除非流动相预先经过严格脱气处理），这就是为什么四元低压一般都要配脱气机 的主要原因二元高压同四元相比唯一的不足，就是数量上的差别，二元高压只能同时使用两种流动相，而四元低压同时可以使用四种流动相但通常的样品分离，两种流动相的梯度洗脱足可以解决问题，即使有三种流动相色谱条件，使用两种流动相调整梯度条件也足可以实现色谱仪器词条正文(92 条 ,14079 字,丁明玉 ) 1.色谱仪chromatograph 进行色谱分离分析和制备的仪器它是由高压输液泵、进样器 、分 离柱、 检测器和数据处理系统（色谱 工作站 ）等五个基本部分和相关辅助部件构成的一个色谱分离分析体系根据色谱方法的差异可分为气相色谱仪 、液相色谱仪 、离子色谱仪 、超临界色谱仪和 毛细管电泳仪 等等；根据用途的不同可分为分析型色谱仪、制备色谱仪 和工业色谱仪等等2.分析型色谱仪analytical type chromatograph 用于样品中各组分的分离及其物质组成和含量分析的色谱仪器其特点是柱容量小，分离效率和检测灵敏度高，可用于复杂样品、微量和痕量组分的分析。
3.进样阀injection valve 又称阀进样器，是将样品准确定量地导入色谱体系的多通阀最常用的是六通阀进样器，其结构如图所示进样体积由样品环确定操作时先将阀柄置于采样位置， 这时进样口只与样品环接通，处于常压状态， 用微量注射器注入样品溶液，样品停留在样品环中 将进样器阀柄顺时针转动600 至进样位置时， 流动相与样品环接通，样品被流动相带到色谱柱中4.样品环sample l 体积的样品环loop 又称定量管或定量环，是液相色谱六通阀进样器上用来准确确定进样体积的金属管，其体积是固定的，液相色谱中通常使用的是10、20 和 50 5.单向阀one-way 2 个蓝宝石或陶瓷球，由其起阀门作用下面的单向阀与流动相连通，为活塞的溶液入口；上面的单向阀与色谱柱相连，为活塞的溶液出口活塞柱与活塞缸壁之间是由耐腐蚀材料制造的柱塞垫，以防漏液 柱塞向外移动时，出口单向阀关闭，入口单向阀打开， 溶液（流动相） 抽入活塞缸 当柱塞向里移动时，入口单向阀关闭，出口单向阀打开，流动相被压出活塞缸，流向色谱柱valve 只允许溶液单向流动的阀门，是液相色谱仪输液泵系统的主要元件其构造参见 “ 单活塞往复泵 ” ，在活塞的右端有上下两个单向阀，各有1 6.检测器detector 检测器是用来连续监测经色谱柱分离后的流出物的组成和含量变化的装置。
它利用溶质 （被测物） 的某一物理或化学性质与流动相有差异的原理，当溶质从色谱柱流出时， 会导致流动相背景值发生变化，并将这种变化转变成可检测的信号，从而在 色谱图上以色谱峰的形式记录下来7.通用型检测器common detector 是对所有溶质或含有溶质的柱流出物都有响应的检测器所谓通用也只是相对的，不可能存在一种对任何物质都有响应，且具有一定响应强度的检测器最常见的通用型检测器有示差折光检测器、热导检测器、 介电常数检测器和火焰离子化检测器通用型检测器容易受共存非被测组分的干扰8.选择性检测器selective detector 只对某类溶质或含有该类溶质的柱流出物有响应，而对其他物质无响应或响应很小的检测器常用的选择性检测器有紫外-可见光检测器、电导检测器、 荧光检测器 、化学发光检测器、安培检测器和光散射检测器等等9.脱气装置degasser 在液相色谱中，用来脱除流动相溶液中溶解气体的装置因为流动相中的溶解气体往往会给色谱分析 带来麻烦，如气泡进入检测器后会引起检测信号的突然变化； 小气泡慢慢聚集所形成的大气泡进入流路或色谱柱中会使流动相的流速变慢或出现流速不稳定，致使基线起伏。
所以，流动相输送至色谱体系之前要先脱气10.便携式色谱仪portable chromatograph 体积小、重量轻、便于携带的小型色谱仪器如在日本已经商品化的便携式离子色谱仪是将泵、进样器、 柱温箱、 电导检测器、 数据处理机以及流动相和废液瓶全部放置在一个便携式箱中，总质量只有15kg，既可以在野外用直流电，也可以在实验室用交流电驱动，特别适合于野外环境样品的快速分离与测定11.制备柱preparation 100 厘米20 厘米，柱长为50 column 用于从混合物中分离制备纯物质的色谱柱其柱尺寸比分析型色谱柱大得多，通常内径为10 12.制备色谱仪preparative 15mg 溶质制备色谱被广泛用于生物医药领域250mL/min ，一次进样量可达10 chromatograph 利用液相色谱技术的高分离效率和高选择性从复杂的混合物中分离制备纯物质的色谱仪器它与分析型液相色谱仪的差别在于泵流量和柱尺寸大，而且需配置馏分收集器典型的制备色谱仪所用制备柱尺寸是25 毫米内径和500 毫米长，相应的泵流量为50 13.凝胶色谱 仪gel chromatograph 专门用于测定有机高分子化合物的分子量和分子量分布的液相色谱仪。
它与普通液相色谱仪的不同之处是它所用的色谱柱是多孔惰性填料，它所用检测器则主要是适合高分子有机物检测的折射率检测器、光散射检测器和粘度检测器14.超临界流体色谱仪supercritical fluid chromatograph 是专门用于超临界流体色谱分离的一种色谱仪器 它与普通液相色谱仪的不同之处是它的流动相需要有控制温度和压力的装置来保证流动相（如CO2）处于超临界状态其检测器则是液相色谱中最常用的紫外检测器和气相色谱中常用的氢火焰离子化检测器15.控制单元control unit 在色谱装置中用于控制各部件运转和条件变更的单元也有的新型色谱仪是由色谱软件通过连接在仪器各功能部分的控制部件分别直接控制色谱仪的各个部分16.逆流色谱 仪 counter current chromatograph 是一种不用任何固体基质的液液分配色谱仪它根据流体力学原理，使溶质在物理性质（密度、 粘度和表面张力）不同的两液相中实现对流分离 因为它不使用固定相载体，所以不会发生样品的吸附、沾污和变性等问题，使分离样品的纯度高， 回收率高， 而且容易实现实验室制备量级的分离纯化同时， 对样品的预处理要求也可大大降低，适合于组成复杂的样品的中间或最终纯化制备。
17.柱温箱column oven 色谱仪中用于对色谱柱和检测器等部件进行恒温的装置柱温箱通常能在室温至80℃范围内进行控温18.隔膜泵diaphragm pump 基于隔膜的运动来完成吸液和排液的一种高压输液泵其结构如图所示， 通过。