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1、1全国艾滋病全国艾滋病检测检测技技术规术规范范（ （试试行）行）中国疾病中国疾病预预防控制中心防控制中心二二三年五月三年五月2第二版第二版 全国艾滋病全国艾滋病检测检测工作工作规规范范 修改修改说说明明艾滋病检测工作具有严格的科学性和政策性。为了加强全国艾滋病检测工作的规范化管理和质量控制，确保每一例检测的准确性和可靠性，及时有效地发现感染者和上报疫情，1997 年 9 月卫生部对 1990 年发布的全国 HIV 检测管理规范（试行）修改补充后，颁布了第一版全国艾滋病检测工作规范。 全国艾滋病检测工作规范实施五年多来，在全国艾滋病检测实验室的设置、申报、验收和审批，HIV 抗体检测工作的规范化
2、和质量管理，检测结果的判定、报告和反馈，实验室安全以及 HIV 感染者和艾滋病患者的保密等方面均发挥了重要的作用。艾滋病在我国的流行已经近 20 年，流行形势日趋严峻，据估计截至 2002 年底 HIV感染者已逾百万，随着感染者数量的不断增加和临床病人的日益增多，检测工作的量也在不断加大，各级艾滋病检测实验室也由疾病预防控制系统逐渐遍及医院、血站、出入境检验检疫局、妇幼、军队等各个系统。因此，早期制定的“全国艾滋病检测工作规范”已经不能满足目前各个系统对艾滋病检测工作的需求。此外，近年来，检测技术和方法有了很大的发展和提高，对于保障血液安全和缩短窗口期等也提出了更高的要求，因此，仅靠单纯的血清
3、学检测方法已经不能满足需求。为了更好的指导全国的艾滋病检测工作，不断提高检测工作质量，需要进一步丰富有关的检测技术内容，制定更加完善的可满足各个系统需求的检测工作规范。2001 年由艾滋病确认实验室审评专家委员会组织对第一版全国艾滋病检测工作规范进行修改、补充工作。经初步修改后，于 2001 年 11 月召开的“全国艾滋病检测工作年会”上各确认实验室的专家及技术人员对修改稿进行了讨论，与会者提议，考虑到检测技术和方法的快速发展和卫生部的职能下放等因素，为便于检测工作的管理、及时增加和补充新的技术内容，建议将原“全国艾滋病检测工作规3范”修订为“艾滋病检测工作管理办法”（下称“办法”）和“艾滋病
4、检测技术规范”（下称“规范”），使艾滋病检测工作的管理和技术文件能够更加准确地为全国艾滋病检测实验室提供服务。这个建议当即得到卫生部参会领导的认可。“办法”和“规范”的制定工作历时二年余。为了适应我国艾滋病防治工作的要求，尽量满足各级各类艾滋病检测实验室的管理和技术需求，同时紧跟国际检测技术和策略的发展与更新，专家组起草的“办法”和“规范”修改稿反复多次征求了各方面专家和具有丰富实践经验的第一线工作人员的意见，参考国际标准和有关的新进展，并于 2002 年 12月“艾滋病检测工作年会”上再次讨论了“办法”和“规范”，特别对其可操作性进行了仔细讨论。会后由性病艾滋病预防控制中心分别将“办法”和“
5、规范”发至各省艾滋病确认实验室再次征求了意见。此外，本次修改的“办法”和“规范”还参考了国际标准化组织的相关草案（ISO/DIS15189 和 15190），使其与国际检测技术和策略紧密接轨。“全国艾滋病检测技术规范（试行）”由中国疾病预防控制中心颁布。该“规范（试行）”适用于全国所有的艾滋病检测实验室。 “规范”共分为 7 章，内容包括：样品的采集和处理，HIV 抗体、抗原检测，HIV 核酸检测，HIV 实验室安全防护，艾滋病实验室质量管理，艾滋病确认实验室质量考评办法，HIV 诊断试剂临床评估方案 ，以及附录 1（HIV RNA 测定）。“全国艾滋病检测工作管理办法”在征求各省卫生厅意见后
6、由卫生部颁发， “办法”颁发之前， “全国艾滋病检测技术规范（试行）”中没有涉及到的有关检测工作管理部分的内容仍然按照“全国艾滋病检测工作规范（1997 年版）”执行。4目目 录录第一章 样品的采集和处理 1一、样品的采集 1二、样品的保存 1三、样品的运送 1四、样品的接收 2第二章 HIV 抗体、抗原检测 2一、HIV 抗体检测 2二、HIV-1 P24 抗原检测 8第三章 HIV 核酸检测 8一、实验室条件 8二、方法和试剂 10三、检测程序 10四、结果判定和报告 11五、实验室管理 11第四章 艾滋病检测实验室安全防护 12一、建立安全制度 12二、人员管理和培训 13三、安全保障措
7、施 135四、实验室事故处理 14第五章 艾滋病实验室质量管理 15一、质量保证(QA )15二、质量控制(QC) 18三、质量评价(EQA)21第六章 艾滋病确认实验室质量考评办法 22一、考评目的 22二、考评对象及组织单位 23三、考评内容和方式 23四、考评工作程序 23五、考评结果的判定 24六、考评结果的处理 24第七章 HIV 诊断试剂临床评估方案 25一、评估的目的 25二、评估组织及参加单位 25三、评估程序 26四、评估结果的分析及统计处理 27五、评估结果的收集、分析、上报和反馈 27附表 1 HIV 抗体筛查报告 28附表 2 HIV 抗体筛查阳性送检单 296附表 3
8、 HIV 抗体检测确认报告 30附表 4 HIV 抗体检测数及阳性人数统计报表 31附表 5 艾滋病职业暴露个案登记表 32附表 6 职业暴露后预防 HIV 感染的评价和处理程序35附录 1 HIV RNA 测定 371第一章第一章 样样品的采集和品的采集和处处理理一、样品的采集一、样品的采集艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用样品的采集方法如下：（一）血清样品采集：用注射器抽出一定量静脉血，室温下自然放置 1-2 小时，待血液凝固和血块收缩后再用 3000rpm 离心 15 分钟，吸出血清备用。（二）抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空采血管
9、或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。应根据实验要求选用适当的抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠等），如需进行病毒 RNA 测定，应在 4-8 小时以内分离血浆。（三）采样注意事项1、采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。2、采集标本时应注意安全，直接接触 HIV 感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。建议采用真空采血管及蝶形针具，以免直接接触血液。二、样品的保存二、样品的保存（一）用于抗体检测的血清或血浆样品应存放于-20以下， 短期内（1 周）内进行检测的样品可存放于 2-8。（二）用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存
10、于-20以下，进行病毒 RNA 检测的样品如长期（3 个月以上）保存应置于-80。三、样品的运送三、样品的运送2（一）实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。随样品应附有送检单，送检单应与标本分开，不能混放。（二）将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。如果路程较远或气候炎热，应在 2-8条件下运送。用于抗体检测的样品可在短期内（48 小时）室温递送。每一包装的体积不得超过 50ml。运送感染性材料必须有记录。（三）特殊情况下如
11、需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须将盛样品的试管包扎好，避免使用玻璃容器，以保证不会破碎和溢漏。四、样品的接收四、样品的接收（一）含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。（二）核对标本与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。（三）检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。（四）因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。第二章第二章 HIV 抗体、抗原抗体、抗原检测检测一、一、HIVHIV 抗体检测
12、抗体检测（一）检测试剂1、筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、临床评估质3量优良、在有效期内的试剂。目前常用的筛查试剂有酶联免疫、颗粒凝集和其它快速诊断试剂。采供血机构进行血液筛查应采用 HIV-1/2 混合型酶联免疫试剂。自采自供血的单位必须进行 HIV 抗体检测，在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区可由经过培训的技术人员在规定的场所用快速试剂进行血液筛查。2、确认试剂必须经国家食品药品监督管理局注册批准。确认试剂包括免疫印迹试验试剂、条带免疫试验试剂及免疫荧光试验试剂。目前以免疫印迹试剂最为常用。（二）检测要点1、严格按照试剂说明书操作，不得擅自更改。2、注意防止交
13、叉污染。3、严格遵守实验室操作规程。（三）检测程序及流程图1、筛查试验检测标本验收合格后，用筛查试剂进行检测，如呈阴性反应，报告 HIV 抗体阴性；对呈阳性反应的标本，须进行重复检测。2、重复检测对筛查呈阳性反应的标本用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂重复检测。如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告 HIV 抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。应尽可能将重新采集的受检者血液标本和原有标本一并送检。3、筛查试验的流程图样 品筛查试剂4（四）HIV 抗体确认试验1、常用的确认实验方法是免疫印迹法（WB）。2、免疫印迹试剂有 HIV-1/2 混合型和单一型。一般先用 HIV-1/2 混合型试剂
