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1、老年肺癌患者外周血单个核细胞 hTERT 基因表达【关键词】肺肿瘤Expression of human telomerase reverse transcriptase gene inperipheral blood mononuclear cells of lung cancer in elderly patients【Abstract】 AIM: To investigate the significance of theexpression levels of human telomerase reverse transcriptase (hTERT)gene in periphera
2、l blood mononuclear cells of lung cancer in elderlypatients. METHODS:The expression levels of hTERT were detected in20 elderly patients with lung cancer and 10 normal elderly subjectsby quantitative measurement with RTPCR. RESULTS:The expressionlevels of hTERT mRNA in the lung cancer patients (0. 92
3、7 + 0. 115) weresignificantly higher than those in normal subjects (0. 408 + 0. 124,P0. 001), without significant correlation with pathological types andclinical stages. CONCLUSION:The quantitative measurement with RTPCRfor the expression levels of hTERT raRNA is an effective method in thediagnosis
4、of lung cancer in patients who are not fit for otherexaminations.Keywords aged; lung neoplasms; human telomerase reversetranscriptase; gene expression【 摘 要 】 目 的 ： 探 讨 外 周 血 单 个 核 细 胞 (PBMCS) 的 人 端 粒 酶 反 转 录 酶010 基 因 的 表 达 水 平 对 于 老 年 肺 癌 的 诊 断 意 义 . 方 法 ： 采 用 1?08 定 量 检测 20 例老年肺癌患者及 10 例正常老年人外周血单个核
5、细胞的 hTERT 的基因表达 水 平 . 结 果 ： 老 年 肺 癌 患 者 114 的 水 平 明 显 高 于 正 常 对 照 组(0.9270.115 vs 0.4080.124, P0.001). 与 病 理 类 型 与 临 床 分 期 无 相 关性 . 结 论 ： 定 量 测 定 PBMCs 的 hTERT mRNA 的 表 达 水 平 是 诊 断 不 适 合 其 他 检 查的老年肺癌患者的有效方法.【关键词】老年人；肺肿瘤；人端粒酶反转录酶；基因表达0 引言老年疑似肺癌患者的明确诊断一直是长期困扰临床医生的实际问题 .端粒酶可作为一种肿瘤标记物已在多组研究中被证实 .我们研究的目的
6、是探讨外周血单个核细胞(PBMCs)的人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的表达水平对于老年肺癌的诊断意义.1 对象和方法200201/200412 我院住院的老年肺癌患者 20 例，男 15 例，女5例，年龄6 广82 (706)岁.患者依据病史、临床表现、乂 8 dd.H20 9.5 M L;10Xbuffer 1.25 p L; dNTP 1 M L; TaqR0. 1 M L; hTERTR 0. 1 M L;hTERTf 0.1 M L.放入 PCR仪内扩增，反应条件为 931 预变性 3 min-94“C,45 s57. 6C, 1 min72C 1 min,共 35 个循环.1.2
7、. 6PCR 产物检测取10 M L hTERTmRNA 的 PCR产物在 20 g/L的琼脂糖凝胶中电泳（电泳仪为：DYYIII33AS)，在紫外凝胶扫描仪观察拍照，并存AlD Kadak 成像分析系统，分别计算出端粒酶 1抓似基因和 0 &化基因的峰体积，计算出它们的比值.统计学处理：数据用33表示，用 3?3510.0统计软件包进行单因素的方差分析与方差的齐性检验.2 结果老年肺癌患者 PBMCs 的 hTERTmRNA的水平为 0. 9270. 115,对照组的PBMCs 的hTERTmRNA的水平为 0. 4080. 124,两者比较有差异有统计学意义(P0.01),电泳见明显分带（
8、图 1).在 20例肺癌患者中小细胞癌5 例，磷癌6 例，腺癌9例；hTERTmRNA 的表达与病理类型和分期无相关（表 1).表 1 临床分期和病理类型与肺癌患者外周血 hTERTmRNA 的表达(略）3 讨论端粒酶是一种核糖核蛋白复合体，是一种专一的逆转录酶，能以自身的RNA 为模板从头合成端粒酶以补偿细胞分裂时染色体末端缩短，维持端粒不变，保持染色体的动态平衡1.近年研究表明端粒酶的活化在细胞癌变中发挥重要作用 2 . 由于端粒酶的活化，使端粒的长度维持一种动态平衡，细胞得以无限制的繁殖下去，导致肿瘤的发生.目前测定端粒酶的活性主要采用以1 等 3 建立得以 PCR 为基础的 TRAP法
9、 . 陈杰 4 对 47 例肺 癌及 其相 应 的 癌 旁 组织 进行 端粒 酶活 性及 1 八的检测，结果肺癌组织端粒酶活性及旧八表达均高于癌旁组织.我们的实验结果表明，老年肺癌患者 PBMCs 的 hTERTmRNA 水平明显升高，结果与文献报 道 的 相似 . 说 明端 粒酶 在肺 癌的 发生 发展 中可 能 起 到某 种重 要的 作用 .1尺如咖八的表达与病理类型和临床分期无相关性，与文献结果一致5；在此方面的研究中存在一些争议，有待扩大样本作进一步研究 .肿瘤细胞端粒酶激活是一种反应模式，这是一种不依赖于端粒长度的酶激活模式 .其认为肿瘤细胞主要来自端粒酶阴性的前体细胞只有当端粒酶缩
10、短到一定程度后才会激活端粒酶，因此这在肿瘤的发生中是晚发事件，大多数实体肿瘤即以这种模式保持端粒酶活性 6 . 因此，我们认为此过程可能成为肺癌端粒酶的激活途径.【参考文献】1Wu TC, Lin P, Hsu CP, et al. Loss of telomerase activitymay be a potential favorable prognostic marker in lung carcinomasJ . Lung Cancer, 2003, 41(2):163-169.2Lantuejoul S, Soria JC, MoroSibilot D， et al. Differe
11、ntialexpression of telomerase reverse transcriptase (hTERT)in lung tumours J . Br J Cancer, 2004,90(6):1222-1229.3Kim NW, Piatysezk MA, Prowes KR, et al. Specific associationof human telomerase activity with immortal cells and cancer J .Science, 1994，266(93):2011-2015.4陈杰.肺癌组织中虹灯及？16基因的表达_1.武汉大学学报，2005,1(26):11-14.5张湘燕，冯端兴，陈志昌，等.原发性肺癌组织端粒酶1灯基因表达的研究 J . 遵义医学院学报，2004,27 (4) :340-342.6田凤军，王智勇，马俊义，等.逆转录病毒介导反义虹灯对肺癌细胞的抑制作用 J . 癌症，2004,23(5):545-549.
