各种平板配方

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1、 培养基配方培养基配方 1 玫瑰红钠琼脂培养基胨 5.0g 玫瑰红钠 0.0133g 葡萄糖 10.0g 琼脂 14.0g 磷酸二氢钾 1.0g 水 1000ml 硫酸镁 0.5g 除葡萄糖、玫瑰红钠外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,加入葡萄糖、玫瑰红钠,分装,灭菌。2 酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨 10.0g 琼脂 14.0g 酵母浸出粉 5.0g 水 1000ml 葡萄糖 20.0g 除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,加入葡萄糖,分装,灭菌。3 胆盐乳糖培养基(BL)胨 20.0g 磷酸二氢钾 1.3g 乳糖 5.0g 牛胆盐 2.0g 氯化钠 5.0g(或去氧

2、胆酸钠)(0.5g)磷酸氢二钾 4.0g 水 1000ml除乳糖、牛胆盐(或去氧胆酸钠)外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH值使灭菌后为 7.40.2,煮沸,滤清,加入乳糖、牛胆盐(或去氧胆酸钠) ,分装,灭菌。4 乳糖胆盐发酵培养基蛋白胨 20.0g 0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml 乳糖 10.0g 水 1000ml 牛胆盐 5.0g 除0.04%溴甲酚紫水溶液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为7.40.2,加入 0.04%溴甲酚紫指示液,根据要求的用量分装于含倒管/27.19 的试管中。灭菌。所用倒管的规格应保证产气结果的观察。5.曙红亚甲蓝琼脂培养基(EM

3、B)营养琼脂培养基 100ml 曙红钠指示液 2ml20乳糖溶液 5ml 亚甲蓝指示液1.31.6ml 取营养琼脂培养基,加热溶化后,冷至 60,按无菌操作加入灭菌的其他 3 种溶液,摇匀,倾注平皿。6.麦康凯琼脂培养基(MacC)胨 20.0g 1%中性红指示液 3ml 乳糖 10.0g 琼脂 14.0g 牛胆盐 5.0g 水 1000ml 氯化钠 5.0g 除乳糖、1%中性指示液、牛胆盐及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.20.2,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,灭菌,冷至约 60,倾注平皿。7.4-甲基伞形酮葡糖苷酸(4-methylu

4、mbelliferyl-D-glucuronide,MUG)培养基胨 10.0g 磷酸二氢钾(无水)0.9g 硫酸锰 0.5mg 磷酸氢二钠(无水)6.2g 硫酸锌 0.5mg 亚硫酸钠 40mg 硫酸镁 0.1g 去氧胆酸钠 1.0g 氯化钠 5.0g MUG 75mg 氯化钙 50mg 水 1000ml 除 MUG 外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.30.1,加入 MUG,溶解,每管分装 5ml,灭菌。8 三糖铁琼脂培养基(TSI)胨 20.0g 硫酸亚铁 0.2g 牛肉浸出粉 5.0g 硫代硫酸钠 0.2g 乳糖 10.0g 0.2%酚磺酞指示液 12.5ml

5、 蔗糖 10.0g 琼脂 12.0g/27.20 葡萄糖 1.0g 水 1000ml 氯化钠 5.0g 除三种糖、0.2%酚磺酞指示液、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.30.1,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,灭菌,制成高底层(23cm)短斜面。9.四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)胨 5.0g 硫代硫酸钠 30.0g 牛胆盐 1.0g 水 1000ml 碳酸钙 10.0g 取上述成分,混合,微温溶解,灭菌。临用前,取上述培养基,每 10ml 加入碘试液 0.2ml 和亮绿试液0.1ml,混匀。10.沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)胨 5.0g

6、 硫代硫酸钠 8.5g 牛肉浸出粉 5.0g 中性红指示液 2.5ml 乳糖 10.0g 亮绿试液 0.33ml 牛胆盐 8.5g 琼脂 16.0g枸橼酸钠 8.5g 水 1000ml 枸橼酸铁铵 1.0g 除乳糖、中性红指示液、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.20.1,滤过,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余各成分,摇匀,灭菌,冷至 60,倾注平皿。12.胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)胨 20.0g 枸橼酸钠 1.0g 牛肉浸出粉 3.0g 枸橼酸铁铵 1.0g 乳糖 10.0g 中性红指示液 3ml 蔗糖 10.0g 琼脂 16.0g 去氧胆酸钠 1.0g 水

7、 1000ml 硫代硫酸钠 2.3g/27.21 除糖、指示液及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.20.1,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余成分,摇匀,冷至 60,倾注平皿。13.溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基胨 10.0g 溴化十六烷基三甲铵 0.3g 牛肉浸出粉 3.0g 琼脂 14.0g 氯化钠 5.0g 水1000ml 除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为7.50.1,加入琼脂,加热溶化后,分装,灭菌,冷至 60,倾注平皿。14.亚碲酸盐肉汤培养基临用前,取灭菌的营养肉汤培养基,每 100ml 中加入新配制的 1%亚碲酸钠(钾)试

8、液 0.2ml,混匀,即得。15.卵黄氯化钠琼脂培养基胨 6.0g 10%氯化钠卵黄液 100ml 牛肉浸出粉 1.8g 琼脂 14.0g 氯化钠 30.0g 水650ml 除 10%氯化钠卵黄液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.60.1,灭菌,待冷至约 60,以无菌操作加入 10%氯化钠卵黄液,充分振摇,倾注平皿。10%氯化钠卵黄液的制备取新鲜鸡蛋 1 个,以无菌操作取出卵黄,放入10%无菌氯化钠溶液 100ml 中,充分振摇,即得。16.甘露醇氯化钠琼脂培养基胨 10.0g 酚磺酞指示液 2.5ml 牛肉浸出粉 1.0g 琼脂 14.0g 甘露醇 10.0g 水

9、 1000ml氯化钠 75.0g 除甘露醇、酚磺酞指示液及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.40.2,加入琼脂,加热溶化后,滤过,分装,灭菌,冷至60,倾注平皿。/27.2217.乳糖发酵培养基胨 20.0g 0.04%溴甲酚紫指示液 25ml 乳糖 10.0g 水 1000ml 除 0.04%溴甲酚紫指示液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.20.2,加入指示液,分装于含倒管的小试管中,每管 3ml。灭菌。18.绿脓菌素(Pyocyanin)测定用培养基(PDP 琼脂培养基)胨 20.0g 甘油 10ml 氯化镁(无水)1.4g 琼脂

10、 14.0g 硫酸钾(无水)10.0g 水1000ml 取胨、氯化镁、硫酸钾和水混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为7.30.1,加入甘油及琼脂,加热溶化,混匀,分装于试管,灭菌,置成斜面。19.梭菌增菌培养基牛肉浸出粉 10.0g 盐酸半胱氨酸 0.5g 胨 10.0g 氯化钠 5.0g 酵母浸出粉 3.0g 醋酸钠 3.0g 可溶淀粉 1.0g 琼脂 0.5 葡萄糖 5.0g 水 1000mL 取上述成分,混合,加热煮沸使溶解,调节 pH 值使灭菌后为 6.80.2,热溶化,滤过,分装,灭菌。20.哥伦比亚琼脂培养基酪蛋白胰酶消化物 10.0g 肉胃酶消化物 5.0g 心胰酶消化物 3

11、.0g 氯化钠 5.0g 玉米淀粉 1.0g 琼脂 15.0g 酵母浸出粉 5.0g 水 1000ml 除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.30.2,加入琼脂,加热溶化,滤过,分装,灭菌,冷至 4550,加入相当于 20mg 庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾注平皿。21.沙氏葡萄糖液体培养基葡萄糖 40g 水 1000ml/27.23 蛋白胨 10g 除葡萄糖外。取上述成分,混合,微温溶解,滤过。加入葡萄糖,溶解,分装,灭菌。22.沙氏葡萄糖琼脂培养基葡萄糖 40g 琼脂 1518g 蛋白胨 10g 水 1000ml 除琼脂和葡萄糖外。混合,微温溶解,滤过。

12、加入琼脂和葡萄糖,溶解,分装,灭菌。23.念珠菌显色培养基(CHROMagar)蛋白胨 10.2g 琼脂 15g 氢罂素 0.5g,灭菌水 1000ml 色素 22.0g 除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值至 6.30.2。滤过,加入琼脂,加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解,倾注平皿。24.1%吐温 80-玉米琼脂培养基黄色玉米粉 40g 琼脂 1015g 聚山梨酯 80 10ml 水 1000ml 取玉米粉、吐温 80及蒸馏水 500ml,混合,65加热 30 分钟,混匀,用纱布滤过,补足原水量。取琼脂,水 500ml,混合,加热溶解。将以上两种溶液混合,摇匀,分装,灭菌。二

13、盐酸二甲基对苯二胺试液取二盐酸二甲基对苯二胺 0.1g,加水 10ml,即得。需新鲜少量配制,于冷处避光保存,如试液变成红褐色,不可使用。亚碲酸钠(钾)试液取亚碲酸钠(钾)0.1g,加新鲜煮沸后冷至 50的水 10ml使溶解。玫瑰红钠试液取玫瑰红钠 0.1g,加水使溶解成 75ml。亮绿试液取亮绿 0.1g,加水 100ml 使溶解。盐酸试液取盐酸 8.4ml,加水使稀释成 100ml。靛基质试液取对二甲氨基苯甲醛 5.0g,加入戊醇(或丁醇)75ml,充分振摇,使完全溶解后,再取浓盐酸 25ml 徐徐滴入,边加边振摇,以免骤热导致溶液色泽变深,或取对二甲氨基苯甲醛 1.0g,加入 95%乙醇

14、 95ml,充分振摇,使完全溶解后,取盐酸 20ml 徐徐滴入。碘试液取碘 6g 与碘化钾 5g,加水 20ml 使溶解。过氧化氢试液取浓过氧化氢溶液(30%) ,加水稀释成 3%的溶液。临用时配制。指示液中性红指示液取中性红 1.0g,研细,加 95乙醇 60ml 使溶解,再加水至100ml。变色范围 pH6.88.0(红黄) 。/27.26亚甲蓝指示液取亚甲蓝 0.5g,加水使溶解成 100ml。酚磺酞指示液取酚磺酞 1.0g,加 1mol/L 氢氧化钠溶液 2.82ml,使溶解,再加水至 100ml。变色范围 pH6.88.4(黄红) 。溴甲酚紫指示液取溴甲酚紫 1.6g,加 95乙醇使溶解成 100ml。变色范围pH5.26.8(黄紫) 。曙红钠指示液取曙红钠 2.0g,加水使溶解成 100ml。

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