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1、薇甘菊叶片浸出液化感作用机理分析计算机系 * 班学号： * 姓名： *日期： 2015-8-1 目 录1 引言 . 1 2 材料与方法 . 2 2.1 试验材料 . 2 2.2 实验方法 . 2 2.2.1 薇甘菊叶片浸出液的制备. 2 2.2.2 薇甘菊叶片浸出液对薏苡种子萌发特性的影响. 2 2.2.3 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗生长特性的影响. 3 2.2.4 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗过氧化物酶（Peroxidase ，POD) 活性的影 响. 3 2.2.5 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗过氧化氢酶（catalase ，CAT ）活性的影 响. 3 2.2.6 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗
2、丙二醛（Malondialdehyde ，MDA ）含量的 影响 . 3 2.2.7 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗可溶性糖含量的影响. 4 2.2.8 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗可溶性蛋白含量的影响. 4 2.2.9 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗脯氨酸（proline ，Pro）含量的影响 . 4 2.2.10 数据处理 . 5 3 结果与分析 . 5 3.1 薇甘菊叶片浸出液对薏苡种子萌发特性的影响. 5 3.2 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗生长特性的影响. 6 3.3 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗抗氧化能力的影响. 6 3.3.1 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗CAT活性的影响 . 7 3.3.2 薇
3、甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗POD 活性的影响 . 7 3.3.3 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗MDA 含量的影响 . 8 3.4 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗抗逆性的影响. 8 3.4.1 薇甘菊叶片提取物对薏苡幼苗可溶性糖含量的影响. 8 3.4.2 薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗可溶性蛋白含量的影响. 9 3.4.3薇甘菊叶片浸出液对薏苡幼苗Pro 含量的影响 . 10 4 讨论 . 11 4.1 薇甘菊不同浓度叶片浸出液对薏苡种子发芽率及幼苗生长的影响. 11 4.2 薇甘菊叶片浸出液化感作用的可能作用机理分析. 12 4.2.1 薇甘菊不同浓度叶片浸出液对幼苗抗氧化能力的影响. 12 4.2.2
4、 薇甘菊不同浓度叶片浸出液对薏苡幼苗抗逆性的影响. 12 5 结论 . 131 1 引言化感作用（Allelopathy） ， 又称为它感、异株相克作用，最早是由德国科学家 Molish于1937年提出，后经美国科学家 Rice将其定义为“一种植物通过它产生并释放于环境的生化物质对另一植物产生直接或间接的毒害作用”1。植物之间的化感作用是当前化学生态学研究的热点 , 它是指供体植物通过茎叶挥发、淋溶、凋落物分解、根系分泌等途径向环境中释放化学物质, 从而促进或抑制周围植物的生长和发育。化感作用是植物对环境适应的一种化学表现形式，而非外来植物所特有的，外来植物的化感作用是为了适应不良环境而达到与
5、本地生物争夺生存空间的目的。薇甘菊(Mikania micrantha H.B.K.) 是危害我国最严重的外来入侵害草之一，属菊科(Compositae) 假泽兰属 (Mikania) 多年生草质或稍木质藤本。薇甘菊原产于南美洲，60年代被引入印度尼西亚植物园用于橡胶园的地面覆盖，借助于当地温暖潮湿的泥土，很快在印度尼西亚、马来西亚、菲律宾、泰国等地蔓延开来，给当地的农业造成了重大的损失。薇甘菊 1984 年在深圳发现， 现在广泛分布在珠江三角洲地区，由于在本土地区没有天敌，又由于它通常生长在被破坏的林地边缘、荒弃农田、水库和沟渠或河道两边，人们对它的疏忽管理和不重视，而造成了当地的经济作物和
6、植被的巨大损失2。薇甘菊可能存在的化感作用会直接影响到其周围植物的生存状况，并且可以影响整个生态系统的种群分布格局和生物多样性。邵华3等分别用薇甘菊地上部分、根部、枯枝叶和土壤的水提液以及地上部分的石油醚、乙酸乙脂和乙醇提取液按照一定浓度对萝卜、黑麦草、白兰叶以及薇甘菊常见伴生树种马占相思、马尾松、大叶桉进行生物测定。研究表明薇甘菊地上部分水提液能够显著影响受体植物生长，根水提液的抑制作用程度稍低，而枯枝叶水提液基本无作用。薇甘菊地上部分的石油醚和乙醚提取物均对受体植物幼苗生长表现出一定的抑制作用，但是乙酸乙脂提取物的作用最强烈，可使种子发芽过程受阻，幼苗生长受抑制程度高达90%以上，显示化感
7、物质主要集中在这一部分，对受体种子的开始发芽时间、半数发芽时间乃至最终发芽率都有影响。梁斌等4等对薇甘菊提取物乙醇部分的化感作用的研究结果也表明，薇甘菊提取物乙醇部分对水稻、 萝卜、黄瓜、菜心具有不同程度的化感作用，总体上呈现出低促高抑的现象，且随着溶液浓度增大而抑制作用增强，其中干物质为0.1 g/ml 的乙醇部分溶液对菜心的种子萌发，幼苗生长，根长生长抑制作用最为明显；干物质为0.01 g/ml溶液对水稻的根长生长有明显的促进作用；干物质为 0.002 g/ml 溶液对水稻，菜心的种子萌发，幼苗生长，根长生长也2 有一定的促进作用。薏苡（ Coixlacryma jobi L. ），又名薏
8、米、六谷子，为禾本科（Poaceae ）一年或多年生草本。秆粗壮，直立，高 11.5米，多分枝。薏苡为薇甘菊群落中的主要草本植物5。本文以薏苡种子为研究对象，分析薇甘菊叶片提取物来模拟雨水淋溶产物对本地种种子萌发和幼苗生长的影响， 并通过测定薏苡种子萌发和幼苗生长过程中酶活性等生理指标来初步阐明薇甘菊化感作用的可能机理。2 材料与方法2.1 试验材料试验材料薇甘菊于 8月份采集于广东。受试植物薏苡种子购自山东荷泽中药研究所。2.2 实验方法2.2.1 薇甘菊 叶片浸出液的制 备采集薇甘菊叶片，剪碎，用蒸馏水浸泡 24小时，取其上清液，定容至叶片鲜重 400 mg/ mL ，过0.22 m 滤膜
9、，除菌待用。以此叶片浸出液模拟薇甘菊叶片正常雨水淋溶液。2.2.2 薇甘菊叶片浸出液对薏苡种子萌发特性的影响薏苡种子的培养及处理 : 将石英沙浸泡在 0.1% HCl 中 56 h，用清水清洗干净，取12个大培养皿，将石英沙均匀平铺在培养皿中， 以铺8 分满为准，后将薏苡种子先后经 20% CuSO4浸泡 10 min ，用水冲洗，用清水浸泡24 h ，用 70% 乙醇过 1 min ，以无菌水冲洗 3次，浸泡于 10% H2O2中 5 min ，以无菌水冲洗6 次，从经过一系列处理后的薏苡种子中挑选出大小基本一致的饱满种子均匀摆放在上述铺有石英砂的培养皿中，每个培养皿摆放种子 50 粒，分别加入不同浓度的叶片浸出液10 ml（对照加入无菌水10ml），包括对照共 4个处理，每个处理设 3个重复。将培养皿置于25 光照培养箱中培养，种子萌发以胚根突破种皮为准， 每天等量补充少量对应处理浓度的浸出液以保持培养皿中的石英砂保持相对湿润（对照为无
