《人的抑制素人的抑制素ββA(INHβA)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人的抑制素人的抑制素ββA(INHβA)（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、U U U U s c n s c n s c n s c n L L L L i f e i f e i f e i f e S S S S c i e n c e c i e n c e c i e n c e c i e n c e I n c . I n c . I n c . I n c . Wu h a n Wu h a n Wu h a n Wu h a n 网址 : w w w . u scn k. co m 电话 : + 8 6 2 7 8 4 2 5 9 5 5 2 传真 : + 8 6 2 7 8 4 2 5 9 5 5 1 E-mail: uscnku 人 的 抑 制
2、 素 人 的 抑 制 素 人 的 抑 制 素 人 的 抑 制 素 A ( I N H A ( I N H A ( I N H A ( I N H A ) A ) A ) A ) 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 试 剂 盒 使 用 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 试 剂 盒 使 用 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 试 剂 盒 使 用 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 试 剂 盒 使 用 说 明 书 说 明 书 说 明 书 说 明 书 产品 编号 ： E 0 8 3 8 H u 规格 ： 9 6 T 本试 剂盒 仅供 体外 研究 使用 ，不 用于 临床诊 断 本试 剂盒 仅供 体外 研究 使用 ，不
3、 用于 临床诊 断 本试 剂盒 仅供 体外 研究 使用 ，不 用于 临床诊 断 本试 剂盒 仅供 体外 研究 使用 ，不 用于 临床诊 断 ! ! ! ! 预期 应用 预期 应用 预期 应用 预期 应用 本酶联免疫吸附测定试剂盒运用双抗体夹心 E L I S A 法定量测定人血清、血浆或其它相 关生 物液 体中 INH-bA 含量 。 本 本 本 本 试剂 盒 试剂 盒 试剂 盒 试剂 盒 已提 供的 试剂 已提 供的 试剂 已提 供的 试剂 已提 供的 试剂 本 本 本 本 试剂 盒 试剂 盒 试剂 盒 试剂 盒 未提 供但 需自 备的 设备 及试 剂 未提 供但 需自 备的 设备 及试 剂
4、 未提 供但 需自 备的 设备 及试 剂 未提 供但 需自 备的 设备 及试 剂 1、 450 10n m 滤光 片 的 酶标 仪（ 建议 仪器 使用 前 提前 预热 ） 2、 单道 和多 道 微量 加液 器 及吸头 3、 稀释 样品的 E P 管 4、 蒸馏 水或 去离 子水 5、 吸水 纸 6、 盛放 洗液 的容 器 试 剂名称 数 量 9 6 孔板 ( 预包 被 ) 1 标准 品 ( 冻干 ) 2 标准 品稀 释液 1 2 0 m l 检测 溶液 A 1 1 2 0 l 检测 溶液 B 1 1 2 0 l 检测 稀释液 A ( 2 x) 1 6 m l 检测 稀释液 B ( 2 x) 1
5、 6 m l T M B 底物 1 9 m l 终止 液 1 6 m l 浓洗 涤液 ( 3 0 x) 1 2 0 m l 9 6 孔板 覆膜 4 使用 说明 书 1试剂 盒的 储存 及有 效期 试剂 盒的 储存 及有 效期 试剂 盒的 储存 及有 效期 试剂 盒的 储存 及有 效期 所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意， 收到试剂盒后请尽快将标准品、检 测溶液 A 、 检测 溶液 B 以及 9 6 孔板 保存 于 -20 。 开 封 后的 酶标 板要 密封 加干 燥剂 后保 存 于-20 ，避 免潮 湿。 有效 期 为 6 个月 。 实验 原理 实验 原理 实验 原理 实验 原理 将 I
6、 N H - b A 抗体包被 于 96 孔微孔板 中，制成固相载体， 向 微孔中依次加入标准品 和 标本 ， 其 中的 I N H - b A 与 连接 于固 相载 体上 的抗 体 结合 ， 洗 板之 后加 入 生物 素化的 I N H - b A 抗体 ，将 未结 合的 生物 素化 抗体 洗净 后， 加入 H R P 标记 的 亲和 素 ， 再次 彻底 洗涤 后加 入 底物 (T M B )显色。 T M B 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 的 黄 色 。 颜色 的深 浅和 样品 中的 I N H - b A 呈正 相关 。 用 酶 标仪在 450 n m 波长
7、下测 定吸 光 度 （ 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 标本 的采 集 标本 的采 集 标本 的采 集 标本 的采 集 与 与 与 与 保存 保存 保存 保存 1 、 血 清 ： 将 收 集 于 血 清 分 离 管 的 全 血 标 本 在 室 温 放 置 30 分 钟 或 4 过 夜 ， 然 后 1000 g 离心 20 分钟 ， 取 上 清即 可检 测， 或将 上清 置于 -20 或-80 保存 ， 但 应 避 免 反复 冻融 。 2 、 血浆： 用 E D T A 或肝素 作为 抗凝 剂采 集标 本， 并将 标本 在采 集后 的 30 分钟内 于 2 - 8 1000 g 离心 1
8、5 分钟 ， 取 上 清即 可检 测， 或 将 上清 置于 -20 或 -80 保存 ， 但 应 避免 反复 冻融 。 3 、 其它生物标本：请 1000 g 离心 20 分钟，取上清即可检测， 或将上清置于 -20 或- 80 保存 ，但 应避 免反 复冻 融。 注 注 注 注 意 意 意 意 ： ： ： ： 1、 以上 标本 均 需 密封 保存 ， 4 保存 应小于 1 周， -20 不应 超过 1 个月 ， -80 不应 超 过 2 个月 。 2、 标本 使用 前应 缓慢 均衡 至室 温， 不应 加热 使之 融解 。 3、 标本 溶血 会影 响最 后检 测结 果， 因此 溶血 标本 不宜
9、 进行 此项 检测 。 试剂 试剂 试剂 试剂 准备 准备 准备 准备 1、 使用 前将 所有 的试 剂和 标本 缓慢 均衡 至室 温 (18-25 )，试剂 不能 直接在 37 溶解 。 2、 标 准品 （ 冻 干 品 ） ： 每 瓶 标准 品用 标 准品稀释液 稀释至 1m L ，盖 好后 室温 静置 大约 10 分钟 ， 同时 反复 颠倒 /搓动 以助 溶解 ，其 浓度为 5 0 0 p g / m L 。准备 7 个稀 释标 准 品 的 EP 管， 每 个 E P 管中 加 入 500 的 标 准 品 稀 释 液 ，如 图 所 示 依次 倍比 稀 释 成 5 0 0 p g / m L
10、 ，2 5 0 p g / m L ， 1 2 5 p g / m L ，6 2 . 5 p g / m L ， 3 1 . 2 p g / m L ， 1 5 . 6 p g / m L ， 7 . 8 p g / m L ， 标准 品稀 释液 （ 0 p g / m L )直接 作为 空白 孔 。 为 保证实验结果有效性， 每次实验请使 用 新 的标准品溶液。T u b e T u b e T u b e T u b e 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3 3 4 4 4 4 5 5 5 5 6 6 6 6 7 7 7 7 8 8 8 8 p g / m L p g / m L p
11、 g / m L p g / m L 5 0 0 5 0 0 5 0 0 5 0 0 2 5 0 2 5 0 2 5 0 2 5 0 1 2 5 1 2 5 1 2 5 1 2 5 6 2 . 5 6 2 . 5 6 2 . 5 6 2 . 5 3 1 . 2 3 1 . 2 3 1 . 2 3 1 . 2 1 5 . 6 1 5 . 6 1 5 . 6 1 5 . 6 7 . 8 7 . 8 7 . 8 7 . 8 0 0 0 0 3、 检 测稀释 液 A A A A 及 检 测稀释 液 B B B B ： 用 6m L 蒸馏 水或 去离 子水 将 6 m L 浓检 测液 A 及 B 稀 释
12、至 12m L ，进行 2 倍稀 释 ，稀 释后 的工 作液 不宜 进行 冷冻 保存 。 4、 检 测溶 液 A A A A 及检 测溶 液 B B B B ： D e t e ct i o n A 及 D e t e ct i o n B 在使 用前 请手 甩几 下或 少时 离心 处理 ，以 使管 壁或 瓶盖 的液 体沉 积到 管底 。临 用前 分别 以检 测稀释 液 A A A A 或 B B B B 1:100 稀 释 （如 ： 10 检测 溶液 A / 990 检测 稀释液 A ） ， 充分 混匀 ， 稀释 前根 据 预 先计 算好 的每 次实 验所 需的 总量 配制 （ 100 /
13、孔 ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0.1-0.2 m L 。 5、 浓 洗涤液 ： 用 580 m L 蒸馏 水或 去离 子水 将 20m L 浓洗 涤液 稀释至 600 m L ， 进行 30 倍 稀释 。 6、 底 物溶液： 请用 灭菌 的移 液器 吸头 吸取 所需 体积的 T M B 至另 一干 净容 器中 使用 ，容 器中 剩余 的底 物应 予丢 弃， 不要 倒回 T M B 瓶中 。 注 注 注 注 意 意 意 意 ： 1、 标 准品 请 于临用前 15 分钟 内配 制。 该 标准品只能使用一 次 。 2、 标准 品的 稀释 不能 直接 在板 中进 行 。 3、 标 准
14、品 、 检 测溶 液 A A A A 工 作液 、 检 测溶 液 B B B B 工 作液 请使 用相 应的 稀释 液配 制， 不能 混 淆。 混匀 时要 轻轻 充分 混匀 ， 避 免 起泡 。 为 保 证实 验结 果的 准确 请使 用微 量吸 管， 并 校准 微量 加液 器 。 请 依据 所需 的量 精确 配制 ， 尽 量 不要 微量 配制 （如 吸取 检 测溶 液 A A A A 时， 一次 不要 小于 10 ） ， 以 避 免 造 成 浓 度 误 差 。 4、 请勿 重复 使用 已 经 稀释 过的 标 准品、 检 测溶 液 A A A A 工 作液 和检 测溶 液 B B B B 工 作
15、液 。 5、 浓 洗涤液 中如 有结 晶析 出， 请 先 温育 至室 温， 轻 轻 混匀 ， 至 到 结晶 完全 溶解 再进 行 配 制。 操作 步骤 操作 步骤 操作 步骤 操作 步骤 实验 前应 预测 标本 含量 ， 如 果标 本浓度 过高 ， 应 对 标 本进行 稀释 ， 使 稀 释后 的 标 本 符 合试 剂盒 的检 测范 围， 计算 时再 乘以 相应 的稀 释倍 数。 1、 加样 ：分 别设 标准 孔、 待测 样品 孔、 空白 孔。 设标 准孔 7 孔， 依次 加入 100 不同 浓度 的标 准品 （ 见 试剂 准备 2） 。 空 白 孔加 100 （见 试剂 准备 第二 步最 后一
16、 管） ， 余 孔 加待测 样品 100 ，酶 标板 加上 覆膜 ， 37 温育 2 小时 。 2、 弃去 液体 ，甩 干， 不用 洗涤 。 3、 每孔 加 检 测溶 液 A A A A 工 作液 100 （ 临用 前 配 制 ） ， 酶 标 板 加 上 覆 膜 ， 37 温育 1 小时 。 4、 弃去 孔内 液体 ， 每孔用 400 的洗 涤液 洗涤 ， 浸泡 1-2 分钟 ， 甩 干 （ 也可 轻拍 将孔 内 液 体 拍 干 ） ， 重复 洗板 3 次。 最后 一次 洗涤 后， 要把 孔内 的洗 涤液 完全 甩干 。 5、 每孔 加 检 测溶 液 B B B B 工 作液 （ 临用 前 配制 ） 100 ，加 上覆 膜 ， 37 温育 30 分钟 。 6、 弃去 孔内 液体 ，甩 干， 洗板 5 次， 方法 同步骤 4。 7、 每孔 加 底 物溶 液 90 ， 酶 标 板加 上覆 膜 ， 37 避 光显色 （ 反应 时间 控制在 15- 25 分钟 ，不要 超过 30 分钟 。 当标准 孔
