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1、侵袭性真菌感染的实验室检查重要医学酵母菌分类医学重要的丝状真菌分类白色念珠菌 （Candida albicans) 光滑念珠菌 (C. glabrata) 热带念珠菌 (C. Tropicalis) 近平滑念珠菌 (C. Parapsilisis) 克柔念珠菌 (C. Krusei) 烟曲霉 (A. fumigatus) 黄曲霉 (A. flavus) 临床常见病原真菌真菌菌落形态真菌菌落形态真菌菌落形态区分念珠菌和丝状真菌假菌丝和真菌丝的区别曲霉菌菌丝 分隔假菌丝血涂片革兰染色马内菲青霉菌的菌丝脓标本直接涂片革兰染色接合菌菌丝表现 念珠菌 丝 状真菌 发热 + + 多发 性关节 炎 + -
2、血 + - 皮肤损 害 + - 肝损 害 + 罕见 窦 道 - + 呼吸系统 + + 中枢系统 稀少 + 真菌感染的临床表现形态学检查 l显微镜检查（革兰染色、KOH压片，乳酸棉芬兰染色） l培养检查-培养时间5-7天 l组织病理学 特殊检查 l血清学试验（G实验，GM实验） l分子生物学 真菌感染的实验室诊断方法念珠菌直接涂片结果解读 可见真菌孢子及假丝（念珠菌） 可见真菌孢子未见假丝（念珠菌） 找到真菌菌丝（丝状真菌，如曲霉，毛霉） 是最简单也是最实用的检查方法 阳性结果可以确定真菌感染，阴性结果亦不能排除 诊断 如果在无菌体液的直接镜检中发现有真菌成分常可 确立深部真菌病的诊断；但一般在
3、有菌部位则只有 发现大量真菌菌丝方可作出诊断 快速，常在1-2小时出结果 经常是唯一的诊断依据 真菌标本的直接镜鉴曲霉菌形态学鉴定烟曲霉菌落棉兰染色烟曲霉镜下图棉兰染色黄曲霉棉兰染色黑曲霉棉兰染色构巢曲霉棉兰染色小孢根霉棉兰染色稻根霉棉兰染色制片 （1，3）-D葡聚糖（简称G实验）：可特异性 激活鲎变形细胞溶解产物中的G因子，引起裂解物 的凝固，故称G试验。 可检测多种致病真菌感染：念珠菌，曲霉菌，肺 孢子菌，镰刀菌，地霉，组织胞浆菌，毛孢子菌 等。 不能用于检测隐球菌和接合菌的感染 早期诊断：可先于临床诊断4天 临床常见的真菌血清学诊断方法 假阳性 血液透析、腹膜透析（应用纤维素膜） 某些抗
4、肿瘤药物的应用如香菇多糖和磺胺类药物 病人输入白蛋白、球蛋白、脂肪乳、凝血因子 某些细菌败血症 （尤其是链球菌败血症） 手术中使用棉纱，棉拭子 对策：动态监测葡聚糖的变化 假阴性:隐球菌具有厚壁胞膜，在免疫缺陷患者体内 生长缓慢，导致试验呈假阴性。 假阳性 假阴性 诊断：侵袭性曲霉菌感染（IPA），对侵袭性曲霉 病的诊断具有较高的灵敏度和特异度，尤其在骨髓 移植和血液病等免疫抑制的患者中。 检测范围：曲霉菌、青霉菌，拟青霉。链格孢。 GM试验 应用哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸。 谷类食物和脂质甜点中的GM抗原。 肠道中定值的曲霉释放GM进入血液循环。 假阳性侵袭性念珠菌病是导致危重病
5、患者死亡的 主要疾病之一，在美国及许多发达国家位居医 院血源性感染的第四位，许多权威人士估计由 其导致的成人死亡率为15%-25%,新生儿和儿 童死亡率为10%-15%。侵袭性曲霉病病死率达 50%。 抗真菌药作用于真菌细胞的同时也容易对 人体细胞产生毒性作用。临床治疗真菌感染的 药物有限、用药剂量较大、疗程长、因此不良 反应较多、毒性较大，成为临床应用抗真菌药 物的主要瓶颈。 侵袭性真菌感染的流行病学侵袭性念珠菌病的定义 患者简介：女性，37岁，农民，因“咳嗽，咳痰4 天，加重伴喘憋1天，意识不清2小时”于2014年 5月7日入院。 当日下午即行支气管镜检查，示气管粘膜充血，水 肿，糜烂，大
6、量黄粘痰，留标本送检。 入院诊断考虑“重症支气管哮喘”，予甲基强的松 龙80mg,氨茶碱0.25，硫酸镁2.5分次点滴，症状 不见好转。结合支气管镜所见，丝状真菌感染不能 除外。 病例分析 病原学诊断：5月7日痰涂片可见真菌菌丝，菌丝呈 45度折角，似曲霉菌丝。痰培养及BALF培养为烟 曲霉菌。5月9日BALF培养为烟曲霉菌；5月11， 12，13，16日气道分泌物培养为烟曲霉菌。 根据流行病学资料，微生物学证据，影像学检查诊 断为侵袭性肺曲霉菌感染（IPA）。 治疗：5月8日在莫西沙星的基础上，加用两性霉素 B脂质体制剂，5月9日，12日，13日气道滴入两性 霉素B脂质体，20日加用伏立康唑。 病例分析 5月21日，22日痰培养为铜绿假单胞菌，用派拉西 林/他唑巴坦治疗，继续应用伏立康唑（口服， 400mg/d)及两性霉素B脂质体（150mg/d)治 疗。患者出院后院外服用伏立康唑1个月，停用后 改为伊曲康唑口服液1个月，复查CT基本吸收后停 用。 病例分析
