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1、生物 系 生化技术 课程考试题(B 卷 )（2006 年 7 月 日）题号 一 二 三 四 五 六 七 总分 评卷人一 填空题（20 分）1 蛋白质含量测定最经典的方法是 。2 两种 RNA 沉降系数分别为 35S 和 70S，则相对分子量较大的是 。3 细胞破碎的目的是 。4 蛋白质分离纯化中技术中与蛋白质分子量有关的有 、 、等方法。5 生化研究中放射性同位素的掺入方法有 、 、 等。6 华勃氏微量检压法检测物质含量时，如果同时有 O2 吸收和 CO2 放出，可在反应瓶中加入 消除 CO2 的影响，测得实际耗 O2 量。测定酵母呼吸强度实验中，每隔一定时间测定体系压力变化时，都必须调到相同
2、的参比点再读数，其原因是 。7 测定氨基酸常用的荧光试剂是 。8 聚丙烯酰胺凝胶制备用的单体是 ，交联剂为 ，催化剂是 。9 HPLC 是指 。 10 斐林试剂快速法测定还原糖时，为了使终点更为明显，加入 （试剂名） ，此时终点颜色变化为 。滴定过程不能摇动锥形瓶的原因是 。11 生物物质超临界萃取常用的超临界流体是 。二 单项选择题（15 分）1、生物法测定抗生素效价时最广泛应用的方法是（ ） 。A 稀释法 B 管碟法 C 滴定法 D 生长图谱法 2、商品 sephadex 使用前要先（ ） A 再生 B 转型 C 溶涨 C 活化3、只能测定醛糖的方法是（ ） A 兰爱农法 B 次碘酸钠法
3、C 铜试剂法 D 蒽酮试剂法。4 层析洗脱峰越窄，峰的斜率越大，分辨率（ ） A 越大 B 越小 C 不变 D 无法确定5、下列不属于还原糖的是（ ） A 葡萄糖 B 麦芽糖 C 蔗糖 D 果糖 6、目前纯生啤酒生产中采用的是（ ）技术。A 超滤 B 微滤 C 透析 D 反渗透。7、蛋白质的含氮量约为（ ）:A.16% B.6.25% C.18% D.20% E.30%8、离子交换层析装柱时，树脂在柱内有明显的分界线这是因为（ ）原因造成的。 A 气泡上浮 B 树脂颗粒不均匀 C 干法装柱 D 装柱不均匀，树脂在柱内排列松紧不一9 蛋白质分离纯化的基本方法不包括： A蒸馏 B盐析 C离子交换层
4、析 D凝胶过滤 10 等密度梯度离心的梯度介质为（ ）A蔗糖 B甘油 C氯化铯 D多乙烯多胺和丙烯酸加成制备三 名词解释（15 分）1 盐析和盐溶（3 分）2 LD503 双水相萃取4 亲和层析5 膜分离技术 6 电渗7 电泳分离技术四 判断题（10 分）1 大蒜细胞提取分离 SOD 实验中，最终分离得到的沉淀物越多说明实验越成功。 （ ）2 测定生长促进剂效价时应采用全合成培养基 （ ） 3 苯酚水溶液提取核酸可以使 DNA 和 RNA 分布在不同层中而分离。 （ ）4 层析技术可以对物质分离纯化，也可以对物质进行定性定量分析。 （ ）5 分光光度法必须通过显色试剂与待测物反应后才能对物质进
5、行测定。 （ ）6 在一定条件下，可用加热、改变 pH 等使杂蛋白变性沉淀而除去。 （ ）7 蛋白质电泳分离后可用考马斯亮蓝或氨基黑 10B 等进行染色。 （ ）8 氨基酸可以由酶催化脱羧放出 CO2，因此可用气体检测法测定氨基酸的量。 （ ）9 离子交换层析法提取谷氨酸只能用阳离子交换树脂。 （ ）10 氨基酸可以直接用标准氢氧化钠溶液滴定来测定含量。 （ ）五 分析解答题（40 分）1 试述不连续凝胶电泳样品压缩成层原理。 （5 分）2 下图是垂直板式 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱，区带 1 是低分子量标准蛋白，其中含有分子量分别为 97.4 KD、66.2 KD、43.0 KD、31.
6、0 KD、20.1 KD、14.4 KD 六种蛋白，区带2 为经过分离纯化的人参多肽，3 为牛胰岛素链(3.5KD)，根据电泳图谱可得出何种结论？（4 分）3 说明纸层析和离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质? 列出纸层析和柱层析的一般操作步骤。 （7 分）4 试述凝胶层析原理，说明凝胶层析的应用并列出常用凝胶名称（6 分）。影响物质提取的主要因素有哪些？5 木薯淀粉样品 1.000 克，用 淀粉酶和糖化酶法完全水解后，定容至 1000mL，用斐林试剂法测定还原糖含量。实验中，取斐林试剂甲乙液各 5.00 mL，空白试验耗 0.1%（w/v）标准葡萄糖 21.00mL ；取斐林试剂甲乙液各 5.00 mL，加入上述水解液 10.00mL，定糖试验耗 0.1%（w/v）标准葡萄糖 11.10 mL。试计算样品中淀粉含量。 （6 分）6 三瓶未知液分别为蛋白质、糖和 RNA，如何鉴别它们？（4 分）7 影响物质提取的主要因素有哪些？蛋白质和酶主要有哪些提取方法？提取中应注意哪些问题？（8 分）
