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1、猪免疫球蛋白 A(IgA)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒试剂盒名称】猪免疫球蛋白 A(IgA)定量检测试剂盒(ELISA)【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒试剂盒用途】定量检测猪血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白 A(IgA)的含量。【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被猪免疫球蛋白 A(IgA)单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物
2、 A、B，底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中猪免疫球蛋白 A(IgA)浓度呈正相关，450nm 波长下测定 OD值，根据标准品和样品的 OD值，计算样本中猪免疫球蛋白 A(IgA)含量。【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒试剂盒组成】1 酶标包被板 12孔4 条 7 显色剂 A液 3mL2 标准品 0.3mL6管 8 显色剂 B液 3mL3 20倍浓缩洗涤液 15mL 9 终止液 3mL4 样本稀释液 3mL 10 说明书 1份5 特殊稀释液 3mL 11 封板膜 2张6 酶标试剂 3mL 12 密封袋 1个备注：标准
3、品(1 号6 号)浓度依次为：80、40、20、10、5、2.5 g/mL.【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡 30分钟。2、配液：用蒸馏水将 20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品 50L；待测样本孔中先加入待测样本 10L，再加样本稀释
4、液 40L(即样本稀释 5倍)；空白对照孔不加。4、温育：37水浴锅或恒温箱温育 30min。5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液 50L，空白对照孔不加。7、温育：37水浴锅或恒温箱温育 30min。8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。9、显色：每孔先加入显色剂 A 液 50L，再加入显色剂 B液 50L，平板混匀器混匀 30s(或用手轻轻震荡
5、混匀 30s)，37避光显色 15min。10、终止：取出酶标板，每孔加终止液 50L，终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定：以空白孔调零，在终止后 15分钟内，用 450nm波长测量各孔的吸光值(OD 值)。12、计算：根据标准品的浓度及对应的 OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的 OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN 3)，因为叠氮钠(NaN 3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。2、标本采集后尽早进行提取，提取按相
6、关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20保存，但应避免反复冻融。3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释 5倍，计算结果乘以 5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为 2.5-80g/mL，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(2.5-80
7、g/mL 范围内)，乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。9、底物 B对光敏感，避免长时间暴露于光下。【猪免疫球蛋白 A(IgA)Elisa试剂盒操作程序总结】1、 准备试剂，样品和标准品 2、加入准备好的样品和标准品，37反应 30分钟3、洗板 4次，加入酶标试剂，37反应 30分钟4、洗板 4次，加入显色液 A、B，37显色 15分钟 5、加入终止液6、15
8、 分钟之内读 OD值 7、计算 猪免疫球蛋白 G（IgG）定量检测试剂盒（ELISA） 使用说明书 【试剂盒名称】 猪免疫球蛋白 G（IgG）定量检测试剂盒（ELISA） 【试剂盒用途】 定量检测猪血清、血浆及相关液体样本中猪免疫球蛋白 G（IgG ）的含量。本公司专业供应 Elisa 试剂盒，品质保证，价格优惠，可免费提供代测服务，欢迎来电咨询：， QQ:112549202 【检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA） 。将标准品、待测样本加入到预先包被猪免疫球蛋白 G（IgG）抗体的透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时
9、间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物 A、B，底物（ TMB）在辣根过氧化物酶（HRP ）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中猪免疫球蛋白 G（IgG）浓度呈正相关，450nm 波长下测定 OD 值，根据标准品和样品的 OD 值，计算样本中猪免疫球蛋白 G（IgG ）含量。 【试剂盒组成】1 酶标包被板 12 孔8 条 7 显色剂 A 液 6mL2 标准品：480g/mL 0.6mL 8 显色剂 B 液 6mL3 20 倍浓缩洗涤液 25mL 9 终止液 6mL4 标准品稀释液 6mL 10 说明书 1 份5 样本稀释液 6mL 11 封板膜 2 张6 酶标试剂
10、6mL 12 密封袋 1 个 备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：480、240、120、60、30、15g/mL 【需要而未提供的试剂和器材】 1、37恒温箱 标准规格酶标仪 精密移液器及一次性吸头 蒸馏水 一次性试管 吸水纸 【操作步骤】 1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡 30 分钟。 2、配液：用蒸馏水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品 50L；待测样本孔中先加入待测样本 10L，再加样本稀释液40L（即样本稀释 5 倍） ；空白
11、对照孔不加。 4、温育：37水浴锅或恒温箱温育 30min。 5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 4 次（也可用洗板机按说明书操作洗板） 。 6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液 50L，空白对照孔不加。 7、温育：重复 4 的操作。 8、洗板：重复 5 的操作。 9、显色：每孔先加入显色剂 A 液 50L，再加入显色剂 B 液 50L，37避光显色 15min。 10、终止：取出酶标板，每孔加终止液 50L，终止反应（颜色由蓝色立转黄色） 。 11、测定：以空白孔调零，在终止后 15 分钟内，用 450nm 波长测量各孔的
12、吸光值（OD 值） 。 12、计算：根据标准品的浓度及对应的 OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的 OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。 【样本要求】 1、样本不能含叠氮钠（NaN 3） ，因为叠氮钠（NaN 3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。 2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20保存，但应避免反复冻融。 3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。 【注意事项】 1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。 2、酶标
13、包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。 3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。 4、牢记样本已经稀释 5 倍，计算结果乘以 5 才是样本实际浓度。 5、本试剂盒定量范围为 15-480g/mL，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用标准品稀释液稀释后测定准确结果（15-480g/mL 范围内） ，乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。 6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。 7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。 8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。 9、底物 B 对光敏感，避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】 准备试剂，样品和标准品 加入准备好的样品和标准品，37反应 30分钟 洗板 4次，加入酶标试剂，37反应 30分钟 洗板 4次，加入显色液 A、B，37显色 15分钟加入终止液 15分钟之内读 OD值 计算 【检测范围】 15-480g/mL 【规格】 96人份/盒 【贮藏】 2-8，避光防潮保存。 【有效期】 6个月
