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1、常用培养基的配制(一)营养琼脂培养基【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基基础之用。【成分】牛肉膏 3g NaCl 5g蛋白胨 10g琼 脂 20g【pH 值】7.20.2【制法】上述成分称取 38g 加蒸馏水 1000ml,经 121.3 30min 高压灭菌备用。(二)蛋白胨水培养基【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g【pH 值】7.6【制法】将上述成分溶于 1000ml 蒸馏水中,过滤,分装于试管,每管 23ml,经121.3 20min 高压灭菌备用。(三)半固体培养基【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H 抗原位相变异试验
2、等。【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g琼脂 2.53g【pH 值】7.6【制法】上述成分加入 1000ml 蒸馏水中,加热溶解,分装于试管,每管 34ml,经121.3 20min 高压灭菌备用。(四)营养肉汤培养基【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等,也可用于消毒效果的测定。【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g牛肉粉(牛肉浸汁) 3g 【pH 值】7.20.2【制法】将上述成分溶于 1000ml 蒸馏水中,分装小试管,每管 23ml,经 121.3 20min高压灭菌备用。(五)葡萄糖蛋白胨水培养基【用途】供甲基红试验及 V-P 试验之用。【成分】蛋白胨 5g葡萄糖 5gK2HPO4 (
3、K2HPO43H2O) 5g (0.65g)【pH 值】7.07.2【制法】将上述成分溶于 1000ml 蒸馏水中,过滤,分装试管,每管 23ml,经 112.6 20min 高压灭菌备用。 (六)伊红美蓝培养基(EMB 培养基)【用途】弱选择性培养基,用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌 。【成分】蛋白胨 10g乳糖 10g伊红 0.4g美兰 0.065g琼脂 14gK2HPO4 2g【pH 值】7.20.4【制法】上述成分称取 36g 加蒸馏水 1000ml 摇匀,经 121.3 15min 高压灭菌,待冷却至 60左右倾注灭菌平皿备用。(七)S-S 琼脂培养基【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的
4、选择性分离培养之用。【成分】蛋白胨 5g乳糖 10g牛肉粉 5g三号胆盐 3.5g琼脂 17g柠檬酸钠 8.5g柠檬酸铁 1g硫代硫酸钠 8.5g中性红 0.025g煌绿 0.00033g【pH 值】7.00.1【制法】上述成分称取 60g 加蒸馏水 1000ml,加热煮沸至完全溶解,待冷却至 60左右倾注灭菌平皿备用。(八)中国蓝蔷薇酸琼脂培养基【用途】供肠道致病菌的分离鉴别之用。【成分】蛋白胨 10g乳糖 10g牛肉粉 3g琼脂 13g氯化钠 5g中国蓝 0.05g玫红酸 0.1g【pH 值】7.00.2【制法】称取本品 40g 加蒸馏水 1000ml,煮沸溶解后,112.6 30min
5、高压灭菌,待冷却至 60左右时倾注灭菌平皿备用。(九)沙保弱氏琼脂培养基【用途】供真菌的分离培养,菌种保存之用。【成分】蛋白胨 10g麦芽糖(葡萄糖) 40g琼脂 20g【pH 值】5.56.0(一般不调节) 【制法】上述成分加蒸馏水 1000ml,煮沸溶解后,112.6 15min 灭菌,待冷至 60左右时倾注灭菌平皿备用。(十)血琼脂培养基 【用途】供观察某些细菌的溶血作用,分离培养营养要求较高的细菌之用。【成分】普通营养琼脂培养基 100 ml脱纤维羊血(或兔血) 510ml【pH 值】7.6【制法】将普通营养琼脂培养基 121.3 20min 高压灭菌,待冷却至 50左右时,加入无菌脱
6、纤维羊血(或兔血)轻轻摇匀,不要发生气泡,倾注灭菌平皿或制成斜面备用。(十一)0.1%石炭酸琼脂平板培养基 【用途】供分离变形杆菌和被变形杆菌污染的其他细菌之用。【成分】普通营养琼脂培养基 100ml石炭酸 1g【pH 值】7.6【制法】上述成分 121.3 15min 高压灭菌,倾注灭菌平皿备用。(十二)液体硫乙酸盐培养基(FT) (需氧菌、厌氧菌培养基) 【用途】用于药品和生物制品的无菌检验,检测好氧菌、厌氧菌。【成分】胰酪胨 15gL胱氨酸 0.5g葡萄糖 5g酵母膏粉 5g氯化钠 2.5g硫乙醇酸钠 0.5g刃天青 0.001g琼脂 0.75g【pH 值】7.10.2【制法】称取本品 29.3g 加入 1000ml 蒸馏水中,搅拌加热至完全溶解,分装于试管,121.3 15min 高压灭菌备用。(十三)庖肉培养基 【用途】用于一般厌氧培养,肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB 标准)。【成分】牛肉渣、牛肉浸液。【pH 值】7.47.6【制法】肉浸汤剩余的肉渣装入中试管内,约 11.5cm 高。加入肉汤培养基 5ml,再加入 1:3 液体石蜡(或凡士林) ,高 0.20.3cm。经 112.6 15min 高压灭菌,保存于4冰箱备用。