水果及蔬菜组织和自由基中 1-甲基环丙烯的吸收作用: 1-甲基环丙烯酶促反应的症状 1-甲基环丙烯的详尽吸收都是为了许多水果和蔬菜组织聚集,在实验测试中比较 1-MCP 空气的吸附作用(765umol m3,18.2ul/L -1)和在全部苹果类水果的进程,吸收数据从完整的水果中的 30+0.2ngkg 增加到个别刚切成两半的楔形水果中的 13.8+2.4 和 28.2+1.5ngkg巨大提高的吸收作用也在所有水果削下的皮当中被观测到,表明吸收作用在表皮组织中受限制或者在伤口处组织中提高,鲜切苹果在组织加热后吸收作用降低了接近 90%,1-MCP 吸收作用的高温失活不是一连串小单元被破环所致,由于冷冻溶解的组织保留了大约 76%的最初吸收数据,95%的吸收量超过了 6h强大的 1-MCP 吸收作用在芦笋茎尖中也被证实芦笋茎尖的吸收数据和吸收量不被伤口组织影响但极个别的在冷冻溶解循环下会被抑制 50%到 54%就苹果的组织而言,芦笋茎尖对 1-MCP 的吸收作用在组织加热情况下是不活跃的(>90%) 加热有很强的抑制想象表明组织消耗的 1-MCP 参与了新陈代谢,随后分析表明来自苹果组织的同类自由单元代谢 1-MCP 数据接近 80ng kg-1s-1,在缓冲可溶物中的余渣的活力是可忽略的。
1-MCP的代谢标准化验是从 5.0g 组织中提取的 10ml 同类自由基和 10ml 125mol’ m-3 PH=5 的 Na-MES 混合,这种解决办法是在密闭在 244ml 的广口瓶中装入420.5u.mol m-3 气态 1-MCP苹果中同类自由基的 1-MCP 代谢展示了饱和的动力,即 160mmolm-3 最大 aKm 和 4.12u mol kg-1 s-1 的最大体积,最佳的发生时间是 PH=5 时,在加热后被抑制>90%,在 4mol m-3 抗坏血酸盐中含 83%,缺氧情况下.(0.25kpa 氧气中有 45%),以及硫化钠(SDS,63% 在 34mol m-3).1-MCP 的代谢也在果皮而非果肉的 CFH 中被发现,无论各个组织的容量是大是小,芦笋茎尖中的大量组织含有物没有在 CFH 中被显现,这就说明没有 1-MCP 代谢.芦笋中的 CFH肥肉 1-MCP 代谢比苹果类水果减少了 75%,明显说明芦笋中的化合物抑制了 1-MCP 的代谢.这一数据提出相关的薄膜 ,氧化酶对于蔬菜和水果组织的构成比物理组织构成 1-mcp 主要框架更实用.1. 简介通过研究 1-MCP,发现了一个潜在抑制剂——乙烯的活动,继续把主要精力放在跃变型水果上,发现它完美的适用于这项技术的商业要求。
然而, 跃变型水果中 1-MCP 是十分多种多样的对许多跃变型水果来说,较早的 1-MCP出现在成熟初期会引起不完全成熟或者不同于适当的成熟期的现象苹果表现的可能是较早成熟中优先处理的个别例外是有益于收割期后的坚实保持能力,这是消费者对苹果的参数参考的一个基本因素对于另外的跃变型水果来说,当 1-MCP 在最初成熟是实用的时候,正常的成熟是最好的目标不仅如此,一些水果包括香蕉和鳄梨在成熟期被提前时变得对 1-MCP 的需求急剧迟钝对于导致这种跃变型水果的变化的因素,回应是 1-MCP 有未知的残余最近的报告表明成熟西红柿对 1-MCP 的敏感度是短暂的失效或者提高,这就对其个别个体体内乙烯水平短期的增长或者减少做出了回应,另外的进程将会影响包括 1-MCP 组织靶子甚至乙烯受体在内的反应根据已经在鳄梨、油以及一系列不同的水果和蔬菜中表现出来的乙烯受体的预测水平, 可知道 1-MCP 的吸收作用在数量上超出了预期 Choi 和 Huber 宣称一些水果和蔬菜的特殊组织的吸收作用特性和包括木质素、高效甲基果胶酶,和油质在内的疏水受体的数量多少有联系,所有这些在试管内都呈现出高的吸收作用虽然没有直接的现象,然而,这些聚合物直接说明了水果以及其他园艺产品对 1-MCP 的反应。
在苹果对 1-MCP 的吸收试验测试中,组织被切开后吸收显著提高但是,组织加热后吸收就被消除了,这就提高了全部组织的吸收是导致 1-MCP 代谢的原因的可能性目前这个研究的目的是决定水果和蔬菜组织中 1-MCP 的代谢是否是由 1-MCP 的吸收引起的2 原料和方法2.1. 植物原料从当地零售店里就能获得的苹果、车前草和芦笋茎尖2.2 未处理过及加工过的苹果和芦笋茎尖对 1-MCP 的吸收2.2.1 苹果:苹果有处理过的和未处理的,处理的有对半切和鲜切楔形块,把水果半切、切成 16 小块分别放在 1.76L 的玻璃广口瓶中,并用盖子隔绝外界注入浓度为 765umol m-3 的气态 1-MCP在每个试验中,上部气层应优先充满充足的 1-MCP上层 1-MCP 的含量水平在 23℃下用气体层析法监测 6h广口瓶中充满不受组织控制的 1-MCP在另外的试验中,未处理过的水果或者用蔬菜削皮刀削下 3mm 厚的水果表皮的组织分别放到 1.76L 的玻璃广口瓶中,将其密封并供给 765umol m-3 的 1-MCP用在-30℃冷冻溶解的苹果测试断裂组织的 1-MCP 吸收作用,以及把小块在 94℃的微波炉中加热,苹果内部温度用配有直径为 5mm 传感器的数字温度计测量。
在加热的每段时间,传感器要插入组织小块的吸收部位在冷冻溶解或者加热的组织恢复到室温时,16小块状的要分开控制,同时加热过的组织要放入 1.76L 的广口瓶中并注入765umol m-3 的 1-MCP所有对于苹果和组织的每个处理都是利用三个重复,取最接近的两个结果2.2.2 芦笋茎尖新鲜的芦笋茎尖用小刀切成长度为 6-7cm 的小段,把最底端部分丢掉每 35g 放在一个 244ml 瓦罐中,这就用苹果为试验提供了相同容积或比重的材料,而对于苹果组织无论是在冷冻溶解循环下或者大约 94℃加热下的都是相同的用锋利的刀片把芦笋茎尖切成 1cm 厚的切片来表征切面上 1-MCP 的吸收面积的影响把芦笋的茎尖部分密封到 244ml 的广口瓶中并注入 765umol m-3 的 1-MCP, 顶部 1-MCP 的含量在 23℃温度下用空气检测仪监测 6h 以上把 35g 芦笋茎尖密封在 244ml 的广口瓶中,用盖子分生两个隔离区,用100%的氮气或空气净化出口和入口 30 分钟,这样就可以测试出缺氧对芦笋吸收 1-MCP 的影响以后,瓶子里在缺氧的环境下注入 765umol m-3 的 1-MCP 用 checkmate Head Space9900 测量氮气净化后的含氧量,6h 内从大约0.06Kpa 下降到几乎为零。
芦笋的试验每个处理利用了三个重复,取两个相似值中较小的一个作为最终结果2.3 自由细胞匀浆的准备新鲜苹果、削下的果皮和果肉,以及芦笋茎尖和同等体积的 Na-MES 混合,PH 调到 5,再用搅拌机以最大速度搅拌 45 秒钟把混合物放在冰块里直到渗透出交替的两层,在 4℃下以 15000 转每秒的速度离心 10 分钟,CFH 通过过滤或者 15000 转每秒下离心来展示和 1-MCP 吸收相同的特征因此,样本用过滤器快速过滤,设置大量样本和重复不能溶解的残渣在从苹果组织中收集 CFH 时被排除,研究 1-MCP 代谢有如下描述2.4 1-MCP 代谢的研究10ml 的 CFH 加入 10ml 125mol m-3的 Na-MES,在 244ml 的瓦罐中把 PH 调到 5在沸水中加热 CFH10 分钟,样品中包含有 20ml 125mol m-3的 Na-MES,每个实验都要把 PH 控制在 5.广口瓶要密封并注入浓度大约为420.5umol m-3的气态 1-MCP上部 1-MCP 的含量在 23℃下用空气检测仪监测 6h 以上1-MCP 代谢总是在混合物过滤后剩下的残渣中被检测到,而从5g 苹果混合物组织中收集的不溶解残渣可用 200ml 125mol m-3 PH=5 的 Na-MES 冲洗掉,不溶解的残渣被转移到 244ml 装的广口瓶中并供给 420.5umol m-3的 1-MCP。
1-MCP 代谢中 PH 决定于 CFH 用 250mol m-3 Na-MES 的准备或者 250mol m-3的 Na-MOPS,10mlCFH 的每一 PH 下加入 10ml 缓冲液并密封在广口瓶中,注入 420.5umol m-3 的 1-MCP在控制范围内每一 ph 值下 CFH 在沸水里加热,得到的 PH 值和最初的值的偏差不到 0.15 个单位另外的研究是利用从苹果中提取的 10mlCFH 和 10ml PH=5 125mol m-3 浓度的 Na-MES 混合,另外补充维生素 C 盐,1%硫化钠,牛肝脏消化酶,或者马肝脏消化酶用 4L 125mol m-3的 Na-MES 层析 10ml 从苹果或者芦笋中得到的 CFH 12 小时,PH为 5,在 4℃时优先增加 10ml PH 为 5 浓度为 125mol m-3的 Na-MES,用以分析 1-MCP 的代谢用 10ml 苹果 CFH 和 10ml ph 为 5, 125molm -3 Na-MES 的混合物或者 10ml 苹果 CFH、3ml 芦笋 CFH 和 7ml ph 为 5, 125molm -3的 Na-MES 的混合物的反应来测试芦笋 CFH 中抑制剂的存在。
把 10ml 苹果 CFH 和 10ml ph 为 5, 125molm -3的 Na-MES 放入 244ml 广口瓶中用磁性棒搅拌并用盖子密封,这样一个设计用以研究低氧对 1-MCP代谢的影响这一样本用 100%氮气或空气净化出口和入口指针(21 计量器,长 152.4mm) 把入口指针轻轻的放在溶液表面,而流动的空气能使样本上避免出现泡沫当溶液轻微的搅拌后,维持流动 30 分钟然后,指针就会移动,在低氧的环境下提供此样本 420.5umol m-3 的 1-MCP,如下文所描述,这就是 100%的氮气对压强为 0.25Kpa 的氧气上层处理的结果1-MCP 代谢也是取决于芦笋 CFH 以 11000 转速下高速离心 30 分钟后得到的上清液,所有对于描述苹果的试验,车前草和芦笋 CFH 的每个处理都是利用三个重复,然后重复做最接近的两次Kinetic 分析 1-MCP 代谢之所以像上述文章中那样例外的发生,是因为这个反应在 130ml 的广口瓶中发生,其内有相当于 0.5g 苹果组织的缓冲物在上部空间注入 1-MCP 气体,浓度集中在 4.0,39.0,104.0,192.0 和285.0mmol m-3 四个浓度,一定数量的 1-MCP 消耗 30 分钟以上得到速率数据,单位为 nmol kg-1 s-1. Kinetic 的试验的每一个 1-MCP 浓度点设置四个重复,相似的结果执行三次。
2.5.1-甲基环丙烯的制备Choi 和 Huber 详细描述了组织和 CFH 吸收作用利用气态 1-MCP 的研究的形成,暂时地,增施 1.5g1-MCP 粉末到装有 20ml 蒸馏水的 500ml 派热科斯玻璃制的厄伦美厄细净瓶中形成浓度为 67.3mmol m-3 的气态 1-MCP,此时立刻用橡皮塞密封并配备一个橡胶隔板在 23℃条件下放置 4 小时产生的 1-MCP 气体最少时分别加入 1.76L 或 244ml 罐装的浓度为 765umol m-3 的组织或者420.5umol m-3 的 CFH所有的试验研究都控制瓶子里包含 1-MCP,但没有组织或者 CFH准备实验中用层离法分析了 1-MCP 确定了组织或者 CFH 并没有产生挥发物如上所述,1-MCP 被用于低氧实验是把 1-MCP 放在密封的长颈瓶中,用 100%氮气净化出口和入口指针(21 计量器,长 152.4mm)30 分钟,最初的实验证明了用氮气净化环糊精-。