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1、新疆阿魏的抗炎镇痛作用研究1新疆阿魏的抗炎镇痛作用研究卞阳雨 石河子大学药学院 中药学 2007154289指导老师 谭勇 石河子大学药学院中药系摘要 目的：研究新疆阿魏的抗炎、镇痛作用。方法：以西 药阿司匹林、中药复方丹参片为阳性对照，采用二甲苯致小鼠耳壳肿胀和毛细血管通透性模型观察新疆阿魏的抗炎作用，采用小鼠 热 板法和电子压痛仪法观察新疆阿魏的镇痛作用。结果：新疆阿魏根水提物中 剂量 2.5gkg-1 能显著延长热刺激小鼠的痛 阈值，对二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀和伊文思蓝致毛细血管通透性实验都有抑制作用。结论：新疆阿魏根水提物有明 显的抗炎镇痛作用。关键词：新疆阿魏；抗炎作用；镇痛作用 A
2、nti-inflammatory and Analgesic Effects of Ferula sinkiangensis K. M. ShenBianyangyu College of Pharmacy, Shihezi University Sciences of Chinese pharmacology 2007154289Tan Yong instructor Shihezi University College of Pharmacy, Department of Chinese medicineAbstract: Objective To study the anti-infla
3、mmatory and analgesic effects of Ferula sinkiangensis K. M. Shen. Methods: With western medicine aspirin, TCM compound for DanCanPian positive control, with the mouse xylene-induced auricular swelling and shell capillary permeability model observation anti-inflammatory effects of Ferula sinkiangensi
4、s K. M. Shen,Using mice hot plate method and electronic tenderness apparatus used to observe the analgesic effects of Ferula sinkiangensis K. M. Shen.Results: The root of water extractings from Ferula sinkiangensis K. M. in doses 2.5gkg-1 can significantly extend hot stimulus mice pain threshold, On
5、 the auricle tumefaction mice induced by xylene and blue Evans capillary permeability experiment to have the inhibition.Conclusion: The root of water extractings from Ferula sinkiangensis K. M. Shen have Anti-inflammatory and Analgesic Effects.Key words: Ferula sinkiangensis K. M. Shen; Anti-inflamm
6、atory Effects ; Analgesic Effects药用阿魏是从阿魏属 Ferulu L.植物的根或茎中得到的一种树脂。 中国药典 1收载品种为新疆阿魏 Ferula sinkiangensis K. N. shen 和阜康阿魏 herula fukanensis K. N. shen，仅产于新疆 2。新疆阿魏(Ferula sinkiangensis K. M. Shen) 为伞形科（Umbelliferae）阿魏属的一种多年生草本植物，全株具有特殊的葱蒜样臭味 3 。研究表明倍半萜香豆素是阿魏属植物的特征化学成分 4 。我国药典从 1977 年版开始收录，其树脂入药,具有杀虫
7、,消积,散痞的功效 5，用于肉食积滞，瘀血癥瘕，腹中痞块，虫积腹痛 1，是一类具有重要药用价值的植物资源 。1994 年，valencia 等人对一个双环倍半萜化合物 lapidin 做了深入的药理研究，证实了其具有解热、镇痛、抗炎等活性 6。因此，本实验采用二甲苯致小鼠耳壳肿胀和新疆阿魏的抗炎镇痛作用研究2毛细血管通透性模型及小鼠热板法和电子压痛仪法观察新疆阿魏对炎症和疼痛的影响，为该植物资源的开发和临床应用提供实验依据。1 材料、试剂和仪器1.1 材料 新疆阿魏干品（2009 年 10 月，2010 年 7 月、8 月采集于新疆伊宁县喀什乡拜石墩分布的野生新疆阿魏的根） ；按中药制剂药理学
8、实验的常规方法制备实验样品在室温干燥至恒重，粉碎后过 40 目标准样筛。蒸馏水 12 倍量、10 倍及 10 倍，回流提取 3 次，混合提取液，浓缩备用 ，置于 4的冰箱中保存。小鼠 1822g，雌雄兼用，由石河子大学实验动物中心提供。1.2 试剂 伊文思蓝（进口分装：090305 上海蓝季科技发展有限公司） 、阿司匹林（上海蓝季科技发展有限公司） 、复方丹参片（广州白云山和记黄埔中药有限公司） 、CMC-Na（天津市光复精细化工研究所）、二甲苯、95%乙醇、无水乙醇、冰醋酸等均为分析纯。1.3 仪器 SK5200HP 超声仪（上海科导超声仪器有限公司，59Hz，200W） ，Metter E
9、L104 电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司） ，UV-2401PC 紫外分光光度仪（日本岛津公司） ，SHB- 循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司） ，DHG-9240 电热恒温鼓风干燥箱（上海齐欣科学仪器有限公司） ，FW100 高速万能粉碎机（北京市永光明医疗仪器厂） ，电子压痛仪（YLS-3E 型） ，玻璃仪器气流烘干器（长城科工贸有限公司） ，TG16-WS 台式高速离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司） 。2 实验方法2.1 药材前处理 将新疆阿魏的干品按中药制剂药理学实验的常规方法制备实验样品在室温干燥至恒重，粉碎后过 40 目标准样筛。蒸馏水 12、10 及
10、 10 倍，回流提取 3 次，混合提取液，浓缩备用 ，置于4的冰箱中保存。2.2 阿魏水提物对二甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响 取雄性小鼠60只，随机分为6组，每组10只，称重编号。即模型对照组、西药阳性对照组（阿司匹林）、中药阳性对照组（复方丹参片）、阿魏高剂量组、阿魏中剂量组和阿魏低剂量组。阿司匹林组、复方丹参片组、阿魏高、中和低剂量组分别灌胃给予200m gkg-1、50m gkg-1、100mgkg -1、50mgkg -1、25 gkg-1，模型组灌胃等量0.5%CMC-Na溶液，每天1次，连续给药5d。于末次次给药30min后，乙醚麻醉小鼠，在小鼠右耳背腹两侧均匀涂布二甲苯各25L致炎，
11、以左耳作对照。1h后脱颈处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，取样用直径为9mm的不锈钢冲子冲下左右两耳圆形组织块，电子天平分别称重，计算小鼠耳廓的肿胀率和肿胀抑制率。2.3 阿魏水提物毛细血管通透性的影响 与2.2操作相同，在涂二甲苯后，立即尾静脉注射1.0%伊文思蓝溶液0.1mL/10g，同时腹腔注射1.0%冰醋酸10mL/kg，30min后脱颈椎处死小鼠，用5mL生理盐水冲洗腹腔，吸管收集腹腔液，离心取上清液于590nm处可见分光光度计测定吸光度A值。按公式计算小鼠腹腔毛细血管通透性抑制率。2.4 热板法测定阿魏的镇痛作用 取合格雌性小鼠60只（痛阈值在5-30s），称重、编号，随机均分为6组，
12、分别给药方法同2.2步骤。给药前记录每只小鼠痛阈值，共2次，取其平均值。最后一次给药后30min测定各小鼠的痛阈值的变化（如超过60s，则按60s计算），计算痛阈增加值及痛阈提高率。2.5 电子压痛仪法测痛实验 取小鼠 60 只，雌雄各半，随机分成6组，每组10只。分别给药方法同新疆阿魏的抗炎镇痛作用研究32.2步骤。用压痛仪在小鼠尾中部压痛，测给药前的痛阈值。于末次给药30min后，测定各小鼠的痛阈值的变化。计算各组痛阈增加值和痛阈值提高率。3 试验指标a 抗炎指标：以肿胀率（%）和肿胀抑制率（%）表示抗炎效果。 10%右 耳 重 -左 耳 重肿 胀 率 =左 耳 重10%空 白 对 照 组
13、 平 均 肿 胀 率 -用 药 组 平 均 肿 胀 率肿 胀 抑 制 率 空 白 对 照 组 平 均 肿 胀 率A590-A59=模 型 对 照 组 腹 腔 液 给 药 组 腹 腔 液腹 腔 毛 细 血 管 通 透 性 抑 制 率 模 型 对 照 组 腹 腔 液b 镇痛指标：测定给药前后痛阈值的变化，计算痛阈增加值（s）及痛阈提高率（%） 。痛阈增加值（s）= 给药后痛阈值（s）- 给药前痛阈值（s） 10%痛 阈 增 加 值 （ s）痛 阈 值 提 高 率 =给 药 前 痛 阈 值 （ ）所有数据均输入SSPS16.0统计软件，进行统计学处理。各组数据均进行t检验均值标准差（）表示。xs4
14、结果与分析4.1 阿魏对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 新疆阿魏根提取物对小鼠耳廓肿胀的影响小鼠右耳涂抹二甲苯后，毛细血管充血颜色加深，呈粉红色。新疆阿魏根水提物中剂量组与模型对照组比较具有显著性差异（P 0.05） 。提示新疆阿魏根水提物中剂量组能有效地抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀。表 4-1 新疆阿魏根提取物对小鼠耳廓肿胀的影响组别小鼠只数（只）给药量gkg-1肿胀率（%）肿胀抑制率（%）模型对照组 10 - 83.7912.31 0阿司匹林组 10 0.2 51.8414.35* 38.13丹参片组 10 5 69.5518.89* 16.99阿魏水提（高） 10 5 71.9611.78
15、14.12阿魏水提（中） 10 2.5 65.6416.02* 21.66阿魏水提（低） 10 1.5 70.97824.21 15.29注：各组与模型组比较*P0.054.2 小鼠毛细血管通透性实验 新疆阿魏根水提物的伊文思蓝致毛细血管通透性实验 7：新疆阿魏的抗炎镇痛作用研究4表 4-2 毛细血管通透性实验组别 小鼠只数（只）给药量gkg-1小鼠腹腔液OD 值（ ）xs毛细血管通透性抑制率（%）生理盐水 10 - 0.44010.086 0阿司匹林 10 0.2 0.20180.068* 54.15丹参片组 10 5 0.28500.077* 35.24阿魏水提（高） 10 5 0.361
16、60.048 17.83阿魏水提（中） 10 2.5 0.36940.027 16.06阿魏水提（低） 10 1.25 0.29150.044* 33.77注：各组与模型组比较*P0.054.3 小鼠热板法性实验 新疆阿魏根水提取物对小鼠的热板法实验表 4-3 小鼠热板法性实验组别给药量gkg-1 0h 0.5h 1.5h 3.0h 4.0h生理盐水 - 24.603.33 29.67.97 33.6711.18* 31.336.11 34.0713.72阿司匹林 0.2 23.532.88 24.3310.57 33.4716.92 32.0017.56 30.7315.49丹参片 5 26.133.50 20.4719.67 25.7323.82 24.8722.91 21.0019.74阿魏（高） 10 23.874.37
