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1、带血管骨膜和同种脱钙骨基质联合移植与自体骨移植修复骨缺损的比较研究更新日期：2010-07-03 冀振亮蒋祖言王爱民王民刚李叶君 【摘要】目的了解带血管骨膜(VP)和同种脱钙骨基质(DBM)联合移植替代自体骨移植修复大段骨缺损的可能性。方法以兔桡骨中央 25mm 的大段骨缺损为模型,通过 X 线观察、X 线平片骨缺损修复 Lane 评分、组织学观察、骨组织形态计量分析和生物力学测试,比较术后 4,8,16 周时 VP+DBM 联合移植与自体骨移植修复骨缺损的效果。结果术后 4 周 VP+DBM联合移植及自体骨移植均已较好地完成了缺损的修复,而前者的 Lane 评分、皮质骨密度、力学抗扭刚度均显
2、著高于后者(P0.05)。结论VP+DBM 联合移植早期修复兔桡骨大段骨缺损的效果好于自体骨移植。后期两种方法修复效果基本一致。VP+DBM 联合移植后,两者之间建立了相互协同、相互促进的关系。 【关键词】带血管骨膜同种脱钙骨基质自体骨骨缺损移植 Comparative Study of Fresh Autogenic Bone and Vascularized Periostium Associated with Demineralized Bone Matrix Graft on Healing Large Segmental Radius Defect in RabbitsJI Zhen
3、-liang, JIANG Zu-yan, WANG Ai-min, et al. Dept. of Orthopaedics, 256th Hospital of PLA, Zhengding 050800 【Abstract】AimTo explore the possibility of vascularized periostium associated with demineralized bone matrix (VP+DBM) graft to replace fresh autogenic bone graft to repair large segmental bone de
4、fect. MethodsThe effect of fresh autogenic bone, and VP+DBM graft on the healing of a 25mm diaphyseal defect in 102 radii were studied respectively on 51 rabbits. The results were evaluated by X-ray examination, Lanes Radiographic Scoring, histological and histomorphometrical examination, and torsio
5、nal load testing. ResultsDefects filled with autogenic fresh bone or VP+DBM showed new bone formation of good quality. The Lanes score, the cortical bone density and the stiffness of the radia in the VP+DBM group were more significant than that in the fresh autogenic bone group 4 weeks postoperation
6、 (P0.01). ConclusionThe effect of VP+DBM graft is better than that of autogenic bone graft in the early healing stage of the radius defects in rabbits, but in the late stage their effects have no significant difference. The VP and DBM combination therapy can promote the healing of long bone defect r
7、apidly and reliably. It is believed that VP and DBM can be combined and can stimulate with each other. 【Key words】Vascularized periostiumDemineralized bone matrixFresh autogenic boneBone defectGraft 骨缺损的修复当前仍较困难。一般认为自体骨移植成骨效果好,是评价其他方法修复效果的基本标准,但来源有限。蒋祖言等1，2的实验证实,带血管骨膜(vascularized periosteum, VP)与同种
8、脱钙骨基质(demineralized bone matrix, DBM)联合移植修复骨缺损较快、较充分,新骨塑形好。而该联合移植法能否替代游离的自体骨移植修复大段骨缺损,目前尚不清楚。笔者以兔桡骨中央 25mm 的大段骨缺损为模型,比较术后 4,8,16 周时 VP+DBM联合移植与单纯自体骨移植修复的效果。 材料与方法 一、实验动物及分组 健康日本大耳白兔 63 只,雌雄不拘,体重 1.92.7kg。先随机取 12 只为 DBM 供体组,余51 只为手术动物。手术动物又随机分为 AE5 组,其中 E 组 3 只,其他组各 12 只。见表 1。 表 1手术动物分组情况 组别 兔数 双侧前肢移
9、植方式 处死时间(周) A 12 VP+DBM 移植/自体骨移植 4 B 12 VP+DBM 移植/自体骨移植 8 C 12 VP+DBM 移植/自体骨移植 16 D 12 VP 移植/DBM 移植 16 E 3 空白对照/空白对照 16 二、DBM 的制备 采用陈受谦等3方法制备 三、手术方式 手术动物以 30mg/kg 体重戊巴比妥钠静脉麻醉后,无菌条件下显露双侧桡骨干,游离并切取以桡动、静脉为蒂的桡骨中、下段骨膜瓣,大小约 27mm12mm,然后在桡骨中段造成 25mm的骨膜、骨缺损区,分别按下述不同方法进行移植修复:AC 组任选一侧为 VP+DBM 侧,植入DBM 细条,再用骨膜瓣包裹
10、;另一侧为自体骨移植侧,切除骨膜瓣,植入对侧无骨膜的桡骨碎条。D 组任选一侧为 VP 侧,植入明胶海绵条,并用骨膜瓣包裹;另一侧为 DBM 侧,切除骨膜瓣,植入DBM 细条。E 组双侧均为空白对照,切除骨膜瓣后不植入任何材料。 四、观察指标 1.X 线检查:手术动物分别于术后立即,2,4,8,12,16 周摄双侧肢体 X 线侧位片了解骨缺损修复情况。CE 组 X 线片再按 Lane 等4标准进行骨缺损修复评分。 2.组织学检查及骨组织形态计量分析:AC 组随机取 6 只动物及 D、E 组动物按期处死,切取包括整个缺损区的桡骨段,按高洪鸾等5方法制成纵切不脱钙磨片,1%甲苯胺蓝染色,光镜下观察其
11、缺损修复状况,并对 AC 组标本利用电子计算机计量分析系统(重庆大学光机研究所,MAS-1 型程序)计算下列指标:(1)总骨密度=新生骨性组织面积/缺损区总面积100%;(2)小梁骨密度=骨小梁组织面积/缺损区总面积100%;(3)皮质骨密度=总骨密度-小梁骨密度;(4)骨皮质及骨膜厚度6，7 。 3.生物力学测试:AC 组余 6 只动物处死后切取完整桡骨,在 VD-1OE 型电子万能力学试验机 (长春第二试验机厂)上行扭转试验。记录其断裂时最大扭距(Mnmax)和变形角(max)。按 White 等8公式计算其抗扭刚度(GIP),公式为:GIP=Mnmax/max。 五、统计学处理 所有数据
12、均以平均值标准差表示,配对资料用配对 t 检验,未配对资料用两组比较 t 检验或方差分析处理。 结果 一、一般情况 所有兔切口期愈合 。除 D 组 1 只动物术后 2 周意外死亡外,其余动物均存活。处死动物时解剖观察移植骨膜瓣的血管蒂全部通畅。 二、X 线检查 自体骨移植侧,术后 2 周植入自体骨密度降低,周围出现少量浅淡的新骨阴影。术后 4 周新骨阴影基本填充整个缺损区。术后 8 周出现不规则髓腔。术后 12,16 周新骨的密度和外形与正常桡骨基本相同。VP+DBM 侧,术后 2 周缺损区内出现较多的骨痂阴影。术后 4 周骨痂阴影充满整个缺损区,并出现不规则髓腔。术后 8,12,16 周缺损区新骨组织密度及形态接近正常桡骨。术后 16 周 VP 侧仅有 8 例肢体缺损区出现 1 条纤细的新骨阴影,余侧肢体缺损区新骨阴影较少。D 组 DBM 侧及 E 组空白对照侧缺损区无明显新骨阴影。
