比较不同机体代谢状况对缺氧耐受的影响——病生实验

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1、比较不同机体代谢状况对缺氧耐受性影响的实验研究目的 :比较不同机体代谢状况对缺氧耐受性影响的实验研究方法:通过构建小鼠低张缺氧模型,分别观察咖啡因和氯丙嗪注射的小鼠的死亡时间实验原理:机体对缺氧的耐受性,除受缺氧程度、缺氧发生速度、缺氧持续时间以及缺氧类型的影响外,还与诸如年龄、性别、种属、机体的代谢状况、组织代谢特点、组织代谢耗氧率 及适应性锻炼等因索有关。本研究通过复制不同代谢状态的动物模型,观察机体对缺氧耐受性的影响及其影响因素。咖啡因为中枢兴奋剂,注射后可使中枢神经系统兴奋,兴奋大脑皮层的作用尤为突出。表现机体反应性增强,思维活跃,呼吸加深加快,心率加快,心肌收缩力加强,心输出量增多,

2、致使机体处于高代谢状态。氯丙嗪为中枢多巴胺受体的阻断剂,具有抗精神病、镇吐、能增强催眠、麻醉、镇静作用、阻断外周 -肾上腺素受体,抑制体温调节中枢,使体温调节失灵,体温可随外环境变化而变化。用较大剂量氯丙嗪时,置患者于冷环境中(如冰袋或用冰水浴),可出现镇静、嗜睡、体温降低至正常以下(如 34或更低)、基础代谢降低、器官功能活动减少、耗氧量减低而呈“人工冬眠” 。注射后可诱导睡眠,抑制机体产热,增加散热,降低机体体温,抑制心脏和血管运动中枢,使器官活动减弱,机体对刺激的反应性降低,从而降低基础代谢率,使机体处于低代谢状态。1 实验材料器材:200ml中间能隔开动物的长玻璃筒、1ml注射器、剪刀

3、、镊子。药品:生理盐水,0.25%氯丙嗪,1%咖啡因动物:小白鼠2 实验过程1) 取体重年龄相近同性别的小白鼠 6 只,称重,标记2) 实验小鼠分组情况:实验组 I:1 和 2 号小鼠分别腹腔注射 10 mlK g-1 的咖啡因和氯丙嗪,然后分别放 1到两个长玻璃筒中;实验组 II:3 和 4 号小鼠分别腹腔注射 10 mlK g-1 的咖啡因和等量生理盐水,然后 2分别放到两个长玻璃筒中;实验组 III:5 和 6 号小鼠分别腹腔注射 10 mlK g-1 的氯丙嗪和等量生理盐水,然后 3分别放到两个长玻璃筒中;3) 待玻璃筒中两只实验小鼠出现兴奋或抑制状态时,正常小鼠恢复安静状态,将玻璃筒

4、封闭4) 每隔两分钟观察小鼠的呼吸次数和呼吸频率,观察小鼠死亡时间 3 实验结果3.实验结果1 2 3 4 5 初始状态 濒死状态组别编号重量(g)注射量(ml )注射时间封闭时间 兴奋状态呼吸频率兴奋状态呼吸频率死亡时间存活时间(分)死亡状态1 15.4 0.15 15:02 15:07 兴奋 加深加快 剧烈抽搐 变浅加快 15:26 19 僵直I2 15.0 0.15 15:02 15:07 半睡 眠 正常 轻微抽搐腹式呼吸变深变慢15:45 38 正常3 15.3 0.15 15:47 15:55 兴奋 加深加快 剧烈抽搐 变浅加快 16:17 22 僵直II4 14.8 0.15 15

5、:47 15:55 正常 正常 抽搐 变浅加快 16:26 31 正常5 15.8 0.15 16:28 16:35 半睡 眠 正常 变浅加快腹式呼吸变深变慢17:17 42 正常III6 15.3 0.15 16:28 16:35 正常 正常 抽搐 变浅加快 17:08 33 正常6讨论氧是生命活动所必须的重要物质之一,当组织得不到充分的氧或组织利用氧发生障碍时,组织器官的机能、代谢,甚至形态结构将发生异常变化,严重时可导致机体死亡。缺氧是I临床上常见的致病因素或重要的病理过程,与诸多疾病的发生、发展有密切关系。如何提高机体对缺氧的耐受性,对于减轻缺氧的病理损伤,减少并发症,都具有十分重要的

6、意义。本实验旨在通过改变机体的代谢状况,观察机体在不同代谢状况下对缺氧耐受性的影响,并对其影响因素进行探讨。本实验结果表明,咖啡因处理组小白鼠的存活时间明显缩短,代谢耗氧率显著增加,而总耗氧量却减少,剩余氧浓度增大。这说明中枢神经系统兴奋后机体活动增加,呼吸运动增强,代谢率提高,对氧的需求量增大,故代谢耗氧率增高。但由于本实验是在密闭的政氧环境下进行,呼吸运动的增强非但不能摄取更多的氧,反而由于呼吸肌做功增加,需氧量增多。因随时间的延长,瓶内空气中的剩余氧浓度越来越低,摄取的氧不能维持机体的代谢需要而致动物死亡加速,存活时间显著缩短。由于动物代谢耗氧率增加,以致于在氧浓度较低的情况下所摄取的氧

7、不能维持机体高代谢之需要,所以剩余氧浓度较对照组增高;又因动物存活时间短,故总耗氧量较对照组减少。实验组的小鼠通过人工冬眠的作用使动物体温下降,组织器官活动及对各种刺激反应下降,机体代谢率下降,耗氧量减少,耐缺氧能力提高,存活时间延长。另外,有研究表明氯丙嗪能够减轻缺氧缺糖引起的细胞损伤,其机制可能与调控IB/ NF-B 途径,减少凋亡相关基因的表达有关2。因此实验中实验组小鼠较对照组耗氧量及死亡时间均增加,耗氧率减少。氯丙嗪处理组小白鼠,其存活时间明显延长,代谢耗氧率显著降低,总耗氧量减少,剩余氧浓度增大。这可能由于注射氯丙嗪后,动物安静少动,处于半睡眠状态,基础代谢率明显降低,对氧的需求量

8、显著减少,故代谢耗氧率明显降低,因此在密闭的缺氧环境中可使动物存活时间显著延长。剩余氧浓度增加说明动物对氧的摄取能力降低,因而也致总耗氧赶下降本实验证明,机体处于不同代谢状态时,对缺氧的耐受性有显著性差异。当机体处于高代谢状态时,活动增强,代谢耗氧率增高,存活时间缩短、对缺氧的耐受性降低;反之,当机体处于低代谢状态时,代谢耗氧率降低,存活时间延长,机体对缺氧的耐受性日月显增强;同时也应注意,机体过度抑制时对氧的摄取能力亦下降,因此,临床上在进行冬眠疗法时,应注意掌握冬眠的深度,以免抑制过深,反而使机体对氧的利用能力降低。由于实验条件有限,无法做到多次重复,是本实验实验设计上一大缺陷。另外,在本实验中观察三种不同代谢条件小鼠的缺氧耐受能力,若能应将三鼠同时放入一“三通”玻璃筒中,则实验的严谨性也可进一步提高。

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