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1、精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 独家原创 1 / 14细胞培养的心得体会1、寄运细胞或者接收细胞，都要做好充足的准备;如果是让其它实验室寄运细胞，或者寄给别人细胞，细胞应该如何处理是主要考虑的问题假设细胞在途中要经过 48 小时，那么可以待细胞长到 50%的密度时处理细胞，即将细胞培养瓶内加满培养液，拧紧瓶盖，用封口膜封紧瓶口；然后将培养瓶放进泡沫盒，用纸或泡沫将盒内空间填满，使培养瓶不能随意移动同时将泡沫盒钻上几个孔，使空气可以流通因此要确定准备好以下物品：透气的细胞培养瓶；封口膜；足量的培养液；放细胞培养瓶的泡沫盒及填充物；除了细胞的处理，还要注意以下几点：1
2、）提前跟快递公司人员联系，要上门取货 2）时间安排；接收细胞就容易多了，提前准备好细胞培养用耗材及培养用液就可以了，紫外灯先打开，收到细胞将培养瓶中大部分培养液吸掉，留下 4-5ML 培养液；培养一天后，观察细胞状态，确实是传代还是换液总而言之，运送细胞讲究两点：1 离开了培养箱要防止被污染 2 尽量缩短细胞不在培养箱的时间，不然时间过久细胞长满脱落就没得救了细胞生物学学习体会通过网络课程学习,有幸聆听到王金发教授对细胞生物学课程的讲授，使我不仅学到了细胞生物学专业新的知识与研究技术、方法,而且在教学方面也受益非浅下面就我的学习谈一些体会一、 全面学习了细胞生物学的专业知识细胞生物学精品文档2
3、016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 独家原创 2 / 14是一门包容量大、发展迅速的学科内容涉及生物膜的结构与功能；内膜系统区室化形成及各种细胞器的结构与功能；细胞信号转导；细胞核、染色体以及基因表达；细胞骨架体系；细胞增殖及其调控；细胞分化、癌变及其调控；细胞的衰老与程序性死亡；细胞的起源与进化；细胞工程技术等多个方面(一)对细胞生物学的专业知识有了更深的认识 1、 细胞通讯方面记得第一次听王老师的课就是讲授细胞的通讯，在多细胞生物中，细胞不是孤立存在的，而是生活在细胞社会中，它们必须协调一致，才能维持机体的正常生理机能，它们的协调是通过细胞通讯来完成的细胞通讯是通过信号分子
4、与受体的识别，从而在靶细胞内产生一系列反应的过程信号分子有第一信使和第二信使之分，第二信使位于细胞内，由第一信使与受体识别后最先在胞内产生的，它主要与细胞内受体作用，所以受体也可分为表面受体和胞内受体信号分子与受体的识别作用具有特异性细胞信号传递所发生的反应有快速反应和慢速反应快速反应是信号分子与受体作用后直接引起细胞内的一系列代谢反应；慢速反应则需要引起基因表达，再表现出各种代谢反应细胞通讯过程是个复杂的过程，一个细胞的周围有上百种不同的信号分子，细胞要对这些信号分子进行分析，做出正确的反应信号转换的研究在近年很热门，但进展缓慢，主要是因为信号转换的复杂性，不同信号的组合产生精品文档2016
5、 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 独家原创 3 / 14的效应是不一样的 2、蛋白质的合成和分选机理蛋白质的合成是在核糖体上，有两种合成体系，一种是在细胞质中游离的核糖体上，另一种是在膜旁核糖体上合成，它们合成的蛋白质将分布到不同的部青岛农业大学科研训练总结与体会 2012 年五月到九月间我在青岛农业大学无脊椎动物细胞中心跟随郑桂玲老师进行科研训练，为期四个月的科研训练结束了，这次科研训练让我受益匪浅首先我对我们的专业有了更深的了解，对我们专业的发展和应用有了全新的认识，对就业亦或考研有了新的想法生物技术是一个新兴专业,目前生物技术产业在中国还属于起步阶段，虽然目前国内冒出许多生物
6、技术公司，但是大部分具有规模小，技术含量低的特点，甚至部分只是挂名生物技术而已因为生物技术具有前期投入大，风险大的特点，按照中国国情，短时间内，中国无法形成大规模的生物产业集团，就生物技术专业而言，该专业未来前景不错，基于这一原因，目前国内各大高校纷纷开设生物技术专业，但是他们并没有考虑目前的实际情况生物技术作为一门高新技术学科，必须经过长期培养才能在实际应用中显示出一定的效果，经过大学四年的学习我虽然已经掌握了植物保护方面的基础知识，但还没有建立起基础的理论框架，知识的匮乏必然会是我以后工作学习的障碍科研训练之前我无心考研，认为研究生阶段的学习只会浪费三年的时光，但是经过科研精品文档2016
7、 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 独家原创 4 / 14训练阶段的亲身体会，我意识到如果不经过系统的科研训练和长期的理论学习，我将难以在植物保护方向有任何建树，因此我下决心考研，科研训练帮助我找到了前进的方向，这对我以后的工作生活将有重要影响我的研究方向是粉纹夜额胚胎细胞系无血清悬浮培养条件的探究，无血清培养基是在天然培养基、合成培养基之后获得迅速发展的一类培养基该类型培养基可以在不添加血清的情况下培养特殊类型的细胞无血清培养基可以在稳定的外部环境下进行细胞培养，可以最大限度的避免外来因素的影响可以为昆虫细胞悬浮培养提供稳定的培养介质传统的血清培养基保存期短，易腐变，添加血清可能改
8、变某些细胞的理化性质，导致实验产生外源性误差，例如：血清可能促进成纤维细胞细胞的生长同时抑制表皮细胞生长；同时血清含一些对细胞产生毒性的物质，影响细胞生长甚至造成细胞死亡血清制作成本高、过程复杂、批间差异大，对转基因蛋白生物药品分离纯化工作造成了极大困难与血清培养基相比无血清培养基具有以下明显的优点：(1)可以避免不同血清制品的差异性，使重复实验的可靠性极大提高(2)减少外来物质对细胞的毒性作用和污染(3)可以促进体外培养细胞的分化(4)无血清培养基成分稳定， 有利于细胞产物的分离纯化细胞悬浮培养是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术非贴壁依赖性细胞的一般精品文档2016
9、 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 独家原创 5 / 14采用悬浮培养的方式培养，分散于培养基中的细胞更容易与营养物质接触和交流，通过振荡或转动装置使细胞悬浮于培养基中生长或维持由于理化性质的稳定，在悬浮培养状态下细胞型态能保持一致，这有利于进行生理生化活动的研究和各种遗传操作，这也为昆虫细胞的大规模培养提供前期技术基础但是细胞悬浮培养技术在国内应用还不广泛，生物制品生产仍采用落后的的转瓶细胞培养方式因为细胞悬浮培养相对于传统的转瓶培养有巨大的优势，悬浮培养技术必将取代转瓶培养技术成为进行生物药品研制的主流技术应该认识到，进行无血清培养和昆虫细胞悬浮培养的研究只是进行大规模细胞培养的
10、基础工作，发展真正的动力是市场对生物制品的巨大需求生物制品竞争的实质是生物制品核心技术的竞争，首先掌握了无血清技术和大规模细胞悬浮培养技术，提高了产品产量和质量降低了生产的成本，就能在下一轮行业发展中掌握市场主动权粉纹夜蛾胚胎细胞系群体倍增时间短，杆状病毒和外源蛋白产量高，该细胞多种细胞的培养方法 HePG2 细胞和 L-02 细胞的传代：HePG2 细胞属人肝肿瘤的恒生细胞株，L-02 细胞则是人胎肝细胞株，二者所使用的培养基可以是一样的，即最常见的 DMEM 一干使用低糖的细胞长满培养瓶时既要传代使用胰酶消化即可用 D-Hanks 液配制成%的胰酶使用前37 度预热，细胞经 PBS 清洗两
11、遍后，每个中号培养瓶加的精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 独家原创 6 / 14胰酶，胰酶的量可根据自己培养瓶的大小而定，原则就是能够盖满瓶底加入胰酶以后，为使酶的活性最大，将培养瓶盖拧紧后放回培养箱中，3 分钟左右即用含血清的培养基终止消化如果在室温情况下消化，时间相应加长，可以在显微镜下观察，当细胞界限已十分清楚，即已分离为单个细胞，且有少量细胞漂起，则要终止消化了 16HBE 细胞株的传代方法：镜下观察细胞生长融合达 70-80%，准备传代常规开紫外照射超净台 20 分钟，同时把含 10%胎牛血清的MEM 培养基、025%胰酶、PBS 放置 37 度培养箱中孵
12、育 20 分钟后开始传代先弃掉旧培养液，加 PBS 洗一次，然后加 025%胰酶 2ml 消化细胞，镜下观察细胞，细胞突起回缩，细胞变圆，然后将培养瓶放置 37 度二氧化碳培养箱中孵育 3 分钟左右，待细胞大部分消化下来，加 4ml 含 10%胎牛血清的MEM 培养基终止消化反复吹打瓶壁上残留的细胞，并将已消化下来的细胞吹打均匀，然后吸入离心管中 1000 转离心 1分钟，然后弃掉上清，用手指将离心管中的细胞弹打均匀，加新培养基，吹打均匀，分至 3 个新的培养瓶中，补足培养液将培养瓶平放，小心移入 37 度二氧化碳培养箱中培养过夜次日观察胃癌细胞 AGS 和 SGC-7901 的培养：细胞传代
13、时不能长的太满,70%-80%就可以传了.实验前先把紫外灯打开照 30 分钟,然后再把鼓风机开 10 分钟,同时把培养液和胰酶放入 37 度水浴箱中,千万记住不要盖上水浴箱的盖子.精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 独家原创 7 / 14传代时,我一般把培养瓶口过一下火,就直接把培养液到去,再用%的胰酶(不含 EDTA)消化.等细胞变圆,细胞间空隙加大就直接把培养液到去,不用离心,然后再吹打,虽说要轻柔,但很难吹打成单细胞悬液,所以稍用力也没有关系.虽然操作不规范,但节省时间,细胞也没有被污染.AAV-293 细胞的传代:AAV-293 细胞较喜欢成团生长,比较娇嫩,
14、怕冷,传代时不要一次从二氧化碳培养箱拿出很多瓶,一次只要拿 2-3 瓶出来传就可以了,否则细胞很容易死掉.细胞在 50-60%传代,细胞生长状态最好.用 D-Hanks 液配制成%的胰酶消化半分钟左右,弃去胰酶.观察培养瓶是否有针孔样缝隙,如有就可以加入培养液吹打细胞.消化过久,对细胞损害很大,而且成团很难吹打成单个细胞.然后加入含有 10%小牛血清的 DMEM.轻轻放入二氧化碳培养箱中培养. 肺癌细胞，其中绝大部分都是贴壁细胞，具体如：精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 独家原创 8 / 14 在消化传代过程中，步骤基本一致：吸去旧的培养液用清洗一两次加入一定量的消化液置显微镜下观察，待细胞大部分变圆时，回到超静台吸去消化液加入一定量的新培养液反复吹打细胞再置显微镜下观察，直到细胞全部悬浮起来吸出一部分加入新的培养瓶中最后再补充加入一定量新的培养液注意： 吹细胞时尽量多吹边角儿，此处细胞生长的多另外吸出细胞前要混匀 另注：消化液的配制方法：Trpsin-EDTA(1X)-% Trpsin with EDTA-4Na prepared with Trpsin(1:250) and EDTA-4Na/L in HBSS 小鼠前脂肪细胞：吸弃原培养液PBS 洗一两次加入胰酶消化转动培养盘，保证整个盘面都被trypsin 液润过-吸弃 trypsin 后
