[临床医学]临床微生物标本的选择、采集、运送及保存

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1、 临沂市中医院检验科 - 微生物室临床微生物标本的选择、采集、运送及保存要发挥实验室的有效作用,选择正确生理部位和采集合适的标本及其正确运送等环节最为重要。标本的采集和处理应该优先考虑,否则,实验室所做的工作几乎没有什么价值。因此,所有与标本质量的各环节有关的医务工作者必须要了解在整个实验过程中保证标本质量的重要性和必要性。实验室有责任提供相关信息资料,使之编入各科室的护理手册中。包括详尽的安全标准,标本的选择、收集、运送、接收和填写及粘贴标签的标准。在此手册中为您提供了临床微生物实验室的送检标本的正确采集和处理指南。安全指南对于实验室工作人员最先考虑到的应是实验台的安全。其他医务人员也许没在

2、意在送往实验室的标本中潜在有病原体。所以要制定安全规章制度以保护实验室人员和其他可能接触到病原体的人员。大多数的微生物实验室的手册中都有实验室安全操作章节部分,实验室操作手册中还应该包括有关标本管理的安全操作的内容。有关生物安全的参考资料对于每个微生物实验室都适用。适用于实验室的安全参考资料应该包括有 微生物实验室和生物实验室的生物安全指南,第三版 ,以及实验室的 生物安全指南: 谨慎操作和处理传染性材料准则 。直接有关标本的安全管理方针:1. 所有采集标本的操作要戴手套,穿工作外套、口罩、甚至护目镜。2.所有标本容器必须防漏,运送也应装入密封防漏的塑料袋中,袋上附有一表格用于填写日期、时间、

3、姓名之用。 临沂市中医院检验科 - 微生物室3.决不能将带有针头的注射器送到实验室。应将注射器中的标本注入无菌试管中。或采用防护手段取掉针头,再盖上注射器并放入密封防漏的塑料袋中送检。4.不得将装有标本的破损容器送往实验室,也不能对其进一步处理。应该及时向医生通报容器渗漏,解释如果留用标本,会带来的潜在危害性并要求重新送检。如果新标本送来,则将泄漏的标本高温高压处理后再废弃掉。标本的选择与采集采集送检标本前,必须有所选择标本的种类和采集部位并要反应有效病程。如果不选择有效部位,再好的方法采集的标本,没有有效病原体也没多大临床价值。以下为普通标本的选择与采集指南:1. 要避免常居菌群随时可能造成

4、的污染,以确保取得反映感染过程的典型标本。有许多感染部位的病原体当存在于健康宿主时却被认为是正常菌群。这种正常菌群的“背境噪音” (即来源于皮肤、隔膜和呼吸道)会对培养结果有干扰,过度生长的正常菌群也会掩盖真实病因。2. 选择正确的解剖学部位获取标本,采用适当的技术和适当的用品,如表中所述。3. 厌氧菌培养标本所选择的适当部位参见表 1,活检组织或穿刺液是很好的标本,而厌氧拭子送检是起码的要求。决不可冷藏用作厌氧培养的标本,而应置于室温下。4. 采集的标本要足量。标本量少了会产生假阴性结果。5. 每份标本都应贴上标签,写上病房、病人姓名、ID 号、标本名称、明确的 临沂市中医院检验科 - 微生

5、物室部位、日期、采集时间和采标本人姓名等。6. 将标本放入特制的容器,此容器应有利于可疑病原体的存活,防渗漏,无安全隐患。病毒、立克次体、衣原体、以及支原体的标本运送(略)标本的送检1. 所有标本都必须 立即 送往实验室,最好在 2 小时内。如果不能及时送检,细菌病原体待检标本可按表 2 中规定的条件下存放。2. 通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过小时。而病毒检测的标本可于存放 23 天。3. 最佳的临床标本送检,包括厌氧菌培养标本,首先取决于所获取标本的量。量少的标本要在采集后的 1530 分钟内送检。活检组织如果采用厌氧运送方式,可于 25存放 20 至 24 小时。4. 对环境敏感的

6、细菌包括有志贺氏菌(立即处理) 、淋病奈瑟氏菌、脑膜炎奈瑟氏菌和流感嗜血杆菌(对低温敏感)等。决不能冷藏 CSF、生殖器标本、眼部标本和内耳道标本。5. 临床标本或传染性材料从一个实验室到另一个实验室的送检,不论距离长短,都要求严格注意标本的包装和标签说明。所要运送的材料必须贴上适当的标签,包装得当。送检期间要予以安全防护。标本的接收和拒收标准 有时,送到实验室的标本选择部位不当、采集和运送不当。这些在本质上属于标本失控。失控的过程也必须予以同样的重视。就象对待失控的鉴定和药 临沂市中医院检验科 - 微生物室敏试验一样;必须予以纠正。失控标本得出的结果会给医生提供错误的信息,导致误诊和治疗不当

7、。因此,实验室必须坚持一条严格的标本接收和拒收准则。以下列举了几条明确的实验室准则,必须使其成为制度,予以执行,以保证标本质量:1.无标签的标本,不接收。与采集标本的医生或护士联系。对于非侵害性方式获取的标本(尿;痰; 咽喉部标本)要求重新采集送检。对于侵害性操作获取的标本(穿刺液;体液或组织)只有在与采集此标本的医生商量之后,方可接收检测,并要在报告上注明此问题,将其记录存档。2.延误的标本,不接收。警告送检者并要求其重新送检。在报告中注明“送检延误” 。3.送检容器不当或渗漏,不予接收。告知送检者并要求重新送检。4.标本不合要求(如厌氧培养标本却按需氧培养标本送检) ,不接收。联系送检者,

8、阐明试验要求。说明其不同之处。要求其再送检符合试验要求的标本。5.同一天申请作同一试验的重复送检标本,不接收。在标本中放入合适得防腐剂,置于适当温度。与送检者联系并说明标本重复不予处理。在报告单上予以注明。也有例外的情况,就是即使得到的标本质量不好也必须要作检测,例如情况特殊或取材困难或感染疾病的咨询等。表列出了一些不能为临床提供有价值信息的标本 ,应取消试验。无菌体液可能来自严重感染或生命垂危的患者。必须迅速而正确地处理标 临沂市中医院检验科 - 微生物室本。体液标本是否离心、是否接种琼脂平皿、是否接种血液培养瓶都必须根据实验规程来决定。表列出了一些处理无菌体液标本的建议。标本的管理针对于大

9、多数临床实验室接收到的常见标本,表到表 10 提供了各标本的管理特点,包括细菌学,真菌学,病毒学和寄生虫学。表.各种适于厌氧菌培养的临床取材可接收标本 不可接收标本抽吸物(用注射器或采集针) 未防污染的支气管灌洗液巴多林氏腺(前庭大腺)标本 宫颈分泌物胆汁 污染的子宫颈内拭子血 气管内抽吸物骨髓 恶露防污染手段获取的纤支镜刷检物 鼻咽拭子后穹窿穿刺标本 会阴部标本输卵管标本 前列腺液和精液IDU(子宫内避孕器)取材用于放线菌检测咳出的痰卵巢标本 诱发的痰胎盘(剖腹产的) 粪便或直肠拭子瘘抽吸物 咽拭子粪便(分离艰难梭菌) 气管切开术抽吸物外科手术拭子 尿道标本 临沂市中医院检验科 - 微生物室

10、外科手术组织取材 膀胱尿或导管尿气管穿刺吸取物 中段尿耻骨上方穿刺尿 阴道或外阴拭子子宫内膜抽吸物表 2 各种标本运送方式及可疑致病菌的保存条件 防护措施 4C0 25C0无 支气管灌洗液,组织标本, 导管液,I.V.,csf,肺活检组织,心包积液,痰,尿液Csf,滑液厌氧运送 腹水,羊水,厌氧培养标本,抽吸物,胆汁,肓管标本,深部伤口材料,IUD( 放线菌检测),肺抽吸物,胎盘(剖腹产),窦内抽吸物,组织( 手术), 气管抽吸物,耻骨上穿刺液直接接种于培养基角膜刮取物,血培养, 博得特氏菌属用RLorBG 平皿, 淋病奈瑟氏菌用JEMBEC 平皿, 玻璃体液需氧运送 烧伤活检组织,弯曲菌属,

11、 外耳材料,志贺氏菌属, 弧菌属,耶尔森氏菌属骨髓,博得特氏菌属, 宫颈分泌物, 关节液,结膜拭子,棒状杆菌属,内耳取材,生殖器标本,鼻咽标本, 奈瑟氏菌属, 沙门氏菌,上呼吸道标本.表 4 无菌体液的标本处理体液 采集容器 浓集 染色 注释评估羊水 厌氧管 不必 Gram 染色后窟窿穿刺液厌氧管 不必 Gram 染色透析液 Isolatortube.Bx2离心或过滤 Gram 染色或吖啶橙染色(检出率低)白细胞5ml 需作真菌学检验,无 WBC为正常,积脓可有许多白细胞 临沂市中医院检验科 - 微生物室滑液 Bx2+厌氧管 离心 Gram 染色 很少白细胞为正常标本处理规程正确采集和处理标本

12、是诊断感染性疾病的关键。在前面已经讲了标本的采集和运送指南。实验室有责任指导临床正确地采集和运送标本,这就要求实验室提供实验室手册印刷品。若有必要实验室也可以提供培训。若实验室的策略和规程有变化应该及时予以传达。实验室一旦接收到标本,应该马上在检验申请单上签上收到日期和时间。许多实验室是用印章盖上的方式。此时,应该检查标本和申请单以确保其达到所要求的接收标准。要建立标本接收的最低标准,同时要有不合格标本(未达到接收标准)的拒收指南。在某些情况下对一些标本应拒绝作培养,见表 1。一旦确定拒收标本,就一定要及时通知提供标本的医护人员,以便及时重新采集合格的标本送检。表 1 拒收标本的标准运送标本的

13、温度不合适所用运送培养基不合适运送标本的时间过长标本容器上未贴标签或贴错了标签标本泄漏容器有裂缝或被打破标本明显被污染拭子上的标本干掉 临沂市中医院检验科 - 微生物室标本不适合于作所要求的试验标本使用了固定剂标本量不够24 小时内重复送检的标本(血培养除外)微生物检验申请单和标本标签应该包含以下信息:患者姓名、年龄、性别、住院号及住院科室或地址;申请医生的名字、标本名称、标本采集的日期和时间;以及检验目的和诊断等。如果填写不全,实验室应该在处理标本前要求负责提供此标本的人员将漏掉的信息补上。如果标本不符,要求其重新采集。只有采集困难的标本才可以不重新采集,例如在手术中采集的组织标本或脑脊液,

14、但要与临床联系沟通;并且要对这些异常情况实验室都应作好记录存档。所有的患者的标本都应该视为具有传染性,并要按照标准预防措施进行标本处理。此标准预防措施相当于以前通用的预防措施,其设计用以降低来自于明确传染源和不明传染源的微生物传染的危险性。在大多数实验室,专门划出一块区域用于临床标本的接种处理。严格地说,除了呼吸道标本的一般处理和做真菌或分支杆菌检测的送检标本的处理外,其它所有标本的处理都应该在 II级生物安全柜中进行。要带手套,以及防渗透的隔离服、口罩,护目镜(或塑料防护罩)主要用于预防标本的飞溅或汽雾的污染。在制订标本处理规程、准备培养基以及建立日常用于快速、经济地诊断感染性疾病的实验方法

15、时,实验室要特别考虑到特殊患者群体、某些疾病在特殊地区的发病率以及相关的病史和/或现行治疗法。此章节的余下部分还有特别关于接收微生物标本的评估处理指南。分为四 临沂市中医院检验科 - 微生物室部分:细菌学,病毒学,真菌学,以及寄生虫学。每部分按标本种类进行组织,其中介绍了标本的处理、直接检测的方法步骤、以及如何从这些标本中培养检出微生物。细菌学通则细菌感染的成功的实验室诊断依赖于许多方面。适当的标本选择、采集、和运送应符合标准,以保证所采集标本能典型反映病程,要尽量避免标本被邻近组织的微生物污染。实验室有责任拒绝采集和运送不合格的标本。实验室一旦接收到标本,就要根据标本的类型对标本小心地进行处

16、理,选择合适的培养基和选择适当的培养条件。大量引起感染的病原体对微生物工作者都具有挑战性,促使微生物工作者要建立合理的方式方法来处理所有的标本。在接种标本之前,某些标本还需要进行初步的处理,如标本的稀释,浓缩,混匀,或去污染等等。大多数细菌学送检标本都应该作 Gram 染色直接镜检;而且如果怀疑有分支杆菌还需要作抗酸染色检测抗酸杆菌。其它直接检测标本的方法,如荧光抗体(DFA)染色、酶免法(EIA) 、以及 DAN 杂交或扩增技术测定只能有选择性地用于一些特殊情况。分离培养细菌时,通常是采取多种培养基组合使用;包括有营养培养基、选择性培养基、非选择性培养基、或特定的培养基等。大多数的常规培养是在35 37;但是,有些病原体的最适生长

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