《醋炙对延胡索成分及镇痛作用的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《醋炙对延胡索成分及镇痛作用的影响（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、醋炙对延胡索成分及镇痛作用的影响陆城宇，孙莹洁，黄蓉，蔡群（南京中医药大学药学院 13 中药 1，江苏 南京）摘要：目的 采用外表一点法比较醋炙前后延胡索中延胡索乙素的含量及其对小鼠镇痛效果的影响。 方法 采用 HPLC 法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，,流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）(三乙胺调节 pH=6.0)，等度洗脱；流速为 1.0 mL/min,柱温为 30,检测波长为 280 nm。 结果 醋炙品中延胡索乙素含量明显高于生品且醋炙延胡索止痛效果最好。结论 延胡索醋制后大量生物碱和醋酸反应生成生物碱盐提高煎出量，但本实验中对小鼠的止痛作用并未有明显体现。关键词：延胡索
2、; 炮制; 延胡索乙素;中药延胡索为罂粟科植物延胡索 Corydalis yanhusuoW. T. Wang 的干燥块茎，又名元胡、玄胡，延胡索味辛、苦，性温，归肝、脾经，具有活血、利气、止痛的功能。为理气止痛、活血化瘀的要药，常用于血瘀气滞所致机体各部位疼痛，主要有效成分为生物碱，延胡索在中医临床使用中多用醋制品 【1】 。实验采用 HPLC 法测定了延胡索生品及醋煮炮制品中的延胡索乙素的含量，比较炮制前后的生物碱含量变化和镇痛实验，验证中医临床使用中多用延胡索醋制品及醋煮法炮制的理由。1 材料Agilent1100 高效液相色谱仪、延胡索饮片、镇江产米醋、真空干燥箱、延胡索乙素标准品、高
3、速离心机、炒锅、锅铲、搪瓷盘、切药刀、标准筛（50 目，即 3 号筛） 、研钵、万分之一电子天平、容量瓶（10ml、5ml） 、移液管（25ml 、 50ml） 、烧杯、玻璃漏斗、锥形瓶、量筒、微量进样器、流动相过滤装置、台式天平、秒表、注射器、灌胃针、超声仪、小鼠笼等，所用试剂均符合各条件下规定。2 方法与结果2.1 醋煮延胡索的制备取净延胡索 50g，加醋（10ml）浸润。加水 200ml 于煮锅内 ，先用大火煮沸，然后加入延胡索及醋液于锅内（锅内液体要平药面） ，调小火煮40min 后，调大火收水，煮至醋液被吸尽，无硬心时取出，干燥，捣碎成颗粒状。( 每 100kg 延胡索，用醋 20k
4、g) 2.2 延胡索乙素含量测定2.2.1 色谱条件色谱柱：C18 色谱柱；检测波长 280nm；流速:1.0 mL/min；柱温:30；进样量:10L；流动相:甲醇-0.1% 磷酸溶液(三乙胺调 pH 至 6.0)【2】 ；梯度方式：等度洗脱。理论塔板数按延胡索乙素计应不低于 3000。2.2.2 对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每 1ml 含 46ug 的溶液，即得。2.2.3 供试品溶液的制备取延胡索生品和醋炙品，打粉，过 3 号筛，用万分之一电子天平称得：延胡索生品 1.0005g，醋炙延胡索 1.0017g。将其分别置于 100ml 具塞磨口锥形瓶中，用移液管
5、精密加水 50ml，称定重量为：生品部分 150.3g，醋炙部分 142.0g，将其置于超声仪中超声 30min，称重，加水补足失重，摇匀，滤纸滤过，用 25ml 移液管精密移取续滤液 25ml，置于蒸发皿中蒸干，残渣加水溶解，转移至 10ml 容量瓶中定容，分别吸取生品和对照品溶液若干，置于高速离心器中，以 12000r/min，离心 3 分钟，完毕后，各吸取至微量进样器中。2.2.4 测定法 分别精密吸取生品与对照品 10ul，注入 HPLC，测定，即得。按干燥品计算，分别计算延胡索生品和醋炙品中延胡索乙素的百分含量。如表 1样品组 样品取样量（g ） 延胡索乙素含量（%）生延胡索 1.0
6、005 4.05%醋延胡索 1.0017 5.29%表 13 镇痛实验比较3.1 样品液的制备：称取延胡索生品及炮制品各 10g，水煎煮 1 次( 150ml 水) ，每次微沸30min，脱脂棉过滤，滤液浓缩至 40mL，备用。 （每毫升含有 0.25g 药物）3.2 实验方法：化学刺激法-扭体法 : 取健康雄性 6 只小白鼠，体重 18 34g ，随分为 3组，对照组灌服等体积生理盐水，给药组分别灌以生品、醋煮延胡索水煎液 0. 6mL/只，40min 后，各鼠腹腔注射 O. 7%醋酸 0. 1mL/10g【3】 ，观察并记录 15min 内小鼠产生扭体反应的次数( 见表 2)，延胡索不同炮
7、制品镇痛作用结果与生理盐水组比较镇痛效果（见表 3） 。组号组别1 2 3 4 5 6 7 8对照组17 25 17 33 24 10 13 1713 7 22 7 8 15 14 22生延胡索组9 8 8 8 3 11 5 411 9 8 14 19 6 7 8醋延胡索组7 7 16 18 3 6 0 08 8 14 38 10 5 5 0表 2样品组 给药剂量ml/只数量（n） 0-15min平均扭体次数对照组 0.6 16 16.50003.2917生延胡索组 0.6 16 8.62500.9406醋延胡索组 0.6 16 9.06255.8975表 3（粗炙组与对照组比较,P0.05;
8、 ） 4 讨论4.1 延胡索是临床常用活血止痛中药，延胡索含多种生物碱，其中主要含延胡索甲素、乙素、及丑素等生物碱成分，这些生物碱为镇痛的主要成分。这些生物碱多为游离生物碱难溶于水，醋具酸性主要成分为醋酸，延胡索醋制可使所含的游离性生物碱与醋酸结合生成易溶于水的醋酸盐，提高延胡索生物碱和延胡索乙素的煎出量。镇痛实验表明，醋炙品与生品差异不大，可能是由于实验失误等原因造成。 4.2 延胡索炮制品的总生物碱含量分别为醋炙 生品。4.3 本实验亦有不合理之处，一是在做醋炙品与生品中延胡索乙素的含量测定中，提取的操作步骤是先定容，然后再放置于高速离心机中高速离心，这样会有沉淀物产生，影响实验结果，会使得实验结果偏大。二是在做小鼠的镇痛实验过程中，我们只是粗略的按照每只老鼠 0.6ml 的水煎液灌胃的，排除了小鼠体重对实验结果准确性的影响，故而本来生品组与醋炙品组应该有显著性差异的，导致了现在实验结果生品组与醋炙品组的实验结果不具有显著性差异。需要改进。参考文献：1 谢明. 延胡索醋制前后总生物碱含量测定及对小鼠的镇痛作用比较 J.海峡药学,2014,26(3):33-34.2 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典 M . 一部. 北京: 化学工业出版社, 2015: 品名目录 139- 140.3 陆兔林, 胡昌江. 中药炮制学实验M.北京市:中国医药科技出版社,2015:6365.
