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1、期刊文献咽拭子快速培养在肺炎支原体（MP）感染中的临床应用价值谢启武 时澄 汪海波【摘要】目的 评估咽拭子快速培养对早期诊断支原体感染的临床应用价值。方法 将 176 例患儿分成 A、B 两组，A 组 94 例，B 组 82 例，A 组为病程7d,B 组为病程7d；入院后两组中每个患儿均予以咽拭子 MP 培养及血 MP-IgM 检测，比较每组两种检查阳性率有无差异。结果 A 组中咽拭子培养（+）且血 MP-IgM（ -）为 21 例，咽拭子培养（-）且血 MP-IgM（+）为 7 例，x 2=6.0357，p0.05，差异有统计学意义，咽拭子 MP 培养阳性率明显高于血 MP-IgM；B 组中
2、 x2=0.1904，p0.05，差异无统计学意义。结论 咽拭子快速培养对肺炎支原体感染的早期诊断有一定临床应用价值，方法简单，创伤小，值得在临床推广。【关键词】 咽拭子 肺炎支原体 快速培养Throat swab rapid culture of Mycoplasma pneumoniae infection in the clinical application value.Xie Qiwu , Shi Ceng,Wang haiboDepartment of Pediatrics, Tongling Maternal and Child Health Hospital， Tongling
3、 244000 ， Anhui【Abstract】Objective Assessment of throat swab rapid culture for early diagnosis of Mycoplasma pneumoniae infection in clinical application value. Methods The 176 cases of children were divided into A、B groups, A group of 94 cases, B group of 82 cases, A group for the duration of 7d, B
4、 group for the duration of 7d；Each of the two groups after admission was received throat swab culture and blood MP-IgM test, and the difference of positive rate were compared from the results of the two grops. Results From A group throat swab culture(+) and blood MP-IgM (-) were 21 cases, throat swa
5、b culture(-) and blood MP-IgM (+) were 7 cases, with statistical difference(x2=6.0357 ,P0.05). The positive rate of throat swab culture was prominently higher than the later；There was no statistical difference in group B(x2=0.1904 ,P0.05). Conclusion Throat swab rapid culture for early diagnosis of
6、Mycoplasma pneumoniae infection has certain clinical value and the method is simple, less invasive and should be worthy of recommendation for wider use in clinic. 【Key words】Throat swab； Mycoplasma pneumoniae；Rapid culture近年来，肺炎支原体(MP)感染率呈逐年上升趋势，发病年龄趋小，临床表现多种多样，且很难与病毒、细菌等其它病原微生物感染相鉴别。而血 MP-IgM 产生较晚，
7、不利于疾病早期诊断，因此寻找一种 MP 感染的早期实验室诊断标准显得尤为重要。本科室最近引进肺炎支原体快速鉴定培养试剂盒，现将 2011 年 5 月12 月收治的 176 例患儿同时进行了咽拭子 MP 培养和血 MP-IgM 检测，现将结果分析如下：1 资料与方法1.1 临床资料与分组 176 例患儿中，男 98 例，女 78 例，年龄1 岁 38 例，13 岁 55 例，36 岁 54 例，6 岁 29 例。所有患儿入院前半个月均未使用过大环内酯类抗生素，平均病程（5.893.49）d，入院时的临床症状主要有：发烧、咳嗽喘息、心慌胸闷、皮疹、头痛抽搐、腹痛呕吐及关节痛等。将 176 例患儿分
8、成 A、 B 两组，A 组 94 例，B 组 82 例，A 组为病期刊文献程7d,B 组为病程7d，两组在性别、年龄、体重及临床表现等方面差异均无统计学意义（P0.05） 。1.2 方法与试剂 入院后两组中每个患儿均予以咽拭子 MP 培养及血 MP-IgM 检测。咽拭子MP 快速鉴定培养基试剂盒由潍坊市汉唐生物工程有限公司提供生产企业许可证编号：鲁食药监械生产许 20080087 号；注册证编号：鲁潍食药监械（准）字 2010 第 1400140 号。将无菌棉签在患儿的口腔咽喉部捻转数次，取出棉拭子将其放入已复温的试剂瓶内搅动数次，在瓶口处折断棉签柄，旋紧瓶盖，置 37恒温培养箱孵育 68h
9、即可。血 MP-IgM 检测（被动凝集法）试剂盒由日本富士瑞必欧株氏会社提供SERODIA-MYCO，注册证书编号：国食药监械（进）字 2009 第 3402832 号。1.2 判断标准 咽拭子培养基颜色由红色变为桔黄色或淡黄色且仍保持清澈透明为支原体（+）,培养基颜色不变色或虽变色但外观混浊为支原体（-） ；血 MP-IgM 检测：抗体滴度1:40 为（+） 。1.3 比较两组内阳性率有无差异 即各组内咽拭子 MP 培养（+）且血 MP-IgM（-）与咽拭子 MP培养（-）且血 MP-IgM（+）的例数差异有无统计学意义。1.4 统计学方法 采用 SPSS13.0V 统计学软件，行自身配对两
10、分类的 x2 检验。2 结果表 1 A 组咽拭子 MP 培养与血 MP-IgM 的比较（例）血 MP-IgM咽拭子 MP 培养 + - 合 计+-13 217 533460 合 计 20 74 94表 2 B 组咽拭子 MP 培养与血 MP-IgM 的比较（例）血 MP-IgM咽拭子 MP 培养 + - 合 计+-20 129 41 3250合 计 29 53 822.1 A 组中统计结果 x2= 6.0357，p0.05，差异有统计学意义，咽拭子 MP 培养的阳性率明显高于血 MP-IgM(见表 1)；期刊文献2.2 B 组中统计结果 x2=0.1904，p0.05，差异无统计学意义，尚不能
11、认为咽拭子 MP 培养和血 MP-IgM 的阳性率有差异(见表 2)。3 讨论肺炎支原体(MP)是介于细菌和病毒之间的已知能独立生活的最小病原微生物，无细胞壁，大小 125150nm，需要在含胆固醇的特殊培养基，接种后 10 天才能长出菌落，呈球状、杆状、丝状等多种形态，革兰氏染色阴性 【1】 。目前认为 MP 感染主要通过飞沫传播， ，MP 进入呼吸道后，利用它的神经氨酸受体与呼吸道黏膜上皮紧密附着，释放一种特异性的危害物质(氧自由基)过氧化氢，造成呼吸道黏膜上皮破坏，这是 MP 的主要致病方式 【2】 。MP 肺炎感染在非感染期间占小儿肺炎的 10%20%，流行年份可达 30%【3】 。每
12、隔 37 年发生一次区域性流行，持续时间可达 1 年。其流行特点之一是发病年龄趋小，儿童和婴幼儿感染率都有增加趋势 【 4】 。近年来发现 MP 感染在儿科除了引起呼吸道病变外，还可以引起多系统损伤，我国有关报道 MP 感染肺外脏器受累达 52.35%【5】 。且较多患儿以肺外症状为首发表现，极易造成误诊，常在应用 -内酰胺类抗生素一段时间后无效，进一步检查后才考虑为 MP 感染所致，延误病情最佳治疗时机。因此 MP 感染的相关检测应成为儿科常规辅助检查之一，必须引起儿科临床医生的重视。目前临床上 MP 感染的最常用检查是血清冷凝集素(属 IgM 型)，大多滴度上升至 1：32或更高，阳性率
13、50%70%，病情愈重阳性率越高。冷凝集素大多于起病后第一周开始出现，至第 34 周达高峰，24 个月消失 【1】 。由于婴幼儿免疫系统尚未完全发育完善，部分免疫功能低下，MP 感染时抗体产生不足，并且 MP-IgM 阳性率受年龄、时间、B 细胞功能及敏感性等多因素影响，产生假阴性，影响检出率 【 6】 。发病 1 周后才是 MP-IgM 最佳检测时机，不利于临床早期诊断与治疗，且抗体在病原体消失后数周仍然存在，可能导致误诊 【7】 。此外临床上应用的聚合酶链反应(PCR)法以特异性引物通过 PCR 技术从患者呼吸道分泌物中检测 MP-DNA,敏感性和特异性高，对 MP 感染的早期诊断意义较大
14、，但 PCR 本身存在假阳性，操作复杂且对实验室的环境要求较高，并且需昂贵的仪器，检测费用亦较高，从而在一般实验室不能普及开展 【8】 。另外用病人的痰液或咽拭洗液培养支原体需要 23 周，因此对临床帮助不大。而 MP 快速鉴定培养基是一种有利于 MP 生长的条件培养基，培养基内含有葡萄糖、酚红、小牛血清及抑菌剂，MP 在生长繁殖时分解葡萄糖产生氢离子，使培养基的 PH 值下降，培养基内的酚红由红色变为黄色。一般在标本置恒温培养箱内(37)孵育 68h，期间就可取出观察并判定结果。标本中的其它细菌因培养基中加入的生物抑菌剂而被抑制，对结果影响甚微。笔者对 MP 快速鉴定培养基培养结果阳性患儿均
15、予以大环内酯类抗生素正规治疗，大多数取得了满意疗效，进一步证实 MP 快速鉴定培养法结果可靠，值得信赖，尤其对 MP 感染的早期诊断比血 MP-IgM 检测更加有临床参考价值。另外，MP 快速鉴定培养法简便快速，68h即可出结果，实验室条件要求不高，无需特殊仪器设备，且创伤小，易于被家长接受，值得期刊文献在临床尤其是基层医院推广。【参考文献】1 胡亚美，江载芳.诸福棠实用儿科学M.7 版.北京：人民卫生出版社，2002:1204-1205.2 吕蓉蓉.儿童肺炎支原体感染的研究进展J.中华儿科杂志,2011,7(5):58.3 沈晓明，王卫平.儿科学M.7 版.北京：人民卫生出版社，2008：208.4 宋世军，张旋，谢世营.儿童肺炎支原体抗体检测和肺炎支原体培养的对照研究J.中国优生与遗传杂志,2007,15(9):98-99.5 陈亚萍.肺炎支原体感染肺外表现 156 例J.临床肺科杂志，2007,12(4):374.6 刘宁.患儿肺炎支原体、衣原体诊断价值J.检验医学，2007,22(2):110-113.7 张国英，李鑫，徐卫平.肺炎支原体咽拭子培养法的临床应
