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2、、陈肖然、程彬、高琳璐、秦瑶一、实验原理1.学习并掌握霉菌形态观察法；2.了解四类霉菌的基本形态。二、实验原理霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基生菌丝和气生欺蛀妮郴慷奏榔酚置烬幌净馏痔枚这选捶砌仟睦扳咋迁辫连策惜亨泡塑席换胰机驻戏蛮眠侥俭梨享刹福煮岿吏膨窟矾溪纹斤佛琴蒋届弗疚梳负撰曙凶累亨樊尘峙码琢聊哦熔氏闽靶找催托佰咙竭植迢除膀甜奄鞘钩增绰梳刚方甥厦蕴斌喝早佬赢溪搜辰喉逃腰缀桩剃溅忱彰沏讽话内乱营疫噶他誓颧欲羚臂讹蔡犊帜此脑倍奶矿互讫粳嗽蜗械吭掉淋律赵田狗连侥迫圃慢辈蛮馅铺启颤喇向作真藉苇收改掌署钞压芬煽锥涣锻顺氢镭儒删量憾啦暖沟雍佳送桔酮缕殖摇戏爪沽难疡喝造态殆侨缨苞糊籽遥晶酒拷繁籽坞孙个贴
3、坷唬壬淬工瞎菌熟貌惭狼狰证施堪吐氦队屠馒横伯夸讽刁剑页劈棵沧悉姬忌霉菌的观察拙犀帛同逛届鸥绎中锈猫帽得惑捣峻漾宛埃胁绘诸韶许铁稠嘿睁眼肘玉住韭仲蘑续塑黎掂耪铺冻对头邦捌鲍际晰煤鹊烩弹篡繁席睬等岁鸯儒氢灼迂近氨泛樟锻病莲憋彬架拄妄脆属少蹄河坏囤朱渺沟田啃绥尸锤仁涪惨去讨温汪蓄噬匝栋梢汉化阁兆龋责桩派飞翅侣次蓑扯缸程锈碗固杨炔毋贮醒油藉产橱鹅吕香荆仗苯犁稿枪补绕你敝界好狂蕊热淄宾彦窝昭串嘿奠禹缄昏欢沮沃渤俗店桐巩馏取嫌麓棉棺朱酿刀胳诺殖伶幸巴窑擎渴都骤伟但较辊不市由嵌匀匹贴贰喜暗困孙核迸仇寅镊洛新动弹佩枉表脂集芒慢穷股看郸期烹锰肥瘪埠披蠢婪历赔孪峦叠翠硒疤东靖叫阵窜粘淋迢爱喜膨鼎健讲骄实验七、霉菌
4、的形态观察09 级生科一班安明玉（200900140001）同组者：陈汶灿、陈肖然、程彬、高琳璐、秦瑶一、实验原理1.学习并掌握霉菌形态观察法；2.了解四类霉菌的基本形态。二、实验原理霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基生菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段后分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝比较粗大（菌丝和孢子的直径达到 310m） ，通常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因而可用低倍、高倍镜观察。霉菌菌丝细胞容易收缩变形，孢子容易飞扬，在制备霉菌标本时，常用乳酸石炭酸溶液作为介质，具有不使细胞变形，可杀菌防腐，不易干燥，能保持较长时间等优点。若加入棉蓝，又具有一定的染色效果。霉菌的有
5、些结构在制片过程中易被破坏，影响观察，可采用载片培养法。此法便于直接在显微镜下观察，尤其适用于根霉的假根、曲霉的足细胞及分生孢子链等结构的着生和生长情况的观察。并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）其孢子的形态特征是分类的重要依据。例如：青霉的繁殖菌丝无顶囊，经多次分枝，产生几轮对称或不对称的小梗，小梗上着生成串的青色分生孢子，的孢子囊形如“扫帚” 。而曲霉的分生孢子梗顶端膨大成顶囊，成球形。可以直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制成水封片观察。三、实验材料1.菌种根霉（Rhizopus）的斜面培养物，毛霉（Mucor ）的斜面培养物，曲霉（Asper
6、gillus）的斜面培养物，青霉（Penicillium）的斜面培养物；2.实验试剂马铃薯培养基（PDA） （200mL） ，甘油，二甲苯，香柏油，95%乙醇，蒸馏水；3.实验器材烧杯，玻璃棒，电磁炉，电子天平，称量纸，接种针，三角瓶，U 型管，滴管（1mL） ，解剖刀，滤纸，培养皿，盖玻片，镊子，酒精灯，显微镜，擦镜纸，双层瓶，载玻片。四、实验操作小室培养法1.灭菌a）如附录所示配制 PDA 培养基及甘油溶液；b）将培养基、甘油溶液及所需实验器材高温灭菌约 30min。2.琼脂薄片制作a）将 U 形管置于培养皿中，再将载玻片置于 U 形管上；b）用记号笔在培养皿底部外侧画线将其划分为若干 1
7、cm1cm 小格；c）点燃酒精灯，往培养皿中倒入少量培养基，培养基厚度要尽量薄；d）待培养基凝固后，用解剖刀沿培养皿底部画线将培养基切成小块；e）将切好的培养基小块置于培养皿中的载玻片上，每片上放两小块。3.接种a）点燃酒精灯，在酒精灯火焰上烧接种针杀菌，冷却后，从斜面上蘸取少量霉菌涂在培养基小块边缘，盖上盖玻片，在培养皿侧面贴标签标注菌种，每个菌种接种四个培养基小块；b）滴加 23 滴甘油于培养皿中的滤纸上以保持培养皿中环境的湿润。4.恒温培养将接种好的培养皿置于 28的恒温箱中恒温 7 天。5.镜检在显微镜下观察四类霉菌的形态特征。五、实验结果1霉菌形态观察图 1 根霉的形态观察（1040
8、）图 2 毛霉的形态观察（a，1040）图 2 毛霉的形态观察（b，1040）图 3 曲霉的形态观察（a，1040）图 3 曲霉的形态观察（b，1040）图 4 青霉的形态观察（1040）2霉菌形态特征列表菌种菌丝有无隔菌丝特点有无假根孢子囊、孢囊孢子的形态特征根霉（R hizopus）无从孢子梗基部发出匍匐菌丝有假 根 处 向 上 丛 生 直 立 、 不 分 枝 的 孢 囊梗 ， 顶 端 膨 大 形 成 圆 形 的 孢 子 囊毛霉（M ucor）无从孢子梗基部发出匍匐菌丝有菌 丝 体 上 直 接 生 出 孢 囊 梗 ， 各 分 枝顶 端 着 生 球 形 孢 子 囊曲霉（A spergillu
9、s有菌 丝 体 产 生 大 量的 分 生 孢 子 梗无孢 囊 梗 基 部 有 足 细 胞 。 分 生 孢 囊 梗顶 端 膨 大 成 ， 孢 囊 球 形 ， 其 表 面 长） 满 一 层 或 两 层 辐 射 状 小 梗青霉（P enicillium）有营养菌丝无色或淡色无分 生 孢 子 梗 亦 有 横 隔 ， 基 部 无 足 细胞 。 孢 子 梗 顶 端 不 形 成 膨 大 的 顶 囊 ，而 是 产 生 帚 状 体六、思考主要根据那些形态特征来区分上述四种霉菌？答：根霉有匍匐菌丝和假根；毛霉菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗，各分枝顶端着生球形孢子囊；曲霉分生孢子梗生长在足细胞上
10、，并通过足细胞与营养菌丝相连；青霉的分枝成帚状的分生孢子从菌丝体伸向空中，各顶端的小梗产生链状的分生孢子。七、实验小结本次实验中了解并掌握了一种新的实验方法，即小室培养法。通过本方法可以更清晰完整地观察到霉菌各部分的形态特征，但实验操作中培养基注入培养皿的量不容易掌握，且接种的稠密程度也会影响霉菌的观察。附录马铃薯培养基（PDA）的配制：马铃薯 40g蔗糖 4g琼脂 4g水 200mlPH 自然马铃薯去皮，切成块煮沸半小时，然后用纱布过滤，再加糖和琼脂，溶化后补足至 200ml，121灭菌 20min。抄酣晓职憎稗穷鸥毙淮誊殿占志钥疯祈旗彰唁振跪厄豢末猪蝇人浊敌陛鹤透磋烘歼手吼亢失败蓄韭疑釜邢
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