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1、黑鲷（Acanthopagrus schlegeli）脂类与维生素 E 的营养生理研究【摘要】：黑鲷(Acanthopagrusschlegelf)属鲈形目、鲷科、鲷属,是亚洲各海区主要的海产经济鱼类之一,具有较高的经济价值。本论文的目的在于研究分析黑鲷脂类与维生素 E 的相关营养生理学参数,主要包括如下研究内容:1.饲料蛋白能量比对黑鲷幼鱼生长及体成分的影响取黑鲷(Acanthopagrusschlegeli)幼鱼 960 尾 ,体重 3.390.18g,以鱼粉和豆粕作为蛋白源,鱼油和豆油等比例混合油作为脂肪源,共配制 4 个蛋白水平(34%、38%、42%、46%),每一蛋白水平设 3 个
2、脂肪水平(10%、 13%、16%)的 12 种饲料,糖水平保持在 16%左右,饲料的蛋白能量比(P/E)在 96.76-136.21mg/kcal 之间。黑鲷幼鱼随机分成 12 组,每组设 2 重复,实验为期 42d。结果表明:对特定生长率(SGR)与饲料系数(FCR)的影响 ,以较高蛋白组 (38%、42%、46%)显著优于低蛋白组(34%)(P0.05),中脂肪、高脂肪组(13%、 16%)显著优于低脂肪组(10%)(P0.05);但各组饲料对成活率的影响无显著差异(P0.05)。当蛋白水平为 42%,脂肪水平为 16%时,黑鲷幼鱼获得最大特定生长率(3.20)、最高蛋白质效率(2.10
3、) 和最小饲料系数(1.14) 。全鱼脂肪含量随着饲料中脂肪水平的提高而逐渐升高。在同一饲料蛋白水平内,全鱼蛋白与灰分含量随着饲料脂肪水平的提高呈逐渐升高趋势。经统计分析,饲料中不同蛋白能量比显著影响黑鲷幼鱼生长(P0.05),饲料中脂肪有明显节约蛋白质的作用(P0.05)。由生长及体成分的实验结果得出,黑鲷幼鱼的最适饲料蛋白水平为 42%,最适蛋白能量比(P/E)为 110.37mg/kcal。2.黑鲷幼鱼的适宜维生素 E 需求研究了饲料中不同维生素 E 水平对黑鲷(Acanthopagrusschlegeli) 幼鱼生长,体组成、血液生化组成、肝脏抗氧化酶活性及类胰岛素生长因子 I(IGF
4、-I)mRNA 表达量的影响。以鱼粉和酪蛋白为蛋白原,以鱼油与大豆油等比例混合油为脂肪源,维生素 E 醋酸酯添加水平依次为0、50、100、200、300、400、800mg/kg 饲料,共配制 7 种等氮等能等脂的配合饲料。试验设 3 重复,投喂平均体重为 11.230.45g 的黑鲷幼鱼 9 周。结果显示,饲料中不同维生素 E 水平可显著影响黑鲷的生长(P 0.05)。当饲料中维生素 E 水平为 155.86mg/kg 时鱼的增重率达最大值。各组间饲料系数的变化与增重率具有相似的变化趋势。饲料中不同维生素 E 水平对各组黑鲷肝体比、肥满度及成活率均无显著性影响(P0.05)。肝脏与肌肉中维
5、生素 E 的含量随着饲料中维生素 E 添加量的增加逐步升高,而肝脏中丙二醛、血浆中胆固醇及甘油三酯含量则随着维生素 E 水平的增加均表现出明显的降低趋势。饲料中维生素 E 水平的提高降低了肝脏中超氧化物歧化酶酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT) 的活性,但饲料中维生素 E 含量在 42.5 至380.91mg/kg 内各组间 SOD 与 CAT 活性并无显著性差异(P0.05)。随着饲料中维生素 E 水平的提高,肝脏 IGF-ImRNA 表达量逐渐升高,当饲料中维生素 E 水平达到 155.86mg/kg 时,肝脏 IGF-ImRNA 表达量达最大值(9.882), 显著高于其它各组(P0.05
6、)。以上研究结果表明,饲料中的维生素 E 含量可显著影响黑鲷的生长性能。饲料中维生素E 的升高提高了肝脏的抗氧化能力、抑制了脂质过氧化反应,同时也提高了肝脏中 IGF-ImRNA 的表达量。以增重率为判定指标经折线模型分析得出,本试验条件下黑鲷幼鱼适宜的 -维生素 E 需求量约为139.27mg/kg。3.氧化鱼油对黑鲷幼鱼生长性能、脂质过氧化及肝脏组织形态的影响研究了饲料中添加氧化鱼油对黑鲷(Acanthopagrusschlegeli)幼鱼生长性能、脂质过氧化及肝组织结构的影响。分别以新鲜鱼油(过氧化物值 POV,1.27meqO_2kg(-1)油)与氧化酸败鱼油(POV,45meqO_2
7、kg(-1)油)为脂肪源配制等蛋等能的两种配合饲料,投喂平均体重 18.9g 的黑鲷幼鱼 9 周。结果显示,氧化鱼油显著降低了黑鲷幼鱼的增重率(WG)、饲料效率(FE)及蛋白质效率(PER)(P0.05)。饲料中添加氧化鱼油导致鱼体蛋白质含量极显著降低(P 0.01)、肝脏与肌肉中脂肪含量显著升高(P 0.05),而对鱼体、肝脏及肌肉中的水分及灰分含量无显著影响(P0.05)。氧化鱼油组肝脏中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量显著高于对照组 ,而维生素E 含量则显著低于对照组(P0.05)。饲料中添加氧化鱼油显著影响黑鲷肝脏内主要抗氧化酶活性,氧化鱼油组肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢
8、酶(CAT)活性显著高于对照组(P0.05);组织学结果显示氧化鱼油组肝脏出现明显病变,细胞核多集中在肝细胞边缘,肝细胞变大。统计分析表明,氧化酸败油脂显著降低了黑鲷的生长性能,加重了组织中脂质过氧化的程度,并会导致肝脏组织发生一定的病变。4.氧化鱼油饲料中添加 VE 对黑鲷幼鱼生长和生化指标的影响研究了氧化鱼油饲料中添加维生素 E 对黑鲷(Acanthopagrusschlegeli) 幼鱼生长、脂质过氧化、血浆生化成分、肝脏抗氧化酶活力及脂肪酸组成的影响。分别以新鲜鱼油(FL)与氧化鱼油(OL)为脂肪源配制两种基础饲料。在以氧化鱼油为脂肪源的基础饲料中分别依次添加0、100、300、700
9、 和 1500mg 的 -维生素 E 醋酸酯,共配制六种配合饲料。试验设三重复,为期 9 周。结果显示,饲料中氧化鱼油显著降低了增重率与成活率,同时导致肝体指数显著升高(P0.05)。然而,维生素 E 的添加显著促进了黑鲷的生长,并提高了肝脏中维生素 E 的积累量。饲料中添加维生素 E 可以显著降低全鱼的脂肪含量(P0.05),而对肝脏与肌肉中脂肪含量并未有显著的影响(P0.05)。维生素 E 的添加降低了血清中胆固醇及甘油三酯的含量,但两者在不同维生素 E添加组间并无显著性差异(P0.05)。饲料中添加维生素 E 可以显著降低肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽-硫-
10、转移酶(GST)活性(P0.05),并且 SOD、CAT 活性随着饲料中维生素E 添加量的增加呈下降趋势,但维生素 E 对谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)与谷胱甘肽还原酶(GR)活性并未产生显著性影响(P0.05)。饲料中氧化鱼油导致肝脏丙二醛及二十二碳六稀酸(DHA)含量显著升高(P 0.05),而维生素 E 的添加则使两者的含量均不同程度的降低。分析得出,在本试验条件下,饲料中添加100mg 的 -维生素 E 醋酸酯可以起到促进鱼体生长与降低组织中脂质过氧化的效果。5.饲料中 n-3HUFA 与 VE 水平对黑鲷幼鱼生长及机体生化指标的影响研究了饲料中不同 n-3HUFA 与 VE 水平
11、对黑鲷 (Acanthopagrusschlegeli)幼鱼生长、鱼体营养成分、肝脏及血浆中主要生化指标的影响。以鱼粉和豆粕为蛋白源,以不同比例混合的鱼油和椰子油为脂肪源配制基础饲料。分别设 4 个 n-3HUFA 水平,在每个 HUFA 水平下各设 3 个VE 水平共配制 12 种饲料。以饲料中鱼油与椰子油的不同比例调节饲料中的 HUFA 水平,而在每个 HUFA 水平下,维生素 E 醋酸酯的添加量设为 0mg(低) 、200mg( 中) 与 600mg/kg(高) 饲料。试验设三重复,投喂平均体重为 21.480.15g 的黑鲷幼鱼 9 周。结果显示,随着饲料中 n-3HUFA 水平的升高
12、 ,黑鲷增重率显著升高。低 VE 水平组中(饲料 3、4)黑鲷增重率均分别显著低于中高 VE 水平中相应 n-3HUFA水平的饲料组(饲料 7、8 与 11、12)(P0.05),但中高 VE 水平相应 n-3HUFA 饲料组间 (饲料 5-8 与 9-12)黑鲷的增重率并无显著性差异(P0.05)。各组间饲料系数的变化与增重率的变化趋势基本一致。饲料中 n-3HUFA 与 VE 水平对各组间肝体比、肥满度与成活率的影响并不具有显著性(P0.05)。随着饲料中 n-3HUFA 水平的升高全鱼与肌肉中脂肪含量呈现降低的趋势。肝脏中维生素 E 含量随着饲料中 n-3HUFA 水平的升高显著降低 (
13、P0.05)(低维生素 E 组除外), 而MDA 含量则显著升高(P0.05),但在中高维生素 E 组中,相同 n-3HUFA 水平下肝脏中 MDA 含量并无显著性差异(P0.05)。多不饱和脂肪酸总量随着饲料中 n-3HUFA 水平的升高呈显著性的升高(P0.05)( 低维生素 E 组除外) 。此外,随着饲料中 VE 水平的升高,肝脏中多不饱和脂肪酸(PUFA)及 n-3HUFA 含量均呈现出升高的趋势。饲料中 n-3HUFA 水平的升高增加了黑鲷对维生素 E 需求量的增加,且饲料中 n-3HUFA 与 VE 水平对肝脏中维生素E、EPA、DHA、PUFA 及 n-3HUFA 含量具有显著的
14、协同作用(P0.05)。随着饲料中 n-3HUFA 水平的升高,血浆中胆固醇、甘油三酯及高低密度脂蛋白含量均呈升高趋势,而饲料维生素 E 含量的升高对血浆中胆固醇与甘油三酯含量并无显著性的影响(P0.05)。饲料中 n-3HUFA 水平对血浆 SOD 与 CAT 活性并无显著性的影响(P0.05),而饲料中 VE 水平的提高则显著性降低了血浆中 SOD 与CAT 的活性(P0.05),但在中高 VE 水平组间血浆中 SOD 与 CAT 活性并无显著性差异(P0.05)。分析得出,饲料中 n-3HUFA 与 VE 水平对黑鲷的生长性能具有明显的协同作用,在本试验条件下,当饲料中维生素 E 水平达
15、 130mg/kg 左右,n-3HUFA 水平达 12%左右(占总脂) 时黑鲷幼鱼可以得到较好的生长效果。6.饲料中高比例的植物油对黑鲷幼鱼生长、生化组成及抗氧化能力的影响研究了单一植物油(大豆油)与混合植物油( 大豆油:菜籽油:亚麻籽油=1:3:6)对黑鲷(Acanthopagrusschlegeli)幼鱼生长、生化成分及抗氧化能力的影响。以鱼粉与豆粕为蛋白源,分别以全鱼油(FO) 、鱼油: 大豆油(2:3)(60SO)、鱼油:大豆油(1:4)(80SO)、全大豆油(100SO)、鱼油:混合植物油(2:3)(60Mix)、鱼油:混合植物油(1:4)(80Mix) 、全混合植物油 (100Mi
16、x)配制了等氮等能的 7 种配合饲料。每组设三重复,投喂平均体重20.260.22g 的黑鲷 9 周。结果显示,当饲料中植物油替代鱼油 60%时可获得较高的增重率。然而,当替代水平达 80%时,鱼体增重率有所降低,但并无显著性。80Mix 与 100Mix 组的增重率均分别高于 80SO与 100SO 饲料组。尽管随着鱼油替代水平的提高,肝脏中脂肪含量有升高趋势,但各试验组间肝体指数、饲料系数、全鱼与肝脏中营养成分并无显著性差异。饲料中植物油脂的添加提高了肝脏中维生素 E的含量,同时降低了肝脏中 MDA 与血浆中胆固醇的含量。添加植物油使肝脏中油酸与亚油酸含量显著升高(P0.05),但植物油的添加显著降低了肝脏中 DHA、EPA 含量及 n-3/n-6 比值(P0.05)。饲料中添加植物油降低了血浆中 SOD 与 CAT 的活性 ,且 SOD 与 CAT 活性的最低值均出现在替代水平为 60-80%之间。植物油虽未对肝脏中GSH 产
