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1、尿液生成的影响因素I. 实验目的：A. 学习膀胱插管技术和尿液的收集方法。B. 观察刺激迷走神经和注射生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素等药物对尿量以及对尿中某些成分的影响，分析这些因素的作用机制II. 实验材料：A. 实验对象：家兔，体重2.119kg，雌B. 实验药品：20%乌拉坦，利多卡因，生理盐水，200g/L葡萄糖，0.1g/L去甲肾上腺素，10g/L呋塞米（速尿），6g/L酚红，100g/LNaOH，班氏试剂C. 实验器材：生物信号采集处理系统、压力换能器、刺激电极手术器械一套（包括手术刀、粗剪刀、眼科剪、手术剪、镊子、止血钳、玻璃分针）、铁支架、纱布若干、动脉夹、兔手术台、膀胱插管、
2、动脉插管、注射器及针头、酒精灯、试管及试管夹等。III. 实验方法与步骤：A. 静脉麻醉从兔耳缘静脉注射20%乌拉坦5ml/kg。待家兔完全麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头。B. 颈部手术剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤56 cm，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露气管及与气管平行的右血管神经鞘，仔细分离出左侧颈总动脉，在血管下穿线备用，等完成了输尿管插管后再行动脉插管术。分离右侧鞘膜内的迷走神经，在神经下穿线备用。C. 腹部手术从耻骨联合向上沿中线作长约4cm 的切口，沿腹白线打开腹腔，将腹腔内的脏器翻出，暴露肾脏与膀胱位置。根据其位置与结构找到并分离输尿管，在输尿管近膀胱侧用线结扎，稍
3、等片刻，待输尿管略充盈后，用眼科剪剪一小口，向肾脏方向插入膀胱插管，结扎固定，收集尿液。用湿热的生理盐水纱布覆盖手术创口。D. 动脉插管进入血压实验项目，将压力换能器连接相应输入信号通道，并固定于铁支架上，其位置应与心脏在同一平面，调节信号参数，刺激电极接至电脑刺激输出端。将上面分离好的动脉实行动脉插管术，将动脉插管连接于换能器。静脉注射肝素，剂量为1ml/kg 体重，记录血压，收集记录尿量。E. 观察项目尿糖定性实验：试管内加1ml 班氏试剂，再加尿液2 滴，在酒精灯上加热煮沸，观察试剂和沉淀的颜色，如试剂的颜色由蓝色转为绿色或黄色或砖红色，均表示尿中有糖，只是含糖量有所不同，都称为尿糖实验
4、阳性，如不变色则为阴性。1. 连续记录正常动脉血压与尿量2. 耳缘静脉注射37 生理盐水18ml ，观察记录血压变化，连续记录尿量，取尿量最多时的数据，取两滴尿液做尿糖定性实验。3. 耳缘静脉注射5ml200g/L 葡萄糖，记录尿量变化。当尿量显著变化时，去流出的尿液2滴，做尿糖定性实验。4. 耳缘静脉注射去甲肾上腺素0.3ml，记录尿量变化。5. 以5mg/kg体重耳缘静脉注入 10g/L呋塞米，记录尿量变化。6. 耳缘静脉注射6g/L 酚红0.5ml，用盛有100g/LNaOH溶液5ml的培养皿收集尿液，计算从注射酚红其到尿中出现酚红所需的时间。7. 分别用强度5V 、8V、 10V，频率
5、30Hz，波宽2ms的电脉冲间断刺激右侧颈迷走神经的末梢端1min，记录尿量。IV. 实验结果：尿糖定性实验结果表：混合液现象 -记录符号 含糖量混合液呈蓝色或蓝灰色 - 0.02g100mL出现浅黄绿色沉淀 + (0.10.5g) 100mL出现黄绿色沉淀 + (0.51.4g) 100mL出现黄色沉淀 + (1.42.0g) 100mL出现橘黄色沉淀 + 2.0g100mLA. 静脉注射生理盐水后，收缩压不变，舒张压降低，平均血压降低，尿糖定性实验结果为+，5min尿量为400l, 较正常时的 5min尿量300l有少量增加。B. 静脉注射葡萄糖，收缩压与舒张压较正常增高，尿糖定性实验结果
6、为+， 5min尿量较正常减少为120l。C. 静脉注射去甲肾上腺素，收缩压与舒张压较正常增高，5min尿量较正常减少为80lD. 静脉注射呋塞米（速尿）,平均动脉压较正常高，5min 尿量远远多于正常为1450lE. 静脉注射酚红后4min在尿中出现酚红F. 分别用了5V、8V、10V电刺激迷走神经末梢端，平均动脉血压均不同程度的下降，分别为69.28、62.69、54.84（mmHg）,1min尿量也依次下降,分别为250、212 、200（l）下面是不同情况下平均动脉血压和尿量比较直方图与血压波形图：正常：生理盐水：葡萄糖：去甲肾上腺素：电刺激迷走神经:V. 实验讨论A. 快速静脉注射大
7、量生理盐水溶液，一方面增加了循环血量，增加肾血流量，另一方面血液得到稀释，使胶体渗透压降低，所以总的来说会引起肾有效滤过压上升而增加GFR，尿量增加。此时尿糖定性实验为+，可能是由于开始时尿中带有一部分血浆。B. 理论上来讲，快速静脉注射高渗葡萄糖也有两方面的影响，一是它提高了血浆的渗透压，是组织脱水，增加肾血流量，二是使血糖浓度超过肾糖阈，近曲小管对滤液中高浓度的葡萄糖超过了近端小管对糖的最大转运率，而使小管液中溶质浓度增加，阻碍了水和钠盐的重吸收，引起渗透性利尿作用，不仅使尿量增加，尿中还会出现糖。可是我们看到实验中的尿量却减少了，尿糖定性实验也不明显，可能是实验时葡萄糖注射出现问题。C.
8、 去甲肾上腺素可与入球和出球小动脉平滑肌中受体结合并使之收缩，入球小动脉收缩程度大于出球小动脉，这样肾小球毛细血管血压和血流量降低，尿量减少；也可激活-肾上腺素能受体，通过肾素-血管紧张素-醛固酮系统，促进水和钠盐的重吸收，从而使尿量减少；还可以直接刺激近端小管和髓袢对钠盐和水的重吸收。D. 呋塞米是一种高效利尿药，可以作用于髓袢升支粗段上皮细胞，抑制Na +K+2Cl-同向转运系统，减少Na+、Cl-和K+的再吸收，增高他们在肾小管液中的浓度，破坏此段尿液的稀释过程。同时，呋塞米使肾髓间质区高渗状态不能形成，而破坏了尿液的浓缩，最后排出等渗或低渗的尿液。在实验中，我们能够很明显看到尿量的增加
9、。E. 刺激迷走神经后，其将冲动传到中枢，抑制下丘脑-神经垂体系统释放ADH，因而有利尿的一面。可是迷走神其末梢释放的乙酰胆碱与心肌细胞膜上M 受体结合，能使心率减慢，心输出量减少，血压下降，使肾小球毛细血管压降低，有效滤过压减少，因而尿液生成减少。如果刺激迷走神经使血压下降至50mmHg，将会使有效滤过压降至零，而出现无尿。由实验我们可以看出后者起到了主要的作用。虽然我们在实验中看到尿量随刺激幅度加大而减少，可是却也远远大于正常尿量，可能是因为呋塞米的药效仍然有效的缘故。VI. 实验结论快速静脉注入大量生理盐水，高渗葡萄糖溶液，利尿药物如呋塞米会增加尿的生成；而电刺激迷走神经，静脉注入去甲肾上腺素则会抑制尿的生成。高渗葡萄糖溶液还会引起尿液中出现糖。
