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1、操作规程1出凝血 10.1 凝 血 因 子 VIII活 性 （ FVIII： C） 测 定 （ 第 四 版 ）出凝血 10.2 原理：凝血因子 VIII 活性是通过其纠正乏 VIII 因子血浆所致的凝固时间延长的能力而测得的。将稀释已知凝血因子 VIII 活性的血浆与乏VIII 因子血浆的混合物做部分凝血活酶时间（APTT）测定，建立参考曲线，该曲线能将受检者血浆的 APTT 值转化为 VIII 因子活性单位。受检者血浆与乏 VIII 因子的基质血浆混合，测其 APTT 值，将受检者血浆的测定结果在标准曲线上计算其凝血因子 VIII 的活性。出凝血 10.标本处理：患者处于休息状态下，采空腹静
2、脉血（急诊病人除外） 。采血者应技术熟练， “一针见血” ，以防止组织损伤，使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后，将血液沿管壁缓缓注入试管，避免产生气泡；然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡。全血要在 1 小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时，要在室温下3000rpm 离心 10 分钟，室温下可存放 4 小时。全部试验不能在 4 小时内完成，应将乏血小板血浆分装在 0.51.0ml 的小试管中快速冷冻，储存于-20冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果会不准确。冷冻血浆融化时，应将盛冷冻血浆的容器置于 37水浴中，并轻轻摇动，使
3、其迅速融化。标本在-20可保存 2 周。-70可保存 6 个月。操作规程2出凝血 10.试剂：试剂购于天津威士达公司1） APTT 试剂： 德灵 Actin 试剂（试剂盒代号 527165） 。每瓶试剂内含磷脂（从兔脑中提取） ，1.010 4mol/L 糅花酸，稳定剂；共 2ml。2） 乏 VIII 因子血浆（德灵，产品号 OTXW）3） 0.025 mol/L 氯化钙每瓶乏 VIII 因子血浆用蒸馏水 1ml 复溶。室温平衡 15min 后上机分析。复溶的乏 VIII 因子血浆分装为 0.1ml/支，-70可保存 60 天。实验前应 37快速解冻，轻轻颠倒混匀备用。出凝血 10.仪器：使用
4、 Sysmex 公司的 CA-7000 型全自动血液凝固仪。出凝血 10.操作：按仪器操作步骤执行标准操作。出凝血 10.1 开机：按下机器侧面的 POWER 按钮。开机后机器进行自检，当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。出凝血 10.2 检查消耗品：1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。（一次性最多可放 1000 个杯子）2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把试剂准备好，放到仪器内相应位置，注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时，可在主屏幕上选 Reagent Setting，按屏幕显示放置试剂。3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶操作规
5、程3出凝血 10.3 准备标本：将样本放入样本架，再将样本架放到仪器进样器上。出凝血 10.4 输入检测项目：主菜单上按下 Work List 键，进入工作菜单，输入 VIII 项目。出凝血 10.5 输入样本号： 按屏幕下菜单的 ID No.键，按顺序输入样本的序号。出凝血 10.6 开始检测：录入完所有测试信息，按下屏幕右上角START 键，开始检测。出凝血 10.7 计算：仪器自动计算出结果。出凝血 10.8 参考值：FVIII:C 50150% （或 0.51.5）出凝血 10.9 临床意义凝血因子 VIII 水平增高：见于高凝状态和血栓性疾病，尤其是静脉血栓形成性疾病，如 DVT、肺
6、栓塞、肾病综合征、口服避孕药、妊娠高血压综合征、恶性肿瘤、肝病等。凝血因子 VIII 水平降低：见于血友病甲，按其减低程度分：重型（2%） 、中型（2-5%） 、轻型（5-25%） 、亚临床型（25-45%） ；其次见于 VWD（I 型、II 型）和 DIC；抗 VIII:C 抗体所致获得性血友病甲较为少见。出凝血 10.10 参考文献：1） 主编王鸿利.止血与血栓检验技术.（第一版 1992.6）上海科学技术出版社.操作规程42） 主编李家增 王鸿利 韩忠朝.血液实验学.(第一版 1997.10)上海科学技术出版社.3） 主编邓家栋 杨崇礼 杨天楹.临床血液学.(第一版 1985)上海科学技术出版社.4） 主编邓家栋 杨天楹 杨崇礼.血液学实验诊断.(第一版 1985)天津出版社.5） 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第一版 1991）.东南大学出版社.
