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1、摘要题目 (题目：宋体, 三号字, 加粗, 居左)作者 1 , 通讯作者 2* (作者：宋体, 小四号字, 加粗)1 部门 1,单位 1, 地址 1,城市 1,国家 1; (单位地址：宋体 , 五号字 ,斜体 )2 部门 2, 单位 2, 地址 2, ,城市 2, 国家 2.摘要正文: 宋体，小四号字，行距 20 磅；其中，参考文献应用方括号和数字标注1 和2,3 关键词:宋体, 小四号字致谢: 宋体, 小四号字, 单倍行距参考文献:1姓名, 姓名 (年)文件名.杂志名, 卷期, 页码范围. (宋体， 小五号字, 单倍行距)2A.B. Smith, C.D. Brown (Year)File
2、name. Journal, Vol, Initial page. 页面设置：A4 纸张，距离上方 3 cm, 下方 3 cm, 左方 3 cm，右方 3 cm文件保存为 Word 格式*第一作者或通讯作者的 E-mail： 构建“转录因子-启动子”耦联载体开展植物生物碱次生代谢工程张磊 1，陈万生 2*1第二军医大学长征医院药学部 上海市凤阳路 415号 2000032 第二军医大学药学院生药学教研室 上海市国和路 325 号 200433萜类吲哚生物碱(Terpenoid Indol Alkaloid, TIAs)是一大类有着重要药用价值的植物生物碱。夹竹桃科长春花（Catharanthu
3、s roseus）可以合成多达百余种 TIAs，其中许多被广泛地作为药物应用。植物 TIAs 生物合成途径的研究已经相当深入。一种受茉莉酸甲酯诱导的植物转录调控因子 ORCA3，通过调控初级和次级代谢途径中的关键酶基因的表达来调节 TIAs 合成。通过构建传统的 35S 启动子植物表达载体，分别对转录因子ORCA3 和关键酶基因牻牛儿醇羟化酶(geraniol 10-hydroxylase, g10h)进行了单转和双基因共转化。结果显示在长春花中同时过量表达 orca3 和 g10h 不能取得最佳的含量提升效果。进一步通过基因融合(Gene fuse)技术，用带有甲基茉莉酸诱导响应元件（Jas
4、monate- and elicitor-responsive element, JERE）特异序列的异胡豆苷合成酶（strictosidine synthase, STR）启动子替换 g10h 野生型启动子，和 ORCA3 一起构成耦联植物表达载体转化长春花。实时定量 PCR 结果显示通过对 g10h 启动子的替换，ORCA3 可以通过作用于 JERE 调控 g10h 的表达。转化发根中目标产物长春碱的含量为 1.32 mg/g，是对照（0.33 mg/g）的 4 倍。阿玛碱的含量为 0.87 mg/g，是对照（0.23 mg/g）的 3.8 倍。但是长春质碱的含量（0.19 mg/g）仅为对照（0.25 mg/g）的 76%。本项目着眼于真核生物基因的表达调控以及转录因子和启动子的相互作用，针对植物次生代谢途径中的关键酶基因的启动子序列进行结构改造，使其受特定的转录因子调控，为克服合成途径中的限速步骤，提高目标化合物的产量提供了新的思路。关键词：代谢工程；基因修饰；转录因子；启动子；萜类吲哚生物碱*Email:
