大鼠抗小鼠整合素α5β1抗体的产生

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1、大鼠抗小鼠整合素 51 抗体的产生 要产生的抗体对小鼠整合素 51,免疫 Sprague-Dawley 大鼠,小鼠 51-Fc 融合蛋白,或从小鼠胎盘与亲和纯化的整合。从得到的杂交瘤的上清液进行了一些实验设计,以确定涵盖定义 volociximab 的特性,包括异源二聚体特异性,阻断活性,高亲和力 Fc 融合蛋白的结合,并结合到内皮细胞产生的抗体的克隆。超过 60 个克隆进行了筛选,这些功能特性。 选定抗体代表结合特性的范围内。这些包括 5,1 或 51 异二聚体的特异性抗体, 通过 ELISA确定,和跨接的相对亲合力的范围内和阻止 51 纤维连接蛋白的结合能力。有趣的是,一种抗体,321.1

2、 ,增加整合素结合的纤连蛋白,这表明它可能识别的配体诱导的结合位点(LIBS )。一般而言,大多数 5-1-和 51 异二聚体-特异性抗体确认整合素 51 在永生化的血管内皮细胞。两者合计这些测定确定了一些类似的抗体,该抗体在体外的 volociximab。交叉反应性检测Volociximab 不绑定到小鼠 51,在这个关键的功能表位小鼠和人类之间存在分歧。一些抗体的交叉反应性的人整合,包括大多数 5,异源二聚体的特异性抗体,所有这些测试绑定 1。的免疫组化分析,从人 51 阳性(MDA-MB-231 )和负极(C32)进一步证实的异种移植肿瘤的抗体交叉反应的人整合通过 ELISA 也这样做组织切片上的部分。517-2,该交叉反应通过 ELISA,例如,对肿瘤细胞结合的 51 阳性的 MDA-MB-231 异种移植中,和不 C32 异种移植肿瘤的细胞,但结合到小鼠 51 两个异种移植物的血管和基质上。抗体 339.1 上,另一方面,不交叉反应,用 ELISA 法对人类整合和不绑定的 MDA-MB-231 或 C32 的异种移植物中肿瘤细胞,但它识别小鼠的船只上 51 和基质。因此,代表面板的抗体,抗体结合人 51和那些不。

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