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1、- 1 -广东省天河区重点高中 2018 高考生物一轮复习专项检测试题 381.下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中 tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI 直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 （填字母代号） 。A.启动子 B. tet R C.复制原点 D. amp R（3）过程可采用的操作方法是 （填字母代号） 。A
2、.农杆菌转化法 B. 大肠杆菌转化法 C.显微注射法 D. 细胞融合（4）过程可采用的生物技术是 。（5）对早期胚胎进行切割，经过程可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 （填字母代号）技术。A.核酸分子杂交 B. 基因序列分析 C.抗原抗体杂交 D. PCR【答案】.（1） Hind和 BamH；氨苄青霉素（2） A（3） C（4） 胚胎移植技术（5） 全能（6） C【解析】I（1）据图，仅将人乳铁蛋白基因切割出来，需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BanHI 切割，右侧用 HindIII 切割。当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后，TET R基因被人乳
3、铁蛋白基因隔开，不是完整的，而 anpR基因是完整的，所以筛选含有重组载体的大肠肝菌首先需要字含氨苄青霉素的培养基上进行。 （2）基因表达的调控序列在启动子上。（3）将重组质粒导入动物细胞，常采用显微镜的方法。（4）过程的左侧是早期胚胎，右侧是代孕牛，过程采用的生物技术是胚胎移植。（5）将细胞培养为个体，利用了细胞的全能性。 - 2 -（6）检测目的基因在手提细胞中是否表达，常采用抗原-抗体杂交技术。2.红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然 EPO 来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（
4、rhEPO） ，其简要生产流程如右图。请回答： （ ）（1）图中所指的是 技术。（2）图中所指的物质是 ，所指的物质是 。（3）培养重组 CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。（4）检测 rhEPO 的体外活性需要抗 rhEPO 的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由 rhEPO 免疫过的小鼠 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。 （ ）【答案】 （10 分）（1）PCR（2）mRNA；rhEPO（3）培养液（4）杂交瘤3.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ）A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
5、B. 用 DNA 连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C. 将重组 DNA 分子导入原生质体D. 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞【答案】A【解析】本题考查基因工程的有关知识，基因工程的一般过程：用限制性核酸内切酶切割含目的基因的 DNA 分子（除草剂基因）和运载体（质粒） ，用 DNA 连接酶连接切割好的目的基因和运载体重组 DNA 分子导入受体细胞，因为是植物可以说是原生质体用相应的试剂和病原体帅选转基因细胞用植物组织培养技术抗除草剂的转基因烟草（表达） 。所以答案 A。4.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 l、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
6、（ ）- 3 -（1）一个图 1 所示的质粒分子经 Sma 切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。（2）若对图中质粒进行改造，插入的 Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。（3）用图中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，不能使用 Sma 切割，原因是 。（4）与只使用 EcoR I 相比较，使用 BamH 和 Hind 两种限制酶同时处理质粒、外源DNA 的优点在于可以防止 。 （ ）（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 （ ）（7）为了从 cDNA 文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力
7、的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。【答案】 （1）0、2（2）高（3）Sma会破坏质粒的抗性基因、外源 DNA 中的目的基因（4）质粒和含目的基因的外源 DNA 片段自身环化（5）DNA 连接（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞（7）蔗糖为唯一含碳营养物质【解析】本题考查基因工程的限制性内切酶的作用特点 （ ）（1）质粒切割前是双链环状 DNA 分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团。从图 1 可以看出，质粒上只含有一个 Sma的切点，因此被改酶切割后，质粒变为线性双链DNA 分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离
8、的磷酸基团。（2）由题目可知，Sma识别的 DNA 序列只有 G 和 C，而 G 和 C 之间可以形成三个氢键，A和 T 之间可以形成二个氢键，所以 Sma酶切位点越多，热稳定性就越高- 4 -（3）质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图 2 可知，标记基因和外源 DNA 目的基因中均含有 Sma酶切位点，都可以被 Sma破坏，故不能使用该酶剪切含有目的基因的 DNA（4）只使用 EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身连接物，而利用 BamH 和 Hind 剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA 连接酶连接时，不会产生自身连接产物。（
9、5）质粒和目的基因连接后获得重组质粒，该过程需要连接酶作用，故混合后加入 DNA 连接酶。（6）质粒上的抗性基因为标记基因，用于鉴别和筛选含有重组质粒的受体细胞。（7）将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作为唯一碳源的培养基进行培养受体细胞，含有重组质粒的细胞才能存活，不含有重组质粒的因不能获得碳源而死亡，从而达到筛选目的。5.下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶是两类常用的工具酶 C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有
10、利于筛选含重组 DNA 的细胞和促进目的基因的表达 【答案】D【解析】基因工程中目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物；常用的工具酶是限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶；人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，只有经过一定的物质激活以后，才有生物活性。载体上的抗性基因主要是有利于筛选含重组DNA 的细胞，不能促进目的基因的表达。所以 D 错误。6.人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为 RNA 病毒，该病毒表面的 A 蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：请回答：（1）过程代表的是 。（2）过程构建 A 基因表达载体时，
11、必须使用 和 两种工具酶。（3）过程采用的实验技术是 ，- 5 -获得的X 是 。（1） 对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。 （ ）【答案】 （1）逆（反）转录 （2）限制性核酸内切酶（限制酶、限制性内切酶） DNA 连接酶（两空可以互换） （3）细胞融合 杂交瘤细胞 （ ）（4） A 蛋白 核酸（基因）序列 抗 A 蛋白的单克隆抗体【解析】本题以图展示了疫苗的生产和单克隆抗体的制备的过程，考察了中心法则、基因工程、动物细胞工程等现代生物科技。（1）中
12、心法则中，对于少数的以 RNA 为遗传物质的病毒，其遗传信息的传递过程需要补充的过程有 RNA 的逆转录和 RNA 的复制的过程，图中过程正代表的是逆转录的过程 （ ）（2）基因工程的步骤是：目的基因的提取构建基因表达载体导入受体细胞目的基因的检测和表达，其中构建基因表达载体中需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过 DNA 连接酶连接目的基因和运载体。（3）过程是将瘤细胞与 B 淋巴细胞融合的过程，获得的叫杂交瘤细胞，其具备了瘤细胞的无限增殖的特性和 B 淋巴细胞的产生抗体的特性，从而制备单克隆抗体。（4）本题考察了免疫预防的操作过
13、程，以及欲确诊疑似患者而采取的方法。本题中提示该 RNA 病毒表面的 A 蛋白为主要的抗原，故而可选用通过基因工程生产的 A 蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的 RNA 病毒，可以进行核酸序列的比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗 A 蛋白的特异性单克隆抗体通过能否特异性结合判断病毒表面是否有 A 蛋白的存在进一步进行检测是否为目的 RNA 病毒。 （ ）7.大豆是两性花植物。下面是大豆某些性状的遗传实验：（1）大豆子叶颜色（BB 表现深绿；Bb 表现浅绿；bb 呈黄色，幼苗阶段死亡）和花叶病的抗性（由 R、r 基因控制）遗传的实验结果如下表：组合 母本 父本 F1的表现型
14、及植株数一 子叶深绿不抗病 子叶浅绿抗病 子叶深绿抗病 220 株；子叶浅绿抗病 217 株二 子叶深绿不抗病 子叶浅绿抗病子叶深绿抗病 110 株；子叶深绿不抗病 109 株；子叶浅绿抗病 108 株；子叶浅绿不抗病 113 株- 6 -组合一中父本的基因型是_，组合二中父本的基因型是_。用表中 F1的子叶浅绿抗病植株自交，在 F2的成熟植株中，表现型的种类有_ ， 其比例为_。 用子叶深绿与子叶浅绿植株杂交得 F1，F 1随机交配得到的 F2成熟群体中，B 基因的基因频率为_。将表中 F1的子叶浅绿抗病植株的花粉培养成单倍体植株，再将这些植株的叶肉细胞制成不同的原生质体。如要得到子叶深绿抗病植株，需要用_基因型的原生质体进行融合。请选用表中植物材料设计一个杂育种方案，要求在最短的时间内选育出纯合的子叶深绿抗病大豆材料。（2）有人试图利用细菌的抗病毒基因对不抗病大豆进行遗传改良，以获得抗病大豆品种。构建含外源抗病毒基因的重组 DNA 分子时，使用的酶有_。判断转基因大豆遗传改良成功的标准是_， 具体的检测方法_
