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1、加拿大一枝黄花提取物的抗氧化活性研究 沈校 王振兴 陈丽琼 关家怡 邹峥嵘 江西师范大学生命科学学院 江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室 西南林业大学轻工与食品工程学院 摘 要： 为进一步开发和利用加拿大一枝黄花 (Solidago canadensis L.) , 本研究采用氯化铝显色法和福林酚法测定加拿大一枝黄花乙醇提取物及其不同极性萃取物中的总黄酮和总酚的含量;以抗坏血酸 (Vitamin C, Vc) 和二丁基羟基甲苯 (BHT) 为阳性对照, 应用 2, 2-联氮-二 (3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸) 二铵盐 (ABTS) 、1, 1-二苯基苦基苯肼 (DPPH) 自由基清除体
2、系、铁离子还原能力 (FRAP) 法和抗氧化能力指数 (ORAC) 法研究其体外抗氧化活性。试验结果表明, 乙酸乙酯萃取物中的总黄酮 (202.45 mgg -1) 和总酚 (485.94 mgg -1) 含量最高, 且其抗氧化活性最强, 并强于阳性对照 Vc (P乙醇提取物正丁醇萃取物水层剩余物石油醚萃取物。由此可见, 乙酸乙酯萃取物中的总黄酮和总酚类化合物含量均是最高的。表 1 加拿大一枝黄花乙醇提取物及其不同极性萃取物总黄酮和总酚含量 Table 1 The total flavonoids and phenolic contents in various polarity parts
3、of Solidago canadensis L. 下载原表 表 1 加拿大一枝黄花乙醇提取物及其不同极性萃取物总黄酮和总酚含量 Table 1 The total flavonoids and phenolic contents in various polarity parts of Solidago canadensis L. 下载原表 2.2 加拿大一枝黄花乙醇提取物及其不同极性萃取物的抗氧化活性2.2.1 ABTS 自由基清除能力从图 1 可知, 加拿大一枝黄花乙醇提取物及其各萃取物对 ABTS 自由基均具有清除作用, 在一定范围内, 其浓度与清除率呈一定的量效关系。采用 Origi
4、n 8.6进行曲线拟合, 得到乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水层剩余物、Vc 和 BHT 的 IC50值分别为 0.059、0.055、0.159、0.129、0.022 和 0.021 mgm L, 由于石油醚萃取物的测试浓度偏低 (测试最高浓度为 1.357 mgm L, 其清除率为 11.00%) , 对 ABTS 自由基的清除能力相对较弱, 所以未能求得IC50值。IC 50值越小, 抗氧化能力越强, 因此清除 ABTS 自由基的能力由强到弱依次为 BHTVc乙酸乙酯萃取物乙醇提取物水层剩余物正丁醇萃取物, 这表明加拿大一枝黄花不同极性部位的抗氧化能力存在差异, 乙酸乙酯萃
5、取物的抗氧化能力最强, 且强于阳性对照 Vc (P乙酸乙酯萃取物BHT乙醇提取物正丁醇萃取物, 这表明加拿大一枝黄花不同极性部位的抗氧化能力存在差异, 乙酸乙酯萃取物的抗氧化能力最强, 强于 BHT (P0.05) 。加拿大一枝黄花正丁醇萃取物和水层剩余物对 ABTS 自由基和 DPPH 自由基表现出不同的清除能力, 这可能与加拿大一枝黄花抗氧化活性成分对不同自由基的敏感性及作用机理差异有关 (周凯等, 2015) 。图 2 加拿大一枝黄花乙醇提取物及其不同极性萃取物对 DPPH 自由基的清除效果 Fig.2 DPPH radical scavenging capacity in variou
6、s polarity parts of Solidago canadensis L. 下载原图2.2.3 铁离子还原能力FRAP 法是评价生物活性物质总抗氧化能力的方法, 在酸性条件下, Fe 与 TPTZ形成复合物 (Fe-TPTZ) , 在还原物质的作用下, 复合物被还原为二价铁而呈明显的蓝色, 其吸光度的变化与还原物质的含量呈比例关系, 在 593 nm 处有最大吸收, 结果常用 FRAP 值 (即 g 硫酸亚铁当量/mg) 表示, FRAP 值越大, 抗氧化能力越强 (周佳等, 2012;陈玉霞等, 2011) 。由图 3 可知, 加拿大一枝黄花乙醇提取物及其各萃取物对铁离子还原能力的
7、大小依次为 BHT乙酸乙酯萃取物Vc乙醇提取物正丁醇萃取物水层剩余物石油醚萃取物, 这表明乙酸乙酯萃取物比 Vc 的抗氧化能力强 (P乙酸乙酯萃取物Vc正丁醇萃取物水层剩余物乙醇提取物石油醚萃取物。ORAC 实验结果表明乙酸乙酯萃取物的抗氧化能力最强, 石油醚萃取物的抗氧化能力最弱, 这与 ABTS、DPPH 和 FRAP 实验所得的试验结果一致。图 4 加拿大一枝黄花乙醇提取物及其不同极性萃取物的抗氧化能力指数 Fig.4 The oxygen radical absorbance capacitiy in various polarity parts of Solidago canaden
8、sis L. 下载原图3. 结论与讨论研究表明, 自由基可以与细胞内的 DNA、蛋白质和多元不饱和脂肪酸 (PUFA) 作用, 造成 DNA 链断裂和氧化性损伤、蛋白蛋白交联、蛋白DNA 交联和脂质过氧化, 损害机体的细胞和组织, 影响功能, 引起各种病变 (崔剑等, 2000) 。现已有研究表明帕金森病、心脏病、肿瘤和老年痴呆症等疾病都与自由基有关 (Halliwell, 1993) 。植物中的多酚和黄酮等活性物质能够清除体内过剩的自由基。本试验结果显示加拿大一枝黄花乙醇提取物及其不同极性萃取物中均含有黄酮和酚类物质, 其中乙酸乙酯萃取物中的含量最高, 且其抗氧化能力最强, 并强于阳性对照
9、Vc (P0.05) 。加拿大一枝黄花为一种恶性的外来入侵物种, 在我国大肆繁殖生长, 对我国的农林生态系统产生了严重影响。对其进行开发利用是一种有效的防控手段, 利用加拿大一枝黄花乙酸乙酯萃取物消除自由基等的高抗氧化活性, 可将其进一步开发利用, 变废为宝。参考文献BENZIE IF, STRAIN JJ.1996.The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of“antioxidant power”:the FRAP assayJ.Anal Biochem, 239 (1) :70-76. CHEN YX, LIU J
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