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1、黑龙江八一农垦大学毕业论文（设计）学士学位毕业论文（设计）配方施肥对板蓝根的产量和多糖含量的影响学生姓名：董雪指导教师：高玉刚 教授所在学院：农学院专 业：农 学学 号：20094011339中 国 大 庆2013 年 6 月黑龙江八一农垦大学毕业论文（设计）目 录目 录 .I中文摘要 .III英文摘要 .IV前言 .V1. 材料与方法 .11. 1 材料 .11. 2 正交试验设计 .1 1. 3 板蓝根多糖的提取和含量测定 .1 1.3.1 标准曲线的绘制 .11.3.2 多糖的提取及精制 .2 1.3.3 换算因素测定 .2 1.3.4 样品测定 .2 2 结果与分析 .2 2. 1 试
2、验地土壤的基本养分情况分析 .2 2. 2 氮磷钾不同配比对板蓝根产量的影响 .2 2. 3 氮磷钾不同配比对板蓝根多糖的影响 .4 2.3.1 不同处理组合对板蓝根多糖含量的影响 .4 2.3.2 不同采收时间的板蓝根多糖含量的横向比较 . 5 2.3.3 氮磷钾不同配比对板蓝根产量与多糖含量影响的综合分析 .6 3 小结与讨论 . 6 参考文献 .7 致谢 .8黑龙江八一农垦大学毕业论文（设计）配方施肥对板蓝根产量和多糖含量的影响学生姓名：董雪 指导教师：高玉刚摘要：对不同配方施肥处理的板蓝根的产量及多糖含量进行分析,以确定板蓝根的最佳氮磷钾配比。采L 16( 43 )正交法设计,研究氮磷
3、钾不同配比对板蓝根产量的影响; 采用苯酚硫酸比色法对多糖含量进行测定。板蓝根产量最大和多糖含量最高的最优施肥配方是A 2B2C1,即尿素869.0 kg* hm- 2、过磷酸钙1428.6 kg* hm- 2、硫酸钾0 kg*hm- 2。磷肥能显著影响板蓝根的产量水平, 氮肥能显著影响板蓝根多糖的含量。关键词：板蓝根、正交设计、产量、多糖黑龙江八一农垦大学毕业论文（设计）IFertilization Banlangen production and polysaccharide contentStudent: Dongxue Teacher: Gaoyugang Abstract: Banla
4、ngen production and polysaccharide content of different formulations fertilization treatments were analyzed to determine the best ratios of N, P and Radix. Methods: L16 (43) orthogonal test design, Phosphorus and Potassium different proportions of Radix production; polysaccharide content was measure
5、d by phenol sulfuric acid method. The optimal fertilizer formula the Radix production and polysaccharide content is A2B2C1, 869.0 kg of urea * hm-2, of superphosphate 1428.6 kg* hm-2, potassium sulfate 0 kg hm-2. Phosphate fertilizer can significantly affect the level of production Radix, nitrogen f
6、ertilizer can significantly affect the content of the IRPS.Key words: Radix、orthogonal design、production、polysaccharides黑龙江八一农垦大学毕业论文（设计）II前言板蓝根为十字花科植物菘蓝Isatis ind igoticaFor.t 的干燥根 1 ,具有清热解毒、凉血利咽的功能。随着对板蓝根研究的不断深入, 用药量将继续增加,提高板蓝根产量和品质直接关系到生产的经济效益,从而影响到生产的发展, 因此,板蓝根的产量和成分研究一直受到人们的广泛关注。然而以往有关板蓝根的栽培研究多
7、着眼于传统经验性的栽培,没有进行田间试验的量化研究 2 。板蓝根多糖是其根中的主要活性成分之一, 已有报道可显著促进小鼠免疫功能 3 ；同时还可降低LPS刺激所致的NF2 B与DNA的结合活性升高 4 ,因此板蓝根多糖可以作为其质量控制指标之一。笔者对板蓝根进行了配方施肥试验, 以研究其对板蓝根产量和多糖含量的影响, 从而确定板蓝根的最佳氮磷钾配比，为优化氮、磷、钾肥的施用和获得高产高品质的板蓝根生产提供一定的理论依据。黑龙江八一农垦大学毕业论文（设计）- 0 -1. 材料与方法1. 1 材料多糖测定样品的采收: 于7 11月间隔30 d左右采样, 每1次采样5株。供试肥料: 尿素(含氮46%
8、 )、过磷酸钙(含磷按P2O5计为14% )、硫酸钾( 含钾按K2O 计为54% )。754分光光度计(上海第三分析仪器厂), 索氏提取器。葡萄糖( 105, 干燥至恒重) , 苯酚、硫酸为分析纯。1. 2 正交试验设计本试验是以尿素、过磷酸钙、硫酸钾为三要素的L 16(43)正交试验设计 56（表1），一共16个处理组合。小区面积为3-5 m 或1-2 m, 重复3次。施用方法, 苗高7 10cm间苗后,结合中耕除草将处理组合的肥料混合, 一次性施入行间。其他按文献 5的栽培技术进行田间管理。以后每月采样1次。检测指标: 根长、直径、鲜重、干重和产量,并将烘干至恒重的药材粉碎, 过60目筛,
9、 备用。 表1 试验因素水平 g/小区水平 A B C尿素 过磷酸钙 硫酸 1 0 0 02 365 600 234 3 457 900 312 4 548 1200 389 1. 3 板蓝根多糖的提取和含量测定板蓝根多糖的检测,将板蓝根粉末用石油醚、乙醚除去脂溶性杂质, 用80%乙醇提取除去所含单糖、低聚糖及苷类等干扰性成分后,再用水提醇沉法制得板蓝根多糖,并采用酚硫酸比色法对其多糖含量进行测定 7。1.3.1 标准曲线的绘制标准葡萄糖溶液的配制:精密称取干燥恒重的葡萄糖25.7mg,加适量水溶解, 转移至250mL黑龙江八一农垦大学毕业论文（设计）- 1 -量瓶中, 加水至刻度,摇匀, 配
10、成质量浓度为102. 8gm -1标准葡萄糖溶液备用。5%苯酚试剂的配制: 取苯酚7.5g, 加水150mL 溶解, 即配即用。标准曲线绘制: 精密量取葡萄糖标准溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7mL置干燥试管内, 分别加水使成1.0mL, 再分别加入5% 苯酚溶液1. 6mL,摇匀,再加H2SO47. 0mL,充分摇匀, 室温放置 25min,在490nm处测定其最大吸光度,以水为对照,以浓度为横坐标,吸收值为纵坐标得回归方程A = 0.0039+ 0.0656C, r= 0.9773( n = 3)。1.3.2 多糖的提取及精制取板蓝根洗净,晾干,精密称取粉末100
11、g,置索氏提取器中,依次用石油醚( 60 90 )、乙醚和80%乙醇回流提取各4 h，残渣挥干溶剂后,再继续以水回流提取4 h,浓缩至一半体积, 加入0.1% 活性炭,脱色,过滤,滤液加入95%乙醇使溶液含醇80% ,静置过夜,过滤,残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤,得板蓝根多糖,于60烘干备用。1.3.3 换算因素测定 精确称取60干燥恒重的板蓝根多糖20mg,水溶解后定容到100mL 量瓶中, 摇匀,作为多糖储备液。精确量取多糖储备液0.2mL, 加水至1mL, 按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式计算换算因素。f = W /CD,式中: W为多糖质量( g) ,C为多糖液中葡萄糖的质量浓度( g.mL- 1 ) ,D为多糖的稀释倍数。测得 f = 5.9699。1.3.4 样品测定 分别精确称取板蓝根粉末0.199, 0.200, 0.201g,用80%乙醇浸泡过夜 , 再用索氏提取器用80%乙醇回流2h,残渣挥去溶剂后,继续用水回流2h,反复洗至250mL量瓶中,定容,摇匀成为样品液。测定时,精确吸取样品液1mL,按测定标准曲线方法测其吸收值,按下式计
