《应用噬菌体7肽库筛选血型抗原A模拟多肽的研究（毕业设计-临床检验诊断学专业）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《应用噬菌体7肽库筛选血型抗原A模拟多肽的研究（毕业设计-临床检验诊断学专业）（39页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 分类号 学号 M200975207学校代码 10487 密级硕 士 学 位 论 文应 用 噬 菌 体 7 肽 库 筛 选 血 型 抗 原 A 模 拟多肽的研究学位申请人： 容宇学 科 专 业 ： 临床检验诊断学指 导 教 师 ： 胡丽华 教授答 辩 日 期 ： 2012 年 4 月 Dissertation for the Requirements of Degree of Master InMedicineSelection of Mimic Epitopes of Blood Group A Antigenwith High Affinity from Phage 7-mer Pepti
2、de LibraryCandidate : Rong, YuMajor : Clinical Laboratory DiagnositicsSupervisor : Prof. Hu, LihuaHuazhong University of Science and TechnologyWuhan, Hubei 430074, P. R. ChinaApril, 2012 独创性声明本 人 郑 重 声 明 ， 本 学 位 论 文 是 本 人 在 导 师 指 导 下 进 行 的 研 究 工 作 及 取 得 的 研 究 成果 的 总 结 。 尽 我 所 知 ， 除 文 中 已 经 标 明 引 用 的
3、 内 容 外 ， 本 论 文 不 包 含 任 何 其 他 个 人 或集 体 已 经 发 表 或 撰 写 过 的 研 究 成 果 。 对 本 文 的 研 究 做 出 贡 献 的 个 人 和 集 体 ， 均 已 在 文中 以 明 确 方 式 标 明 。 本 人 完 全 意 识 到 本 人 将 承 担 本 声 明 引 起 的 一 切 法 律 后 果 。学 位 论 文 作 者 签 名 ：日 期 ： 年 月 日学位论文版权使用授权书本 学 位 论 文 作 者 完 全 了 解 学 校 有 关 保 留 、 使 用 学 位 论 文 的 规 定 ， 即 ： 学 校 有 权 保留 并 向 国 家 有 关 部 门
4、或 机 构 送 交 论 文 的 复 印 件 和 电 子 版 ， 允 许 论 文 被 查 阅 和 借 阅 。 本人 授 权 华 中 科 技 大 学 可 以 将 本 学 位 论 文 的 全 部 或 部 分 内 容 编 入 有 关 数 据 库 进 行 检 索 ，可 以 采 用 影 印 、 缩 印 或 扫 描 等 复 制 手 段 保 存 和 汇 编 本 学 位 论 文 。， 在 _年 解 密 后 适 用 本 授 权 书 。保 密本 论 文 属 于不 保 密 。（ 请 在 以 上 方 框 内 打 “” ）学 位 论 文 作 者 签 名 ： 指 导 教 师 签 名 ：日 期 ： 年 月 日 日 期 ： 年
5、 月 日 目 录英文缩略词 . 1前 言 . 2中文摘要 . 6ABSTRACT . 8引言 . 10实验材料 . 10实验方法 . 13实验结果 . 18讨 论 . 21结 论 . 26综 述 . 27致 谢 . 35 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文英 文 缩 略 词英文缩写 中文全称 英文全称ELISA 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 enzyme-linked immunosorbent assayOD 光 密 度 optical densityTBS 三 羟 甲 基 氨 基 甲 烷 缓 冲 盐 tris buffered salinePBS 磷 酸 盐 缓 冲 液 ph
6、osphate buffered salinePEG 聚 乙 二 醇 polyethylene glycolTris 三 羟 甲 基 氨 基 甲 烷 2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediolBSA 牛 血 清 白 蛋 白 bovine serum albuminIPTG 异 丙 基 -D-硫 代 吡 喃 半 乳 糖 苷 Isopropyl -D-ThiogalactosideX-gal 5-溴 -4-氯 -3-吲 哚 -D-半 乳 糖 苷 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl -D-galactopyranosideEDTA 乙 二 胺
7、 四 乙 酸 ethylene diaminete traaceticacid1 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文前言糖 是 一 种 重 要 的 生 物 分 子 。 它 们 除 了 给 生 物 机 体 提 供 结 构 组 成 材 料 和 能 量 来 源 之外，还能与蛋白质以配体- 受体的形式结合，并与之介导细胞识别的过程 1 ，相对于其它 的 生 物 分 子 来 说 ， 碳 水 化 合 物 分 子 有 更 高 的 结 构 多 变 性 2 ， 这 使 得 它 们 非 常 适 合 担 当生物分子的识别任务。A 抗原，作为机体内的一种特殊的糖蛋白分子，是最重要的一种血 型 抗 原 ，
8、它 的 化 学 成 分 属 于 一 种 糖 蛋 白 ， 拥 有 低 聚 糖 链 结 构 （ GalNAc （ 1-3 ）(Fuc1-2)Gal） 的 抗 原 决 定 簇 ， 除 了 表 达 于 红 细 胞 表 面 之 外 ， 还 广 泛 表 达 于 多 种 组 织 细胞 表 面 ， 比 如 上 皮 细 胞 和 内 皮 细 胞 等 5 ， 在 器 官 移 植 过 程 中 ， 当 供 体 器 官 的 血 管 内 皮 细胞上表达的 A 抗 原 和 受 者 体 内 血 型 A 抗 体 特 异 性 结 合 之 后 即 可 激 活 补 体 ， 能 够 导 致 宿 主抗 移 植 物 超 急 性 排 斥 反
9、应 。 对 于 受 者 产 生 的 这 些 反 应 ， 各 个 器 官 移 植 中 心 将 采 用 一 些 术前 预 防 排 斥 反 应 的 方 法 以 及 术 后 的 一 些 处 理 措 施 ， 包 括 脾 切 除 ， 静 脉 输 注 免 疫 球 蛋 白 ，联合免疫抑制方法，免疫吸附法，血浆置换术等。降低受者体内抗 A 抗体浓度是成功移植 的 关 键 ， 目 前 的 主 要 采 用 方 法 是 用 特 异 性 免 疫 吸 附 柱 （ GlycoSorb ABO columns） 以 及联 合 免 疫 抑 制 2,6,7 的 清 除 法 ， 其 中 免 疫 吸 附 法 可 以 特 异 性 去
10、除 抗 A 抗 体 ， 而 且 副 作 用 小 。因为天然 A 抗原是由不同的基因编码多种酶而间接合成的，人工的基因工程方法有时候难以有效制备，因此现在在一些免疫吸附材料中应用的 A 抗原都是由化学合成的三糖基寡糖抗原 8可是 A 糖抗原合成昂贵，不容易被直接固相化，严重妨碍了 ABO 不相容移植进 一 步 的 研 究 和 推 广 ， 然 而 相 比 之 下 ， 运 用 具 有 A 抗 原 模 拟 作 用 的 多 肽 ， 则 不 仅 可 以 和糖抗原交叉地识别抗体，并且这种亲和力有时甚至可以超过天然的糖抗原 9，容易化学合 成 而 且 可 以 运 用 基 因 工 程 的 方 法 来 大 量 制
11、 备 。 这 样 就 可 以 有 效 地 解 决 全 球 存 在 的 移 植供 体 短 缺 的 问 题 ， 从 而 成 为 器 官 移 植 里 对 终 末 期 器 官 衰 竭 的 最 有 效 的 治 疗 方 法 ， 并 且 能够 避 免 ABO 不 相 容 器 官 移 植 导 致 的 排 斥 反 应 ， 而 这 种 排 斥 反 应 会 让 患 者 面 临 非 常 大 的 风险 ， 特 别 是 血 型 A 或者 B 糖 抗 原 的 特 异 性 抗 体 介 导 的 宿 主抗移 植 物 超 急 性 排 斥 反 应 。 这些 的 研 究 可 以 有 效 解 决 器 官 供 体 短 缺 现 状 ， 是 当 前 的 研 究 热 点 3,4
