《PLA―α―细辛脑纳米粒经鼻腔、静脉给药后药物动力学研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《PLA―α―细辛脑纳米粒经鼻腔、静脉给药后药物动力学研究（19页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、PLA细辛脑纳米粒经鼻腔、静脉给药后药物动力学研究摘要 采用乳化溶剂挥发法制备聚乳酸（PLA）-细辛脑纳米粒，并与静脉注射给药比较，研究 PLA-细辛脑纳米粒鼻腔给药后药物的体内分布及脑组织的靶向性。结果显示：鼻腔给药和静脉注射后的脑靶向系数分别为 1.65与 1.16，PLA-细辛脑纳米粒鼻腔给药后的绝对生物利用度为 74.2%，脑靶向效率为 142.24%，鼻-脑传递百分比为 29.83%。荧光标记法显示，PLA-细辛脑荧光纳米粒经鼻腔给药后，香豆素-6 在脑组织中的荧光强度最大，达到脑靶向给药的目的；PLA-细辛脑荧光纳米粒静脉注射给药后，香豆素-6 在肝组织中的荧光强度远高于鼻腔给药，
2、表明 PLA-细辛脑纳米粒经鼻腔给药可降低药物导致的肝毒性。此外，PLA-细辛脑荧光纳米粒经鼻腔给药后，香豆素-6 在肺组织中的荧光强度较弱，解决了气流粉碎法制备的 -细辛脑干粉经鼻腔给药到达肺部量较多的缺点。体内研究表明：与静脉注射相比，PLA-细辛脑纳米粒鼻腔给药后的脑靶向性优于静脉注射。 关键词 PLA-细辛脑纳米粒； 鼻腔； 药物动力学； 脑靶向 Abstract PLA-asarone nanoparticles were prepared by using organic solvent evaporation method， and their in vivo distribut
3、ion and brain targeting after intranasal administration were studied as compared with intravenous administration. The results showed that brain targeting coefficient of PLA-asarone nanoparticles after intranasal and intravenous administration was 1.65 and 1.16 respectively. The absolute bioavailabil
4、ity， brain-targeting efficiency and the percentage of nasal-brain delivery of PLA-asarone nanoparticles were 74.2%， 142.24 and 29.83%， respectively after intranasal administration. The results of fluorescence labeling showed that the fluorescent intensity of coumarin-6 in the brain tissue was the hi
5、ghest after intranasal administration of PLA-asarone fluorescent nanoparticles， achieving the purpose of brain-targeted drug delivery. The fluorescent intensity of coumarin-6 in liver tissue after intravenous administration of PLA-asarone nanoparticles was much higher than that after intranasal admi
6、nistration， indicating that intranasal administration of PLA-asarone nanoparticles could decrease drug-induced hepatotoxicity. In addition， the fluorescent intensity of coumarin-6 in lung tissue was weaker after intranasal administration， which solved the shortcomings of intranasal administration of
7、 -asarone dry powder prepared by airflow pulverization method. In vivo studies indicated that PLA-asarone nanoparticles after intranasal administration had a stronger brain targeting as compared with intravenous administration. Key words PLA-asarone nanoparticles； intranasal； pharmacokinetic； brain
8、targeting -?辛脑是天南星科植物石菖蒲 Acorus tatarinowii Schott的主要活性成分之一，研究报道：-细辛脑通过作用于 NO水平治疗阿尔茨海默病1，通过抑制海马神经元的活性及 -氨基丁酸（GABA）受体的表达2治疗癫痫，同时其可透过血脑屏障。因此，-细辛脑具有治疗中枢性神经系统疾病的前景。目前，-细辛脑主要有 2种给药方式，以胶囊剂或片剂的形式给药，生物利用度分别仅有2.73%，5.56%3；若采用静脉注射给药，由于 -细辛脑较高的脂溶性使其在制备过程中加入了吐温、丙二醇等助溶剂，而吐温、丙二醇等助溶剂又是导致细辛脑注射液过敏性休克等严重不良反应的重要原因之一4-
9、5。 纳米粒作为胶态药物载体具有小粒子的特征，可以穿过生物膜屏障，有的甚至可避免网状内皮系统吞噬，在不增加药物向血液转运的情况下可促进药物由鼻至脑的直接转运，从而提高药物的脑内浓度6-8。本课题组将 -细辛脑通过乳化溶剂挥发法将其制备成 PLA-细辛脑纳米粒，并对其进行了表征及鼻黏膜毒性的研究9。为评价药物在体内的靶向性，本研究采用与静脉注射对比的方式，进一步研究 PLA-细辛脑纳米粒鼻腔给药后 -细辛脑在体内的分布情况。 1 材料 SM-1000D 超声波细胞破碎仪（南京舜玛仪器设备有限公司） ；HJ-6A 六联数显控温磁力搅拌器（江苏金运市金城国胜实验仪器厂） ；-70 超低温冰箱（海尔）
10、 ；Allegra 64R高速冷冻离心机（美国贝克曼库尔特有限公司） ；I-6冷冻干燥机（Ehrisa 公司） ；LibrorAEL-40SM 1/10 万电子天平（岛津） ；微型移液器（Eppendor 公司） ；MTN-2000W氮气浓缩仪（奥特赛恩斯仪器有限公司） ；KQ3200 医用数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司） ；50 L 微量进样针（济南赛畅科学仪器有限公司） ；WH-90A 型微型混合器（上海亚荣生化仪器厂） ；E6/10-8G 型超细匀浆机（上海弗鲁克流体机械制造有限公司） ；ACQUITYTM UPLC 超高效液相色谱系统，XevoTM TQ 质谱系统（美国 Wa
11、ters公司） ； ACQUITYTM UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm100 mm，1.7 m，美国 Waters公司） ；CRi Maestro IN-VIVO Imaging System小动物活体成像系统（美国） 。 -细辛脑对照品（中国食品药品检定研究院，批号100298-201203） ；吲哚美辛对照品（中国食品药品检定研究院，批号 100258-200904） ；-细辛脑原料药（湖北艺康源化工有限公司，批号 130104，纯度98%） ；聚乳酸（PLA，相对分子质量 1万，批号 14011105，山东医疗器械研究所） ；聚乙烯醇 1788（polyvinyl alco
12、hol，PVA1788，上海阿拉丁试剂有限公司） ；香豆素-6（coumarin-6，Sigma-Aldrich） ；甲醇（色谱纯，Merck） ，冰醋酸（美国 ROE scientific INC.，HPLC） ，正丁醇（上海中试化工总公司，AR，20090423） ，水为重蒸水，丙酮、二氯甲烷为分析纯。 Sprague Dawley（SD）大鼠，体重 200250 g，雄性，SPF级（上海西普尔-必凯实验动物有限公司） ，许可证号SCXK（沪）2008-0016。大鼠饲养在 SPF级的环境下，温度1826 ，相对湿度 40%70%，12 h 光照/黑暗交替，实验前自由饮水饮食。 2 方法
13、2.1 PLA-细辛脑纳米粒制备 精密称取一定量 -细辛脑原料药和 PLA溶于 10 mL的有机溶剂（二氯甲烷-丙酮=91）中，配制成 PLA质量浓度为 14.76 g?L-1，-细辛脑药物质量浓度为 4.89 g?L-1的有机相，将有机相用注射器缓缓注入 20 mL不断搅拌的浓度为 1%的 PVA水溶液中，滴毕，继续搅拌 2 min后于超声波细胞破碎仪在 600 W功率下超声 4 min，磁力搅拌器搅拌 6 h以上挥去有机溶剂后，5 000 r?min-1 预离心 5 min除去沉淀，离心液再以 21 000 r?min-1离心 45 min得纳米粒沉淀，该沉淀用重蒸水洗涤 2次以除去 PV
14、A，适量水分散，冷冻干燥 48 h得粉末状样品。临用前使用重蒸水配成10 g?L-1及 50 mg?L-1的混悬液，分别供鼻腔给药及尾静脉注射。通过该方法制备得到的 PLA-细辛脑纳米粒平均粒径为 265.4 nm，PDI 指数 0.038，载药量 12.40%，包封率 55.86%。 2.2 PLA-细辛脑荧光纳米粒制备 参照 2.1项下方法，在 PLA-细辛脑荧光纳米粒制备过程中除有机相中加入 0.1%的香豆素-6，其他步骤同2.1。 2.3 给药方式与剂量 2.3.1 PLA-细辛脑荧光纳米粒血药动力学研究 12只 SD大鼠随机分成 2组，每组 6只，分别进行 PLA-细辛脑纳米粒鼻腔给
15、药及尾静脉注射。实验前禁食（不禁水）12 h。鼻腔给药方式如下：大鼠乙醚吸入麻醉后仰卧姿势放置，给药前将 40 L 质量浓度为 10 g?L-1PLA-细辛脑纳米粒混悬液吸入微量进样针，微量进样针前端套上塑料皮管对鼻腔进行保护，将微量进样针前端插入大鼠鼻腔，深度不超过 8 mm，2 个鼻孔分别给药 20 L，整个给药过程在麻醉后 1 min内完成。静脉给药方式如下：大鼠乙醚吸入麻醉后装入静脉注射笼，静脉注射器吸入约 0.8 mL质量浓度为 50 mg?L-1的 PLA-细辛脑纳米粒进行尾静?注射，所有大鼠平均给药剂量约为 1.6 mg?kg-1（该剂量是根据 -细辛脑纳米粒混悬液最大浓度以及大
16、鼠鼻腔液体给药量而定） ，该给药剂量也与文献10基本一致。 2.3.2 PLA-细辛脑荧光纳米粒脑药动力学研究 48只 SD大鼠随机分成 2组，每组 24只。给药方式与剂量同2.3.1，进行 PLA-细辛脑纳米粒静脉注射与鼻腔给药后脑药动力学研究。 2.3.3 PLA-细辛脑荧光纳米粒的药代动力学研究 24只 SD大鼠随机分成 2组，每组 12只。给药方式同2.3.1，根据香豆素-6 在纳米粒中的含量，将荧光纳米粒配制成适当的浓度供大鼠鼻腔给药和尾静脉注射（香豆素-6的含量为 10 g） 。 2.4 样品采集与处理 2.4.1 血药动力学研究样品采集与处理 鼻腔给药和尾静脉注射后分别于给药后1，3，5，10，15，30，45，60，90，120，180，240 min眼眶后静脉
