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1、- 1 -不同失血量对家兔血压及尿量的影响实验目的1、学习失血性休克的动物模型的复制方法;2、观察失血性休克后家兔的一般表现,动脉血压及尿量等生理指标的变化;3、掌握家兔麻醉、颈动脉及输尿管插管技术;4、通过输血输液,了解休克的补救原则:需多少,补多少。实验原理一次急性失血超过总血量 1/51/4 以上,可引起失血性休克。本实验通过对家兔大量放血,使其血容量急剧降低,复制出家兔失血性休克模型,观察失血性休克时血流动力学改变及微循环变化,探讨其发生机制。在大失血情况下,血容量减少,静脉回流不足,心排出量减少,血压显著下降,压力感受器(颈动脉体和主动脉弓)的负反馈调节冲动减弱,引起交感神经兴奋,N
2、E 分泌增多,全身血管广泛收缩,组织灌流量减少,但血压有所回升。同时也可使 ADH 释放增加,当 ADH 作用于血管平滑肌相应受体,引起血管滑肌收缩,它作用于远端小管、集合管,使肾重吸收水量增加,尿液减少,从而升高血压。实验对象家兔实验器材哺乳类动物手术器械,兔手术台,铁支架,Medlab 生物信号采集处理系统,压力换能器,记滴器,动脉导管,输尿管导管(或细塑料管) ,动脉夹,注射器,刻度烧杯,有色丝线,20%氨基甲酸乙酯溶液,1000/ml 肝素生理盐水,生理盐水实验方法与步骤1、动物麻醉与固定:用 20%氨基甲酸乙酯溶液按 5ml/kg 体重由兔耳缘静脉注射(或腹腔注射) ,待动物麻醉后,
3、取仰卧位固定于兔手术台上。2、备皮:剪去家兔颈部、腹部等手术部位的毛。 3、腹部手术:在耻骨联合上缘沿正中线向上切开皮肤 5cm,沿腹白线剪开腹壁和腹膜,找到膀胱,将膀胱慢慢向下翻转移出体外腹壁上。暴露膀胱三角,在膀胱底部找出两侧输尿管,并从周围组织中用玻璃分针细心分离一小段输尿管。- 2 -于输尿管下方穿两根丝线,将近膀胱端的输尿管用一丝线结扎,另一丝线备用。轻轻挑起输尿管,用眼科剪在结扎线上方的管壁处剪一小斜切口,将充满生理盐水的细塑料管向肾脏方向插入,结扎固定。再以同样方法插好另一端输尿管。两侧的细塑料插管可用 Y 形管连接,然后连到记滴器测定开始的尿量。记录完毕,用夹子关闭塑料管口。将
4、膀胱与脏器送回腹腔,用温生理盐水纱布覆盖在腹部创口上,以保持腹腔内温度。4、颈部手术:在颈部正中切开家兔皮肤约 57cm,分离气管、颈总动脉和右颈外静脉。(4.1) 切开颈部皮肤 :约 57cm,分离皮下组织及肌肉,暴露、分离颈部气管和血管神经鞘。用玻璃分针分离 23cm 长的两侧颈总动脉,各穿两线,将两线分别拉至动脉两端备用。用玻璃分针分离 23cm 长的右侧颈外静脉,穿两线,将两线分别拉至静脉两端备用。 (4.2) 右侧颈总动脉进行动脉插管:将分离出的右侧颈总动脉远心端用线结扎,近心端用动脉夹将动脉夹住。在远心端结扎线下方用眼科剪在动脉上作一小“V”形切口,将动脉插管朝心脏方向插入动脉,确
5、认插入动脉后用备用线将血管与插管结扎固定,再将结扎线固定于插管上,防止插管从血管中滑脱。同样方法进行左侧颈总动脉插管。为避免插管内血液凝固,动脉注射肝素。(4.3)右侧颈外静脉进行静脉插管:提起近心端的线,于血管充盈后结扎远心端,靠近结扎线处剪一小口,将已排完空气并与测中心静脉压和输液的装置相连的静脉插管插入右侧颈外静脉内 57 cm(可见液面随呼吸上下移动),并结扎、固定。(4.4)左侧颈总动脉进行动脉插管:将压力传感器的下方支管,通过输液管连接三通管,再连接动脉插管。记录动脉血压正常曲线。(4.5) 打开右侧颈总动脉动脉夹,少量放血于刻度烧杯(烧杯内需注入少量肝素) ,使血压降至 60mm
6、Hg,待血压稳定后,夹闭右颈总动脉,记录并观察血压变化并记录放血量,并用记滴器记录每分钟尿滴数或尿量。待血压、呼吸稳定后,再放血,使血压降至 40mmHg,在维持期间的 20min 内使血压维持在40mmHg 至到 45mmHg 范围内,记录并观察血压变化,放血总量以及尿量。5、抢救:将所放出的血液用 50ml 注射器从静脉缓缓回输。输血后,观察血压是否恢复正常。然后再输入生理盐水进行抢救,直至血压恢复正常。输血完毕后观察 30 min,每 10 min 记录 1 次各项观察指标变化。观察指标1、放血前,观察、记录指标:动物一般情况、动脉血压曲线、尿量2、放血造成休克松开右颈总动脉上的动脉夹,
7、预先在 500 ml 烧杯中加入肝素 2 mgkg,用于收集所放血液。血压降 60mmHg,血压稳定后,夹闭右颈总动脉,记录并观察- 3 -血压变化并记录放血量,并用记滴器记录每分钟尿滴数或尿量。待血压、呼吸稳定后,再放血,使血压降至 40mmHg,在维持期间的 20min 内使血压维持在40mmHg 至到 45mmHg 范围内,记录并观察血压变化,放血总量以及尿量。3、抢救:将所放出的血液用 50ml 注射器从静脉缓缓回输,输血完毕后观察 30 min,每 10 min 记录 1 次各项观察指标变化。注意事项1麻醉深浅要适度,麻醉过浅,动物疼痛可致神经源性休克。2尽量减少手术创伤引起出血。3
8、血压换能器和动脉导管要排除气泡和加入一定量肝素抗凝。【注:大出血的处理方法是尽快用纱布压迫出血部位并吸去创面血液,然后去除纱布,找到出血部位,用止血钳夹住出血血管及周围少量组织,用丝线结扎出血点。颈部大出血的第二位原因是颈总动脉插管结扎不紧造成漏血、插管滑脱和插管刺破血管壁出血,处理方法是重新结扎,或止血后重新插管。颈部大出血时出血迅速,但止血也相对容易,止血后一般仍能进行动物实验,故处理时不要惊慌,不要盲目用止血钳乱夹,应按照操作规程止血、处理。股动、股静脉手术大出血的原因大部分是由于分离股动脉时未注意分支,造成分支断裂或操作粗暴引起股动脉撕裂引起,少部分原因是由于分离动、静脉引起股静脉撕裂。出血发生后的处理应据情而定,如股动、静脉出血发生在较远端,可将出血部位暂时压迫止血,继续向近心端分离一段血管,然后按前述方法插入血管插管,让原出血点位于远端结扎线与血管插管之间,即可达到止血目的。如出血发生在近心端,插管已不可能,宜用止血钳夹住出血部位,结扎止血后,于对侧肢体分离血管。其余部位出血的处理与止述方法大致相似。 】