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1、原核细胞的基因结构 (补充内容）非编码区 非编码区编码区编码区上游 编码区下游与 止子 不编码蛋白质。：编码蛋白质 ,连续不间断编码区非编码区原核细胞的基因结构 调控遗传信息表达 ,上游有启动子，下游有终止子真核细胞的基因结构（补充内容）编码区非编码区 非编码区与 止子编码区上游 编码区下游真核细胞的基因结构编码区非编码区外显子：能编码蛋白质的序列内含子：不能编码蛋白质的序列： 有调控作用 ,上游有启动子，下游有终止子非编码序列： 包括非编码区和内含子原核细胞 真核细胞不同点 编码区是 _的 编码区是间隔的、 _的相同点都由能够编码蛋白质的 _和具有调控作用的 _区组成的原核细胞与真核细胞的基
2、因结构比较连续 不连续编码区非编码基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。基因操作的基本步骤一、目的基因的获取 将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。供体生物细胞取出 的基因的获取1、目的基因主要是指 _编码蛋白质的结构基因请举出三个以上的例子2、获取目的基因的常用方法（ 1）从基因文库中获取（ 2）利用 3）人工合成(1)从基因文库中获取目的基因什么是基因文库？什么是基因组文库？什么是部分基因文库？怎样从
3、基因文库中得到我们所需的目的基因？目的基因的有关信息与什么相联系？概念： 基因文库（ 因组文库部分基因文库 （如 含有某种生物不同基因的许多 导入受体菌的群体中储存 ,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因 ,称为基因文库 (因组文库 :基因文库中包含了一种生物所有的基因 ,这种基因文库叫做基因组文库 基因文库中包含了一种生物的一部分基因 ,这种基因文库叫做部分基因文库 基因文库如何构建？如果用某种生物发育的某个时期的 转录产生的多种互补 叫 段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，那么，这个受体菌群体就构成了这种生物的这种方法称 反转录法补 反转录法：基因重组反转录酶3） 如何从基因文库中得到
4、所需要的基因？依据：目的基因的有关信息。如：根据 基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物 特性。1、构建基因组 先应分离细胞的A、染色体 、线粒体 、 、目的基因可从基因文库中获得，下列有关基因文库的描述正确的是A、某生物的全套基因就是一个基因文库B、将含有某种生物不同的许多 入某个生物 体内，则这个生物就是一个基因文库C、含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库D、含有一种生物的一部分基因的基因文库叫 2）利用 聚合酶链式反应是一项生物 体外复制 特定 术 。通过此技术，可获取大量的目的基因。原理： 前提： 原料 方式 _方式扩增，即 _（ 数2种脱氧核苷酸；热稳定
5、 离子 过程 变性、退火、延伸三步曲变性： 加热至 90 95双链 火： 冷却至 55 60部分引物与模板的单链伸： 加热至 70 75以目的基因为模板，合成互补的新 遗传工程中，若有一个控制有利性状的 使其数量增多，可用 制时应给予的条件是双链 种脱氧核苷酸 四种核苷酸 热稳定 物 温度变化 恒温A BC D基因工程中，把选出的目的基因（共 1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是 460个）放入 代，那么， 3） 人工合成 根据已知的氨基酸序列合成 白质的氨基酸序列已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是A、化学合成法 B、基因组文库法C、 、聚合酶链反应2、下列获取目的基因
6、的方法中需要模板链的是从基因文库中获取目的基因 利用 反转录法 通过 B C D的基因主要是指 _的结构基因。获得目的基因的常见方法有三种：（ 1）从基因文库中获取目的基因，根据基因的 _序列，基因在_上的位置，基因的 _产物 因的 _产物蛋白质等获取目的基因。（ 2）利用技术是一项在 _完成的核酸合成技术，前提条件是有一段已知目的基因的_序列，以便于合成 _。（ 3）如果基因较小且核苷酸序列已知，可以通过 _方法。编码蛋白质核苷酸染色体 转录表达体外核苷酸 引物人工合成二、基因表达载体的构建 核心（ 1）用一定的 _切割质粒，使其出现一个切口，露出 _。（ 2）用 _切断目的基因，使其产生
7、_。（ 3）将切下的目的基因片段插入质粒的 _处，再加入适量 _，形成了一个重组组质粒）质粒目的基因 2、基因表达载体的作用a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给子代b、同时使目的基因能表达和发挥作用思考： 作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是：（ 1） 生物之间进行基因交流，只有使用 受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达；（ 2） 通过 将编码序列导入受体生物中无法转录；（ 3） 目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标
8、记；（ 4） 为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等；（ 5） 有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。们有什么作用？a、目的基因b、启动子c、终止子d、标记基因位于基因的首端 ,是终止转录检测目的基因是否导入受体细胞1、（多选）一个基因表达载体的构建应包括A目的基因 B启动子 C终止子 D标记基因列关于基因表达载体的叙述不正确的是A启动子是与 起始密码B启动子和终止子都是特殊结构的 记基因是为了鉴别受体细胞中是否有目的基因从而便于筛选D基因表达载体的构建视受
9、体细胞及导入方式不同而有所差别目前转基因工程可以A. 打破地理隔离但不能突破生殖隔离B. 打破生殖隔离但不能突破地理隔离C. 完全突破地理隔离和生殖隔离D. 部分突破地理隔离和生殖隔离C 常用的受体细胞：有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 将目的基因导入受体细胞的原理借鉴 细菌或病毒侵染细胞 的途径。三、将目的基因导入受体细胞1、 将目的基因导入植物细胞（ 1）农杆菌转化法特点 :能感染 双子叶植物 和 祼子植物 ,对单子叶植物无感染能力 T 物细胞插入 植物细胞染色 性状转入 农杆菌（ 2）基因枪法基因枪法又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的
10、表达载体 目的基因与其整合并表达的方法。（ 3）花粉通道法植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加 目的基因），使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。2、 将目的基因导入动物细胞方法 : 显微注射技术操作程序 :提纯含目的基因表达载体 取受精卵 显微注射 移植到子宫受精卵发育新性状动物3、 将目的基因导入微生物细胞常用法 ： 理常用菌 ：大肠杆菌微生物作受体细胞原因：繁殖快 、多为单细胞、遗传物质相对少过程：理大肠杆菌感受态细胞表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收因工程中科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为
11、受体细胞，原因是A结构简单、操作方便 B繁殖速度快C遗传物质含量少、简单 D性状稳定、变异少2、基因工程常用的受体细胞有大肠杆菌 枯草杆菌 支原体 动植物细胞A B C D因工程是在 基因操作的基本步骤中，目的基因导入受体细胞 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是将毒素蛋白质注射到棉受精卵中 将编码毒素蛋白的 将编码毒素蛋白的射到棉的子房并进入受精卵中 将编码毒素蛋白的 入细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养A B C D下列属于基因工程中导入目的基因方法的是农杆菌转化法 基因枪法 花粉管道法 显微注射法 胚胎移植 BC DC(四 )目的基因的检测与鉴定检测 导入检测：目的基因是否导入受体细胞方法 表达检测转录检测 分子杂交翻译检测 抗
