富集自体骨髓干细胞移植联合手术治疗骨折30例效果分析

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1、广西医学 2013年12月第35卷第12期 1623 富集自体骨髓干细胞移植联合手术治疗骨折3O例效果分析 罗 (广西科技大学第二附属医院骨科,柳州市 实 545006,Email:18007722708163com) 【摘要】 目的探讨富集自体骨髓干细胞移植联合手术治疗骨折的效果及对骨折术后延迟愈合或不愈 合的疗效。方法骨折患者60例,按随机数字表法分为治疗组和对照组各30例。对照组常规骨折切开复位、 内固定治疗,治疗组在对照组方法的基础上给予浓缩、富集自体骨髓干细胞移植治疗。比较两组治疗后骨折愈 合情况。结果治疗组术后(11753)周达到临床愈合标准,短于对照组的(15964)周(P005

2、),具有可比性。本研究经医学伦理委员会 批准,患者均签署知情同意书。 12治疗方法 121 手术方法:对照组按外伤性骨折常规切开复 位、内固定治疗。治疗组按外伤性骨折常规切开、复 位内固定治疗,在骨折内固定基本结束时,将浓缩、富 集的骨髓干细胞悬液注入骨折腔和(或)骨折线处, 常规闭合切口。两组患者术后按外伤性骨折常规治 疗。 122骨髓干细胞富集和提取:患者取俯卧位或侧 卧位,局部或硬膜外麻醉;常规消毒麻醉后,在髂前上 棘或髂后上棘部位用内径15 mm,长68 cm,带有 斜面的骨穿针,刺入松质骨,用20 IIl1注射器抽吸骨 髓。在抽吸的过程中,每次可将刺针斜面转动60。, 多方向多次抽吸

3、。完成一整圈抽吸后,再调节针深度 1015 cm,同样旋转方式抽吸骨髓。一个进针点 可有几个穿刺方向。每侧可抽吸6080 m1骨髓血。 Guangxi MedicaZ JournaZ,Dec2013,Vo135,No12 根据骨折部位骨髓腔大小,抽吸骨髓血60160 ml。 抽出的骨髓血置人肝素化无菌离心管中。利用密度 梯度离心原理,对采集的骨髓血进行细胞分选。速度 3 000 rrain,离心5 rain,获取淡黄层有核细胞(含骨 髓干细胞及对临床有用的血管生成活素和成骨细胞 活素)液,每150 ml骨髓血可浓缩干细胞液15 IIll,待 用。 13观察指标观察两组骨折临床愈合时间,骨折 延

4、迟愈合或骨不愈合的发生率。骨折临床愈合标准 参考实用骨科学中的相关标准 。 14统计学分析采用SPSS 131软件进行统计分 析,计量资料用( -t-s)表示,采用t检验,计数资料的 比较采用x 检验,以P005为差异有统计学意义。 2结果 21临床愈合时间治疗组术后914(117-t-53)周 达到临床愈合标准,短于对照组的l018(159-64) 周(=2768,P=O008)。 22骨折愈合情况治疗组骨折愈合29例(967), 延迟愈合1例(33),无骨不愈合发生;对照组骨折 愈合26例(867),延迟愈合3例(10O),骨不愈 合1例(33),治疗组骨折延迟愈合率低于对照组 (x =4

5、052,P=0042)。1例不愈合患者经再次手术 (接骨板固定改髓内钉内固定+植骨手术)治愈。 23 并发症治疗组均无髂骨穿刺处、骨折处感染 和组织坏死发生,但27例髂骨穿刺处出现轻度胀痛, 未作处理,35 d后症状自行缓解。对照组无明显并 发症。 3讨论 骨折愈合是一个复杂而连续的过程,但成骨的两 个主要阶段为膜性化骨和软骨化骨。前者主要由骨 膜、骨髓中的定向骨源性前体细胞增殖分化形成骨细 胞成骨,后者则由骨髓及骨折周围组织中的诱导骨祖 细胞增殖分化、经软骨细胞骨化形成骨痂_8。这两 种成骨方式都需要骨折局部血液循环和其中的生长 因子密切参与。然而一些骨折类型如胫骨骨折,由于 血液循环较差,

6、容易造成骨折愈合延迟或不愈合。目 前已知骨髓内有两大细胞系统,即造血细胞和基质细 胞系统,其中基质系统含有少量的定向骨源性前体细 胞和问充质干细胞。前者可以直接分化成骨细胞,后 者具有多向分化潜能,如分化为成骨细胞、成纤维细 胞、软骨细胞和神经元等,经定向诱导后间充质干细 广西医学 2013年12月第35卷第12期 胞可用于骨折治疗 J。有实验证实,发生骨折后,骨 折断端局部血液循环中一些特定的生长因子水平升 高,从而募集和诱导循环和骨髓中的干细胞到达断端 并分化成骨 。临床已发现骨髓穿刺能获得成骨前 体细胞,骨髓中还含有骨再生所需的多种生长因子, 国外多个机构已经将自体骨髓移植应用骨折不愈合

7、 及先天性假关节的治疗,并取得了较好的疗效 J。 目前国内已有骨髓干细胞移植治疗骨折的报告, 如郎良军等 应用外固定支架结合骨折端局部注射 自体骨髓多能干细胞治疗桡骨远端粉碎性骨折18 例,经随访615个月后,骨折愈合优良率为889, 未出现针道浅表感染等并发症。唐刚健等 对44例 新鲜颈中型股骨颈骨折患者行自体骨髓干细胞移植配 合牢固内固定技术治疗,结果发现患者治疗后第3个 月股骨颈骨折愈合38例(864),未愈合6例 (136)。然而,这些研究大都是采用直接抽取的骨 髓血注入骨折处,这种方法采集的干细胞浓度低,成骨 作用受到一定影响。如将骨髓干细胞进行浓缩再注入 骨折处,成骨作用将大大提高

8、 。本研究中,笔者将 抽取的自体骨髓血利用密度梯度离心原理进行细胞分 选,取得较高浓度的骨髓干细胞悬液;再将浓缩、富集 的骨髓干细胞移植到骨折断端,增加了骨折处的活性 物质,加强干细胞成骨作用,从而促进骨折早期愈合。 本文结果显示,治疗组术后(11753)周达到临床愈 合标准,短于对照组的(159-I-64)周(P005)。治 疗组骨折愈合29例(967),延迟愈合1例(33), 无骨不愈合发生;对照组骨折愈合26例(867),延 迟愈合3例(100),骨不愈合1例(33),治疗组 骨折延迟愈合率低于对照组(P005)。这说明白体 骨髓干细胞移植联合手术治疗骨折的临床疗效较好。 本文结果显示,

9、治疗组均无髂骨穿刺处、骨折处感染 和组织坏死发生,但27例骨折处移植骨髓干细胞后 局部出现胀痛,未作处理,35 d后症状自行缓解。 这说明富集自体骨髓干细胞移植对骨折术后骨折延 迟愈合或不愈合有较好的预防作用,而且其优势突 出,主要表现在自体骨髓干细胞来源丰富,可以反复 多次采集,且没有排斥反应,组织损伤小、操作简单、 无明显并发症,安全性好。笔者认为良好的固定是预 防骨折延迟愈合的前提条件。本文两组发生骨折延 迟愈合和不愈合的患者均为手术时固定效果不佳而 1625 导致的。这是由于骨折端固定不好会导致外部应力 干扰,从而妨碍诱导成骨过程,导致成骨障碍,影响骨 折愈合。此外,要注意即使采用了富

10、集骨髓移植,医 生仍然需消除其他阻碍骨折愈合的因素,如保证骨折 端良好的血液循环,对较大的骨缺损尚需与其他骨折 治疗方法结合使用,如髓内钉、外固定架等。在移植 自体骨髓到骨折断端时,要有在骨折断端的致密纤维 多点穿刺。当穿刺针接触到骨折断端时,针尖稍用力 扎、捅,使骨折断端尽量暴露,便于骨髓干细胞更好地 接触和附于骨折断面,促进骨折早期愈合。 参考文献 1Borrelli J Jr,Pfickeu WD,Ricei WMTreatment of nonun ions and osseous defects with bone graft and calcium sulfate JClin Or

11、thop Relat Res,2003,(411):245254 2刘勇,吴权,瞿懿,等经皮自体骨髓移植治疗骨 不连J医药论坛杂志,2012,33(12):97,99 3 赵洋,符伟国用骨髓间充质干细胞移植治疗下肢缺 血性疾病的研究进展J复旦学报(医学版),2008,35 (4):624628 4TateishiYuyama E,Matsubara H,Murohara T,et a1Them peutic angiogenesis for patients with limb ischaemia by an- tologous transplantation of bone-marrow c

12、eils:a pilot stuay and a randomised eonoHed trialJLancet,2002,360 (9 331):427435 5 郎良军,金红婷外固定支架加自体骨髓多能干细胞治 疗桡骨远端骨折J浙江中医药大学学报,2010,34 (3):710711 6唐刚健,靳嘉昌,杨斌,等自体骨髓干细胞移植治疗 新鲜颈中型股骨颈骨折临床研究J中国中医骨伤科 杂志,2012,20(7):12一l6 7胥少汀,葛宝丰,徐印坎实用骨科学M第3版北 京:人民军医出版社,2006:335337 8 常玉立,刘智,孙天胜,等骨不连及其干细胞移植疗 法的研究进展J感染、炎症、修复,2007,9(8): 182184 9梁雨田,张伯勋,卢世璧,等经皮自体骨髓移植治疗骨 折不愈合J中华骨科杂志,1999,19(12):709711 1O沈强,黄诗博,朱建国,等自体骨髓浓缩干细胞在治 疗股骨干骨折中的应用J中国民康医学杂志,2011, 23(12):1 4621 477 (收稿日期:20130715修回日期:20130909)

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