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1、叶绿体中色素的提取和分离 2005-3-201实验目的(1)初步掌握提取和分离高等植物叶绿体色素的方法。(2)了解叶绿体结构，验证叶绿体色素的种类和各种色素的颜色。2实验原理叶绿体中的色素分为两大类，一类为叶绿素，包括叶绿素 a(呈蓝绿色) 和叶绿素 b(呈黄绿色)，主要吸收太阳光中的红光和蓝紫光，另一类是类胡萝卜素，包括胡萝卜素( 呈橙黄色)和叶黄素( 呈黄色) ，主要吸收蓝紫光。色素吸收的光能用于光合作用。因为光合色素位于叶绿体的片层结构中，因此需要破坏叶绿体的结构，才能将色素释放出来。需要剪碎绿叶，并用二氧化硅研磨，用丙酮将色素溶解，来提取各种色素，同时加入碳酸钙，调节液体的 pH，以防
2、叶绿体色素被破坏。叶绿体色素溶于有机溶剂形成叶绿素液，利用四种色素在层析液中溶解度不同，因而随层析液在滤纸上扩散速度不同，使四种色素分离开来。其中，胡萝卜素在丙酮中溶解度最高，速度最快，叶黄素和叶绿素 a 次之叶绿素 b 溶解度最低扩散得最慢。3实验步骤及方法（1） 将 5g 新鲜的绿色菠菜叶片剪碎，放入研钵中，并加少量二氧化硅和碳酸钙，再加丙酮 2mL，快速充分地进行研磨。(2)将研磨液倒入小玻璃漏斗中进行过滤( 漏斗基部塞有少许脱脂棉)，将滤液收集到一个小试管中，用棉塞将试管口塞紧。(3)将一块预先进行过干燥处理的定性滤纸剪成 10 厘米长、 1 厘米宽的滤纸条。将滤纸条一端剪去两角。并在
3、距这端 1 厘米处用铅笔画一横线。(4)用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔处小心均匀地划出一条滤液细线( 越细，效果越好)。待滤线干燥后，再重复划 23 次。(；) 将 3mL 层析液倒人烧杯中，将滤纸条：画有滤液细线的一端朝下，微斜地靠着烧杯内壁轻轻插入到层析液中，注意不要使层析液没过滤纸上的滤液细线，然后用培养皿盖上烧杯。(6)几分钟后，会观察到滤纸条上从上到下依次出现四条色素带：胡萝卜素( 橙黄色)；叶黄素黄色) ；叶绿素 a(蓝绿色 )叶绿素 b(黄绿色)。4注意事项(1)层析时，滤液细线不能浸入层析液中。(2)色素见光易分解，实验后滤纸条应避光保存。5思维拓展(1)层析法是利用不同物质的
4、溶解性分离物质的方法。(2)利用纸层析法，将物质分离的同时。还可确定不同物质成分的比例、颜色。含量越多，层析带越宽；物质在层析液中的溶解度越大，溶解速度越快，在滤纸上的扩散速度越快，层析带位置越高。例 1做色素提取和分离实验的正确装置是图中 ( ) 答案D例 2在圆形滤纸的中央，滴上叶绿体的色素滤液进行色素分离，可看到近似同心环状的四个色素圈，排列在最外的一个呈 )A。蓝绿色 B。黄绿色 C黄色 D橙黄色 答案D例 3在做植物实验暗室内，为了尽可能地降低植物的光合作用的强度，最好用 ( )A。红光灯 B。绿光灯 C。白炽灯 D。蓝光灯 答案B例 4 下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中
5、，不属于实验要求的是 ( )A。提取高等植物叶绿体中的色素 B。用纸层析法分离色素C。验证叶绿体中所含色素的种类 D。了解各种色素的吸收光谱 答案一一 D例 5。 “叶绿体中色素的提取和分离实验”(1)在“叶绿体色素的提取和分离实验”中，将叶绿体色素进行分离的方法名称是： 。(2)某学生在实验过程中将划有滤液细线的滤纸条( 已重复几下划线)插入层析液，几分钟后取 出观察，发现在滤纸条上无色素分带现象，而其他用同一滤液做实验的同学的滤纸条上却色素分带明显，其实验失败的原因最可能是 (3)观察叶绿体色素的荧光现象，可将盛有叶绿体色素溶液的试管，让光线照射。如果置叶绿体色素溶液于 光下，则呈绿色；如
6、置于 光下，则溶液呈现红色。答：(1)纸层析法 (2)滤液细线浸入层析液，被层析液溶解 (3)透射 反射练习：D1下列不属于叶绿素功能的是 A.吸收太阳光能 B.利用光能使水分解C.利用光能合成 ATP D固定和还原二氧化碳C2在进行叶绿素提取和分离的实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是A.滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响结果B.滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散C.色素会溶解在层析液中而使结果不明显D.滤纸条上的几种色素会混合起来D3下列哪组色素是叶绿体和有色体都含有的A.叶绿素和类胡萝卜素 B.叶绿素和叶黄素C叶绿素和胡萝卜素 D叶黄素和胡萝卜素(D)这里考的是关于质体的知识点。质
7、体是存在于真核细胞内的一种细胞器。质体由两层薄膜包围，可以随细胞的生长而增大，是植物细胞合成代谢中最主要的细胞器。根据质体内所含的色素和功能的不同，质体可分为白色体、有色体和叶绿体。白色体不含色素，分布在植物体内不见光的部位，可以贮藏淀粉、蛋白质和脂肪。有色体中含有叶黄素、胡萝卜素和花青素，分布在果实和花瓣的细胞里，使果实和花瓣呈现黄色或黄橙色。叶绿体中含有叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素。因此，有色体和叶绿体共有的是叶黄素和胡萝卜素。 ）4把下列药物选人相应的作用项内保护叶绿素( B ) 溶解各种色素( AC ) 为研磨充分( D ) 促使各种色素在滤纸上扩散( E )A。丙酮 B。
8、碳酸钙 C。乙醇 D。二氧化硅 E20 份石油醚+2 份丙酮十 l 份苯B5在研磨绿叶时，下列哪种物质不需加入 ( )A。丙酮 B。层析液 C。碳酸钙 D二氧化硅C6。绿色植物的色素在光合作用中所不具有的作用是 ( )A。吸收光能 B。转换光能 C。贮存光能 D。传递光能C7学生在做“叶绿体中色素的提取和分离 ”实验时，收集到的滤液呈淡绿色其原因可能是 ( )叶片较老较黄 加入的二氧化硅多了些 研磨不充分 漏斗基部塞的脱脂棉多了些A。 B。 C。 D。C8在叶绿体色素的提取实验中，选取下列哪一种叶片效果最好 ( )A。厚、硬似革质的绿色叶片 B。衰老、黄绿色的叶片C。新鲜，幼嫩、色浓绿的叶片
9、D。多浆汁或有特殊气味的绿色叶片D9叶绿体的色素能够在滤纸上彼此分离开的原因是 ( )A。色素提取液中的不同色素已经分层 B。阳光的照射使各种色素能彼此分开C。滤纸对各种色素的吸附力不同 D。丙酮使色素溶解并彼此分离的扩散速度不同B10叶绿素能将光能转变为化学能贮存在 ( )A。二磷酸腺苷 B。三磷酸腺苷 C。核糖核酸 D。脱氧核糖核酸C11下列有关生物实验的叙述中，正确的是 ( )A。 “叶绿体中色素的提取和分离 ”实验可以用蒸馏水和大白菜代替丙酮和菠菜B“观察根对矿质离子的交换吸附 ”实验用于对照的烧杯中应加入等量的自来水C。在显微镜下观察到的根尖分生区细胞中无叶绿体和大液泡D。把载有水绵
10、和厌氧型细菌的临时装片放在密闭黑暗的环境中，用极细的光束照射，细菌将主要集中在水绵接受光照的部位B12为了提取绿色植物叶绿体中的色素，在研磨绿叶时加入了少许碳酸钙，其作用是 A。调节 pH，加速色素溶解 B。调节 pH，防止叶绿素被破坏C 使绿叶研磨充分 D。有利于 4 种色素的分开ABCD13 （多选题）在色素的提取和分离实验中，要使色素带清晰又整齐，应采取的措施是 A。定性滤纸要干燥 B。剪去滤纸条一端两角C。滤液细线划细、齐 D。重复点样A14。把叶绿体中的色素提取液放在自然光源与三棱镜之间，从镜的另一侧观察到的光谱中，变暗的区域主要是 ( )A。红光和蓝紫光 B。绿光和红光 C黄光和绿
11、光 D。黄光和蓝紫光B15对某植株作如下处理：(甲)持续光照 10 分钟；( 乙)光照 5 秒后在黑暗处理 5 秒，连续交替 20 分钟。 若其他条件不变，则在甲、乙两种情况下植物制造的有机物总量是 ( )A。甲多于乙 B。甲少于乙 C。甲和乙相等 D。无法确定B16光合作用过程中，产生 ADP 和消耗 ADP 的部位在叶绿体中依次为 ( )外膜 内膜 基质 基粒和基粒片层A。 B。 C。 DB17在下列实验中必须始终用活材料的实验是 ( )观察细胞的有丝分裂 观察植物细胞的质壁分离和复原 观察根对矿质元素离子的交换吸附 叶绿体中色素的提取和分离A。 B C。 D。B18在天气晴朗的早晨，摘取
12、一植物叶片甲，于 1000C 下烘干，称其重量；到黄昏时，再取同一株上着生位置和叶片形状都与甲基本相同的叶片乙，同样处理，称其重量，其结果是A。甲叶片比乙叶片重 B。乙叶片比甲叶片重 C两叶片一样重 D不一定 A19下列有关光合作用的叙述中错误的是 ( )A叶绿体离开叶肉细胞不能进行光合作用B。温度降到 OC 依然有植物能进行光合作用C叶绿素吸收的光能要转移给 ADP 形成 ATPD。光反应和暗反应都有许多酶参与催化作用B20在光照强度相同的情况下，置于下列哪种颜色的玻璃罩中的植物，单位时间内产生的氧气最多A。红色 B。无色 C。绿色 D。黄色A21下列中，哪组是影响叶绿体色素分离效果的关键步
13、骤 ( )选植物绿叶研磨过滤画滤液细线层析时不要让滤液细线触及层析液观察色素带A。 B。 C。 D。B22叶绿体中色素的提取和分离的实验目的是 ( )A。观察各种色素的吸收光谱 B。验证叶绿体色素的种类和各种元素的颜色C。证实色素分布在叶绿体的片层结构薄膜上 D证明 4 种色素在滤纸上的扩散速度不同A23叶绿体中色素提取和分离实验的过程是 ( )研磨 画滤液细线 过滤 纸层析A。 B。 C。 D。A24用韭菜叶做“叶绿体色素的提取实验 ”时，下列不能用做提取剂的是 ( )A。水 B。丙酮 C。酒精 DCCl 425叶绿体中的色素经层析后，出现在滤纸上扩散最宽的色素带是( A )，最窄的色素带是
14、( C )，最整齐的色素带是( C ) A。叶绿素 a B叶绿素 b C。胡萝卜素 D。叶黄素C26在叶绿体色素的提取实验中，研磨绿叶时要加入丙酮，其目的是 ( )A。防止叶绿素被破坏 B。使叶片充分磨碎C使各种色素充分溶解在丙酮里 D。为了使叶绿素溶解在丙酮里D27在最适宜的光照、土壤、肥料、湿度和温度等条件的温室内，为增加粮食产量，可适当增加( )A。空气中含氧量 B。空气中含氮量 C。土壤中含水量 D。空气中二氧化碳含量D28进行光合作用完整的单位是 ( )A。叶肉细胞 B。叶绿素 C。绿色基粒 D叶绿体C29下列关于光合作用的叙述，不正确的是 ( )A。把二氧化碳和水转变成有机物 B。把光能转变成化学能C全过程都必须在光下进行 D。有氧气放出D30与阳生植物相比较，阴生植物 ( )A。光合作用的潜力更大 B
