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1、 分类号：R614学号：2009109175密 级：单位代码：10759石河子大学硕 士 学 位 论 文乌司他丁对心跳骤停大鼠复苏早期脑组织能量代谢影响的研究学位申请人教师杨 晴指 导 李新宇教授医学硕士麻醉学重症医学医学院申请学位门类级别学科、专业名称研所究方在学向院中国新疆石河子2012年5月 Influence of Ulinastatin on brain energy metabolism in rats at theearly stage after cardiopulmonary resuscitationA Dissertation Submitted toShihezi Un
2、iversityIn Partial Fulfillment of the RequirementsFor the Degree ofMaster of MedicalByYang Qing(Critical care medicine)Dissertation Supervisor: Prof. Li XinyuMay, 2012 石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中
3、作了明确的说明并表示谢意。研究生签名： 时间： 年 月 日使用授权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。研究生签名：导师签名：时间：时间：年年月月日日 目 录中文摘要.I英文摘要.III英文缩语.V前言.1材料与方法.41材料.41.1实验动物.41.2主要实验试剂 .41.3主要实验仪器 .52方法.52.1动物分组.52.2
4、动物模型的建立 .52.3 UTI及部分 试剂的配制 .62.4标本留取及处理 .62.5各组大鼠实验参数的测定 .62.6 MAP的监测 .72.7血清 S-100B 蛋白的检测 .72.8血清 NSE的检测.82.9大鼠脑组织中乳酸含量的测定 .102.10大鼠脑组织中 ATP含量的测定.122.11海马病理形态学检测 .132.12统计学处理. 15结果.16讨论.24结论.32参考文献 .33综述.38致谢.43作者简介 .44导师评阅表 . .45 摘 要目的: 探讨乌司他丁对大鼠心肺复苏早期脑能量代谢的影响和脑保护作用。方法：成年雄性 SD大鼠 30只，随机分为假手术对照组和生理盐
5、水组和乌司他丁（UTI）组，每组各 10只。假手术对照组仅进行麻醉、气管切开插管和血管穿刺，生理盐水组和 UTI组采用窒息法制作大鼠心脏骤停（CA）和心肺复苏（CPR）模型。UTI组于自主循环恢复（ROSC）后 2min内经颈动脉推注注射用 UTI（10u/kg ），生理盐水组推等5量的生理盐水。记录各组窒息至 CA时间和 ROSC时间，监测各组 ROSC后 1h内的平均动脉压（MAP）。假手 术对照组于气管切开置管后 1h，生理盐水组和 UTI组于 ROSC后 1h经颈动脉取血和快速断头取脑组织。采用多抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测 ROSC后 1h血清 S-100B蛋白和 N
6、SE浓度； 处死大鼠取脑组织进行脑组织 ATP和乳酸含量测定，光镜下和电镜下观察海马组织的病理改变。结果：1、生理盐水组与 UTI 组的 ROSC时间差异无统计学意义（P0.05），ROSC后生理盐水组与 UTI 组的 MAP差异无统计学意义（P0.05）；2、与假手术对照组比较，生理盐水组和 UTI组大鼠血清 S-100B 蛋白和 NSE浓度在 ROSC后 1h均明显升高（ P0.05). MAP in normal saline group and ulinastatin group were at the similar level, with nosignificant differe
7、nce after ROSC(P0.05) between the two groups.2. Both S-100B protein and NSE were significantly increased in serum at 1h post-ROSC comparedwith sham group(P0.05 ）。生理盐水组和UTI组两组大鼠的 MAP在 ROSC后 2min、5min、30min各时间点比较，差异无统计学意义（P0.05）。生理盐 水组和 UTI组两组大鼠的 MAP在 ROSC后 2min 较基线值都有显著升高（P0.05 ）（见表3）。表3各组大鼠血清S-100B蛋
8、白、NSE含量比较（ xs）组别 n S-100B含量(ng/L)49.3811.10NSE含量(g/L)1950.3769.17假手术组生理盐水组UTI组101010133.827.62* 2374.2899.51*2332.23146.02*110.3414.41*#注：与假手术组相比：*P0.01；与生理盐水组相比：#P0.01注：与假手术组相比：P0.01；与生理盐水组相比：#P0.01图4各组大鼠血清 S-100B蛋白含量比较17 乌司他丁对心跳骤停大鼠复苏早期脑组织能量代谢影响的研究 3000200010000假手术组生理盐水组UTI组* *假手术组 生理盐水组 UTI组血清注：与
9、假手术组相比：*P0.01图5各组大鼠血清 NSE含量比较4各组大鼠脑组织乳酸（LD）含量比较与假手术组比较，生理盐水组和 UTI组大鼠脑组织 LD值在 ROSC后 1h均明显升高（P0.01）；与生理盐 水组比较，UTI组大鼠脑组织 LD含量显著降低（P0.05）（见表 4）。表4各组大鼠脑组织LD含量比 较（ xs）组别 n LD含量（mmol/g prot）假手术组 10 0.290.13生理盐水组 10100.690.14*UTI组 0.530.08*注：与假手术组比较：*P0.01；与生理盐水组比较：P 0.051.00 假手术组生理盐水组UTI组0.75 *0.500.250.00
10、假手术组 生理盐水组 UTI组脑注：与假手术组比较：*P0.01；与生理盐水组比较：P 0.05图6各组大鼠脑组织LD含量比 较5各组大鼠脑组织ATP含量比较18 乌司他丁对心跳骤停大鼠复苏早期脑组织能量代谢影响的研究 与假手术组比较，生理盐水组和 UTI组大鼠脑组织 ATP 含量在 ROSC 后 1h均明显下降（P0.01，P0.05）；与生理盐水组比较，UTI组大鼠脑组织 ATP含量显著升高（P0.05）（见表 5）。表5各组大鼠脑组织ATP含量比较（ xs）组别 n ATP含量（mol/gprot ）假手术组生理盐水组UTI组10101025.96.412.45.2*19.27.9*注：与假手术组比较：*P0.05，*P 0.01；与生理盐水组比较：P0.0540 假手术组生理盐水组3020100* UTI组假手术组生理盐水组 U T组I脑注：与假手术组比较：*P0.05，*P 0.01；与生理盐水组比较：P0.05图 7各组大鼠脑组织 ATP含量比较6各指标的相关性分析通过做散点图发现 ATP、乳酸、S-100B蛋白三者之间有线性相关趋势。进一步做相关性分析，得到 ATP与乳酸呈负相关（r =-0.535，P=0.002，P 0.05）见图 8；ATP与S-100B蛋白呈 负相关（r =-0.592，P=0.001 ，P0.05）见图
