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1、1免疫分型用于 68 例急性白血病的分型作者：孙秀丽，方美云，姜凤，荆源【摘要 】 为了评价免疫分型在急性白血病（AL ）分型中的科学意义，应用形态学分型、直接免疫荧光标记流式细胞仪检测免疫分型对 68 例 AL 进行了分析。结果表明：形态学与免疫学检查符合率为 94.1%，有 4 例形态学误诊被免疫分型纠正；髓系中较特异抗原为 CD13、 CD33，AML-M3 多为 CD34 低表达， HLA-DR 阴性，AML-M4、M5 易有 CD14 表达，髓系中易见淋系相关抗原表达，常见为 CD7；淋系中亦可合并髓系抗原表达。结论：免疫分型可提高 AL 的诊断分型准确性，特殊类型 AL 如急性未分
2、化性白血病（AUL） 、AML-M0 等的诊断必须依赖免疫分型。 【关键词】 急性白血病Immunologic Classification Used in typing of 68 Cases of Acute LeukemiasAbstractTo evaluate the significance of immunologic 2classification for typing of acute leukemia （AL）. 68 cases of AL were classified by morphologic and immunologic typings. The result
3、s showed that the consistency rate was 94.1% between morphology and immunology，and 4 morphologic misdiagnosed cases were corrected by immunology；CD13 and CD33 were special myeloid lineage-associated antigens；AML-M3 was often CD34 low-expressed and HLA-DR-negative； CD14 was often expressed in AML-M4
4、and M5；lymphoid lineage-associated antigens (CD7) were easily found in ANLL，and myeloid lineage-associated antigens were also found in ALL. In conclusion，immunologic classification can improve the accuracy in acute leukemia diagnosis. The diagnosis of some special AL，such as acute unidentified leuke
5、mia (AUL)，AML-M0 and so on，must rely on immunologic classification.Key words acute leukemia；morphologic classification；immunologic classification；immunologic phenotypeJ Exp Hematol 2006；14(1):39-41急性白血病（acute leukemia，AL）属高度异质性疾病，其3肿瘤细胞存在多变性，分化差异性等，传统的形态学分型法仅能使70左右的 AL 得以准确分型。近年来，结合白血病发病过程中免疫表型(immu
6、nologic phenotype)的变化对 AL 进行分型，加深了对各类 AL 本质的认识，对各类 AL 的诊断、治疗和预后判断有重要的临床意义。本研究对 68 例 AL 的免疫分型研究报告如下。材料和方法研究对象四级标题 68 例 AL 患者，男性 36 例，女性 32 例，年龄14-78 岁，中位年龄 44 岁。51 例急性髓系白血病（AML ）中 M0 1 例，M2 24 例，M3 10 例，M4 4 例，M5 12 例，16 例急性淋巴细胞白血病（ALL）中 L1 5 例，L2 10 例，L3 1 例，急性未分化型白血病（AUL）1 例。形态学检查骨髓及血涂片经瑞氏染色及相关细胞化学
7、染色检查，按 FAB标准确定 AL 的类型。免疫学检查4检测指标包括 T 系的 CD2、CD3、CD7，B 系的CD19、CD20、CD79a，髓系的CD13、CD14、CD33、CD117、CD41a 及 CD34、HLA-DR 等，均采用流式细胞仪（FACS SE）测定，仪器与试剂由美国 Becton Dickinson 公司提供。结果判断：阳性细胞20 为阳性。结 果68 例 AL 的免疫分型特征见表 1，2。Table 1. Major antigens expressed in AML cells（略）Table 2. Major antigens expressed in ALL
8、cells（略）68 例 AL 中，其中 4 例（5.9% ）经结合免疫学分型才确定，其中 1 例 M0 患者形态学示：原始细胞为 29，POX 染色阴性；细胞形态学符合急性淋巴细胞白血病，形态学诊断 ALL，但免疫分型示：CD34 47%、 CD117 53%、HLA-DR 54%表达，CD13 16%、CD33 13%及 CMPO 24%表达，诊断为 M0 型白血病。1 例形态学似 ALL(L2)患者，原幼淋巴细胞 97；免疫分型示：CD7 47%、CD38 63%、 HLA-DR 54%、CD34 58%均阳性，CD117 18%表达；染色体示：46，XX14/46，XX，csb(1q)
9、1 ，予DOCP 2 疗程化疗未达缓解，后改予 DOAP 1 疗程达完全缓解(CR)，5此后予以 DOAP 方案为主的化疗持续完全缓解，诊断为 AUL。1 例形态学 L2 患者免疫学分型示： CD34 36%、CD33 42%、CD13 45%、CD117 91、HLA-DR 82及 CD7 37表达，考虑为ly+ANLL。1 例形态学 L1 患者免疫学分型示：CD19 77、CD20 78%、CD79a 65和 CD2 22、CD3 20、CD7 29表达，考虑为双表型白血病。余病例形态学、免疫学分型相符合。分析上述结果发现，髓系中 CD13 表达率最高，为96（49/51） ，其次为 CD
10、33 表达率为 78.4（40/51） ；CD14为单核细胞特异性抗原，但阳性率较低，在 AML 中为9.8%（5/51） ，在 M4、M5 中表达率为 31.25%（5/16） 。M3 中HLA-DR 为阴性，CD34 表达率(10%) 明显低于其他亚型。髓系中部分合并淋系抗原的表达，常见 CD7、CD19 等。本研究 51 例AML 中 12 例合并淋系抗原表达（ly+AML） ，阳性率 23.5%，其中T 系表达占 9 例，主要为 CD7 表达，1 例合并 CD2 表达，B 系表达占 3 例，为 CD19 表达。淋系中也有合并髓系抗原表达，如 CD13 和 CD33，阳性率为 20（3/
11、15） 。B 淋巴细胞中抗原阳性率依次为 CD19 （62.5%，10/16） CD20 （12.5% ，2/16） CD79a （6.25%，1/16） ，T 淋巴细胞中抗原阳性率依次为 CD7 （43.7%，7/16） CD3 （37.5%，6/16 ）6CD2（31.25%，5/16） 。讨 论白血病是一组克隆性的恶性疾病，具有高度异质性，传统的FAB 形态学分型可使 70左右的 AL 得以分型，结合免疫分型可以较精确的识别表达不同分化抗原的细胞，从而明确划分出细胞的发育阶段和类型，对于区分 T、B 淋巴细胞及形态学难以辨认的细胞，特别是其在 AML 与 ALL 的鉴别、ALL 亚型区分
12、及AUL、M0、M6、M7 等的诊断中尤为重要。本研究中形态学诊断与免疫分型符合率为 94.1%。1 例 M0 患者形态学为淋巴细胞，免疫分型示髓系抗原表达，完全符合 M0；1 例形态学似 L2，免疫分型示高度表达干/祖细胞标志，无特异淋系、髓系抗原表达，诊断为AUL；1 例形态学 L2，免疫分型表达髓系 CD13、CD33 为主，同时表达 CD7，考虑为 ly+AML。髓系中较特异的抗原为 CD13、CD33 、 CD14，其阳性率依次为CD13CD33CD14，CD34 为造血干、祖细胞相关抗原，随着细胞的成熟其抗原表达会逐渐减弱1 。M0、M1 常主要表达 CD34这类造血干/祖细胞标志
13、，也可表达髓系相关标志，如CD13、CD33，本研究 1 例 M0 患者部分表达髓系抗原CD13、CD33，强烈表达干 /祖细胞标志。M3 型白血病较特异的免疫表型为 CD13、CD33 阳性，CD34 低表达，HLA-DR 多阴性72，3 ，本研究与此相一致。研究证实 CD14 为单核细胞的特异性标记抗原4 ，本研究中发现， CD14 主要在 M4、M5 中表达，阳性率为 31.25%，在 AML 中为 9.8%，与国内的汤美华等5 研究相比，阳性率略低。髓系中可合并有淋系表达，常见为 CD7，其次为 CD10、CD19 和 CD20 等6 ，本研究中发现 51 例 AML 中，12 例合并
14、淋系表达，其中 T 系表达 9 例，主要为 CD7 表达，1 例同时合并 CD2 表达；B 系表达 3 例，主要为 CD19 表达。淋系中，B 淋巴细胞抗原阳性率依次为 CD19 CD20CD79a，T 淋巴细胞中抗原阳性率依次为 CD7CD3CD2，淋系中可合并髓系CD13、 CD33 表达，其中 1 例淋系同时表达 B 系抗原（CD19、 CD20、CD79a）及 T 系抗原(CD2 、CD3、 CD7)，诊断为双表型白血病，考虑细胞恶变部位在多能干细胞或以上阶段7 。综上所述，在形态学基础上结合免疫学分析，可更精确地了解待检测细胞的不同分化阶段和类型，提高白血病的分型准确性，具有补充和纠
15、正诊断的临床意义。【参考文献】1Testa U，Torelli GF，Riccioni R，et al. Human acute 8stem cell leukemia with multilineage differentiation potential via cascade activation of growth factor receptors. Blood，2002；99: 4634-46372LoCoco F，Foa R. Diagnostic and prognostic advance in the immunophenotypic and genetic character
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