《mPEG-BSA-5-FU的合成及其抗癌活性初探（毕业设计-药剂学专业）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《mPEG-BSA-5-FU的合成及其抗癌活性初探（毕业设计-药剂学专业）（67页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、广 东 药 学 院硕 士 学 位 论 文mPEG-BSA-5-FU 的 合 成 及 其 抗 癌 活 性 初 探姓 名 ： 戴 会 群申 请 学 位 级 别 ： 硕 士专 业 ： 药 剂 学指 导 教 师 ： 朱 亮20090101中 文 摘 要mPEG-BSA-5-FU 的 合 成 及 其 抗 癌 活 性 初 探目 的 为 延 长 5-FU 的 半 衰 期 减 小 其 达 峰 浓 度 制 备 了 mPEG-BSA-5-FU 复 合物 探 讨 其 体 外 药 效 学 特 性 并 初 步 研 究 其 在 小 鼠 体 内 的 药 物 代 谢 动 力 学方 法 用 NHS 活 化 方 法 制 备 了
2、5-FUAC 活 性 酯 在 pH9.0 的 硼 酸 缓 冲 液 中 和 白 蛋 白偶 联 用 NHS 活 化 方 法 制 备 了 mPEG 活 性 酯 在 pH8.0 的 硼 酸 缓 冲 液 中 和 所 制 备的 BSA-5-FU 反 应 得 mPEG-BSA-5-FU 复 合 物 以 小 鼠 腹 水 型 肝 癌 细 胞 株 H22建 立 实 体 瘤 动 物 模 型 以 5-FU 5-FU-BSANAP 为 对 照 组 通 过 计 算 抑 瘤 率 考 察mPEG-BSA-5-FU 的 药 效 学 用 mPEG-BSA-5-FU 以 及 5-FU 原 药 给 正 常 雌 雄 各 半 昆明 小
3、鼠 进 行 腹 腔 注 射 每 只 小 鼠 予 含 相 当 于 3 mg5-FU 量 的 5-FU 原 药 和mPEG-BSA-5-FU 采 用 高 效 液 相 法 测 定 不 同 时 间 点 血 浆 药 物 浓 度 绘 制 两 组 药物 的 时 间 -浓 度 曲 线 按 中 国 药 理 学 会 提 供 的 3P97 程 序 计 算 各 组 药 物 的 药 代 动 力学 参 数结 果 本 实 验 方 法 得 到 了 偶 联 率 为 32.89 g/mg 的 BSA-5-FU 修 饰 度 为 43.37%的mPEG-BSA-5FU 同 等 剂 量 下 mPEG-BSA-5-FU 的 抑 瘤 率
4、为 40.3% 明 显 高 于 5-FU组 33.63% 及 5-FU-BSANAP 组 20.54% 且 其 结 果 数 据 分 析 具 有 统 计 学 意义 P 0.05 HPLC 对 5-FU 检 测 方 法 的 最 低 检 测 限 为 0.05mg/L,出 峰 时 间 约 在 5.6min左 右 其 回 收 率 日 内 系 数 日 间 系 数 分 别 为 103.7% 5.64% 6.35% 5-FU 原药 的 血 药 峰 浓 度 出 现 在 5.8 min 之 内 此 后 血 药 浓 度 迅 速 降 低 mPEG-BSA-5FU的 峰 浓 度 出 现 在 腹 腔 注 射 后 99.5
5、 min 并 在 较 长 一 段 时 间 内 1 12 h 维 持 较 高的 浓 度 mPEG-BSA-5-FU 组 药 代 动 力 学 结 果 显 示 其 半 衰 期 T1/2 332.85 min 明显 高 于 5-FU 原 药 组 的 T1/2 9.88 min ,达 到 了 明 显 的 长 循 环 效 果 血 药 浓 度 峰 值Cmax 4.6 mg/L 明 显 比 5-FU 原 药 组 (57.8 mg/L)低 而 药 物 浓 度 曲 线 下 面 积AUC:2721 mg*min/L 明 显 比 5-FU 原 药 组 AUC 1237 mg*min/L 增 加结 论 偶 联 反 应
6、及 修 饰 反 应 的 工 艺 简 单 但 结 果 不 是 很 稳 定 所 得 的 目 标 产 物 为一 复 合 物 且 有 批 量 差 异 药 效 学 结 果 显 示 所 得 目 标 产 物 mPEG-BSA-5-FU 的 抑瘤 率 明 显 高 于 5-FU 原 药 组 和 5-FU-BSANAP 组 药 动 学 结 果 显 示 目 标 产 物- - ImPEG-BSA-5-FU 的 T1/2 明 显 延 长 达 峰 时 间 延 长 Cmax 有 很 大 幅 度 的 降 低 AUC增 加 有 可 能 克 服 5-FU 短 时 间 内 血 药 浓 度 高 作 用 时 间 短 副 作 用 大 的
7、 问 题关 键 词 :5-氟 尿 嘧 啶 白 蛋 白 单 甲 氧 基 聚 乙 二 醇 药 动 学 高 效 液 相 法 药 代 动力 学- II -AbstractThe synthesis and preliminary exploration of antitumoractivity of mPEG-BSA-5-FuPharmacyPostgraduate : Huiqun Dai Supervisor: Liang Zhu professorObjective: To extend the half- life and reduce the peak concentration of 5-
8、FU, weprepared the mPEG-BSA-5-FU compounds, and explore its pharmacodynamicproperties in vitro and invest its initial pharmacokinetics in vivo.Methods: Prepare 5-FUAC active ester with NHS-activated method, and coupledwith albumin in borate buffer of pH9.0; prepare mPEG active aster withNHS-activate
9、d method, and coupled with BSA-5-FU prepared in pH 8.0 boric acidbuffer solution, at last the compounds of mPEG-BSA-5-FU were got. Establishanimal model of solid tumor of mouse with hepatoma cell line(H22), review thepharmacodynamics of the compounds of mPEG-BSA-5-FU comparison to 5-Fu5-FU-BSANAP. G
10、ive 3 mg 5-FU and mPEG-BSA-5-FU (equivalent to the amount of3 mg 5-FU prodrug) to each mouse with intraperitoneal injection. Measured theplasma drug concentration at different time points with HPLC, draw theirtime-concentration curve, calculate their pharmacokinetic parameters with 3p97software prov
11、ided by the Chinese Pharmacological Society.Results: as a result the coupled rate was 32.89g/mg of BSA-5-FU, the modificationdegree was 43.37% of mPEG-BSA-5-FU. Under the same dose, the inhibition rate ofmPEG-BSA-5-FU was 40.3%, significantly higher than 5-FU group (33.63%) and5-FU-BSANAP group (20.
12、54%) with statistical significance P270 ,光 谱 数 据 IR,3197.8 cm-1(-COOH 伸 缩 振 动 最 大 吸 收 峰 ,文 献23值 :3198 cm-1) 1741.6 cm-1(C=O 伸 缩 振 动 最 大 吸 收 峰 ,文 献 23值 :1742 cm-1)1669.3 cm-1(C=O,C=C 伸 缩 振 动 最 大 吸 收 峰 ,文 献 23值 :1669 cm-1) 1425.3cm-1(N3-H 弯 曲 振 动 最 大 吸 收 峰 ,文 献 23值 :1426 cm-1),与 文 献 报 道 相 符7广 东 药 学 院
13、硕 士 研 究 生 论 文100.0969492908886848280787674727068666462605856545250%T 48464442403836343230282624222018161412108642846.042971.933016.563195.063088.342348.772525.791742.131704.121345.801487.451145.871250.811424.63 1191.091377.54 1239.141208.35915.45886.77987.06 825.10900.88 758.93680.90653.72728.43796.
14、31488.15563.690.04000.0 3600 3200 2800 2400 2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 450.0cm-1图 2-2 FUAC 的 红 外 图 谱经 紫 外 分 光 光 度 计 扫 描 FUAC 紫 外 最 大 吸 收 波 长 为 273 nm 与 文 献 23一 致图 2-3 FUAC 的 紫 外 图 谱3 讨 论在 5-氟 尿 嘧 啶 -1-基 乙 酸 的 合 成 过 程 中 ,溶 剂 量 不 能 过 多 ,否 则 产 品 不 易 从 溶 液中 析 出 ,按 上 述 反 应 步 骤 用 量 ,溶 剂 量 控 制 在
15、 12mL 为 宜 同 时 ,反 应 温 度 要 控 制 在50 以 上 ,低 于 50 反 应 几 乎 不 进 行 ,温 度 过 高 则 副 反 应 增 多 ,实 验 结 果 表 明 60为 最 佳 反 应 温 度 在 反 应 结 束 后 ,冷 却 至 室 温 ,先 将 pH 调 至 5.5 ,若 有 微 量 沉 淀 析 出 ,则 为 未 反 应 的 原 料 5-氟 尿 嘧 啶 ,此 时 滤 除 在 冰 箱 中 冷 藏 滤 液 后 ,若 无 晶 体 析 出 ,可加 入 晶 种 或 用 玻 璃 棒 摩 擦 容 器 壁 诱 导 产 品 析 出 产 品 经 水 重 结 晶 后 用 高 效 色 谱
16、法测 得 纯 度 99.57%8广 东 药 学 院 硕 士 研 究 生 论 文第 二 部 分 5-FUAC 活 性 酯 的 合 成 及 其 与 白 蛋 白 的 偶 联为 了 使 FUAC 与 载 体 白 蛋 白 偶 联 需 要 对 FUAC 的 羧 基 或 者 白 蛋 白 分 子 上的 氨 基 进 行 活 化 可 以 活 化 氨 基 也 可 以 活 化 羧 基 但 是 迄 今 为 止 普 遍 使 用 的 都 是活 化 羧 基 的 方 法 五 十 年 代 已 总 结 出 现 在 广 泛 使 用 的 肽 键 生 成 方 法1 混 合 酸 酐 法 24,25,26混 合 酸 酐 法 氯 甲 酸 乙 酯 或 氯 甲 酸 异 丁 酯 是 最 常 用 的 生 成 混 酐 的 试 剂 它 是利 用 羧 酸 羰 基 的 亲 电 性 高 于 碳 酸 羰 基 从 而 使 氨 基 选 择 性 的 进 攻 羧 酸 羰 基 形 成 酰胺 键 混 酐 法 具 有 反 应 速 度 快 产
