意蜂群中不同日龄工蜂的东方蜜蜂微孢子虫感染差异比较

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1、中国蜂业 APICULTURE OF CHINA 2014年46月下第65卷36东 方 蜜 蜂 微 孢 子 虫 ( Nosema ceranae) 是 一 种寄 生 于 蜜 蜂 中 肠 的 专 性 细 胞 内 寄 生 单 细 胞 真 菌 。1994年 , 在 中 华 蜜 蜂 ( Apis cerana cerana) 中 首 次发 现 并 于 1996年 命 名1; 2005年 , 首 次 在 台 湾 的 西方 蜜 蜂 ( A. mellifera) 工 蜂 中 被 发 现2。 大 量 研 究表 明 , 在 世 界 大 部 分 养 蜂 地 区 , 东 方 蜜 蜂 微 孢 子 虫已 逐 渐 替

2、代 了 西 方 蜜 蜂 微 孢 子 虫 ( N.apis) 成 为 侵染蜜蜂的主要微孢子虫种类3-8。蜜 蜂 微 孢 子 虫 的 侵 染 不 仅 造 成 蜜 蜂 消 化 、 能 量 代谢 异 常 、 免 疫 抑 制 , 寿 命 缩 短 , 生 产 力 下 降 , 它 还 常常 与 其 他 病 原 共 同 危 害 蜂 群 , 使 蜂 群 面 临 更 为 严 重 的病 害 威 胁9-14, 它 可 能 是 造 成 蜂 群 衰 竭 ( colony collapse disorder, CCD) 的 重 要 原 因 之 一10,15-17。在 我 国 , 东 方 蜜 蜂 微 孢 子 虫 在 意 大

3、利 蜜 蜂 ( 简称 意 蜂 ) 和 中 华 蜜 蜂 ( 简 称 中 蜂 ) 中 均 有 广 泛 感 染18-20。 黄 少 康 等18对 意 蜂 外 勤 蜂 中 微 孢 子 虫 感 染 情况 的 调 查 表 明 , 4月 份 , 在 51.9%的 意 蜂 群 中 , 外 勤蜂 的 微 孢 子 虫 感 染 率 可 达 40% 60%, 可 能 是 造 成采 蜜 生 产 后 蜂 群 快 速 下 降 的 原 因 之 一 。 Traver等21对 美 国 弗 吉 尼 亚 一 蜂 群 的 微 孢 子 虫 感 染 状 况 调 查 显意蜂群中不同日龄工蜂的东方蜜蜂微孢子虫感染差异比较游信毅叶坤婷苏 欣应碧

4、华陈沉思梁 勤黄少康(福建农林大学蜂学学院,福州350002)摘要:东方蜜蜂微孢子虫是蜜蜂中肠上皮细胞内专性寄生单细胞真菌,对蜜蜂健康有较大影响。2011年4-5月,对4群意大利蜂群中0日龄至30日龄工蜂中肠的微孢子虫感染情况进行了调查和比较,结果表明,5日龄以下工蜂中未检出,10日龄后,工蜂的感染率为13.8%,之后逐渐增加;20日龄后感染率极显著增加(P10 30个 记 录 为 级 ; 30 200个 为 级 ; 200个 以 上记 为 级 。1.3数据处理根 据 每 只 工 蜂 中 肠 的 微 孢 子 虫 镜 检 情 况 进 行感 染 程 度 分 级 记 录 , 统 计 各 日 龄 工

5、蜂 的 微 孢 子 虫感 染 百 分 率 , 以 及 感 染 严 重 程 度 的 百 分 率 。 百 分率 数 据 经 平 方 根 反 正 弦 转 换 后 , 用 SPSS 的 方 差 分析 ( ANOVA) 的 LSD法 进 行 差 异 显 著 性 分 析 。2结果与分析2.1意蜂蜂群中工蜂的微孢子虫感染率随日龄增加而增加对 4蜂 群 中 不 同 日 龄 意 蜂 工 蜂 中 肠 中 的 微孢 子 虫 感 染 情 况 镜 检 , 结 果 表 明 ( 图 1) , 初出 房 和 5日 龄 工 蜂 均 未 检 出 , 此 后 , 随 着 工 蜂日 龄 的 增 加 , 感 染 率 逐 渐 升 高 。

6、 10日 龄 和 15日龄 工 蜂 平 均 感 染 率 分 别 为 1 3 . 8 %和 2 3 . 8 %; 而20日 龄 平 均 感 染 率 高 达 80%, 极 显 著 高 于 10、1 5日 龄 ( P = 0 . 0 0 1, P = 0 . 0 0 4) , 2 5日 龄 的 感染 率 仍 保 持 高 水 平 , 但 与 2 0 日 龄 无 显 著 差 异( P=0.737) 。 到 30日 龄 时 , 仅 有 1群 蜂 还 能 取 到20只 蜂 样 , 工 蜂 平 均 感 染 率 达 75%。图1意蜂群中不同日龄工蜂中微孢子虫的感染率注:No.1至No.4为4群蜂的感染率变化;A

7、verage为4群蜂平均感染率变化。2.2 蜂 群 中 严 重 感 染 微 孢 子 虫 的 工 蜂 比 例 随 日 龄 增加显著升高图2不同日龄意蜂工蜂中微孢子虫感染程度差异比较注:微孢子虫的感染级数以400倍显微镜下,每个视野内孢子数少于10个时记为级,1030个记录为级;30200个为中国蜂业 APICULTURE OF CHINA 2014年46月下第65卷38级;200个以上记为级。由 于 感 染 率 只 能 表 示 是 否 有 微 孢 子 虫 感 染 , 并不 表 达 感 染 程 度 的 差 异 , 而 同 为 感 染 的 蜂 , 有 感 染程 度 的 差 异 。 因 此 , 进 一

8、 步 对 10至 25日 龄 不 同 感 染程 度 的 工 蜂 百 分 率 进 行 比 较 , 结 果 可 知 ( 图 2) ,10和 15日 时 , 无 感 染 蜂 的 比 例 极 显 著 高 于 感 染 蜂的 比 例 ( P=0.001) , 到 20至 25日 龄 时 , 严 重 感 染( 、 、 、 级 ) 蜂 的 百 分 率 上 升 , 20日 龄 时 级 感 染 蜂 的 比 例 显 著 高 于 级 感 染 蜂 的 百 分 率( P=0.008) , 25日 龄 的 严 重 感 染 ( 级 ) 蜂 百 分比 显 著 低 于 低 感 染 蜂 ( 感 染 、 、 级 ) 的 比 例(P=

9、0.009,P=0.003,P=0.009)。综 合 上 述 , 在 意 蜂 群 中 , 随 工 蜂 日 龄 的 增 加 ,不 仅 蜂 群 中 的 感 染 率 增 加 , 感 染 严 重 程 度 也 显 著 增加,特别是20日龄以上的工蜂。3讨论试 验 结 果 显 示 , 意 蜂 群 中 , 东 方 蜜 蜂 微 孢 子虫 对 工 蜂 的 感 染 率 及 严 重 感 染 的 百 分 率 , 是 随 日 龄的 增 加 而 增 加 的 , 特 别 是 在 20日 龄 后 , 感 染 尤 为 严重 。 同 时 , 试 验 过 程 中 发 现 , 在 4群 的 取 样 蜂 中 ,有 3群 的 感 染 率

10、 升 高 较 快 , 而 另 1群 的 感 染 率 升 高 较慢 。 25日 龄 时 取 样 时 , 2群 感 染 较 重 的 蜂 群 ( No.1和 No.2) 中 已 无 蜂 样 可 取 , 仅 感 染 较 重 的 ( No.3)和 较 轻 的 1群 (No.4)仍 有 蜂 可 取 , 这 是 导 致 图 1中 25日 龄 的 平 均 感 染 率 低 于 20日 龄 平 均 感 染 率 的 主 要 原因 , 尽 管 二 者 在 统 计 上 是 无 显 著 差 异 的 。 至 30日 龄时 , 仅 能 取 到 1群 ( No.4) 的 蜂 样 本 。 这 说 明 , 显示 随 着 日 龄 的

11、 增 加 , 感 染 率 的 升 高 , 工 蜂 的 寿 命 缩短 , 死 亡 率 增 加 。 而 且 , 蜂 群 中 大 多 数 工 蜂 平 均 寿命 还 不 到 30日 龄 , 主 要 原 因 之 一 是 东 方 蜜 蜂 微 孢 子虫 的 感 染 。 同 时 , 试 验 期 间 为 4-5月 , 正 处 荔 枝 、 龙眼 开 花 流 蜜 期 , 工 蜂 外 出 采 集 积 极 极 高 , 高 强 度 的野 外 采 集 活 动 , 又 增 加 了 受 感 染 个 体 死 亡 的 机 率 。因 此 , 生 产 上 常 见 采 蜜 期 后 , 群 势 快 速 下 降 。 实 际上 , 这 与 微

12、 孢 子 虫 的 感 染 有 密 切 关 系 。 所 以 , 在 微孢 子 虫 广 泛 感 染 我 国 乃 至 全 世 界 蜜 蜂 的 情 况 下 , 如何 采 取 安 全 有 效 的 措 施 来 抑 制 和 降 低 东 方 微 孢 子 虫对 蜜 蜂 的 危 害 , 保 障 蜜 蜂 的 健 康 和 生 产 , 是 提 高 养蜂生产效益和农业授粉效益亟待解决的重要问题。参考文献Fries I., Feng F., Silva A.D., Slenmenda S.B., Pieniazek N.J. Nosema ceranae (Microspora, Nosematide) Morpholog

13、ical and molecular characterization of a microsporidian parasite of the Asian honey bee Apis cerana (Hymenoptera, Apidae). EurJ. Protistol., 1996, 32: 356-365.Huang W.F., Jiang J.H., Wang C.H. A Nosema ceranae isolate from the honey bee Apis melliferaJ. Apidologie, 2007, 38: 30-37.Fries I., Martin R

14、., Meana A., Garca-Palencia P., Higes M. Natural infections of Nosema ceranae in European honey beesJ. Apic. Res., 2006, 45 : 23023 3.Klee J., Besana A.M., Genersch E, et al. Widespread dispersal of the microsporidian Nosema ceranae, an emergent pathogen of the western honey bee, Apis melliferaJ. In

15、vertebr. Pathol., 2007, 96(1): 1-10.Chen Y.P., Evans J.D., Zhou L., Boncristiani H., Kimura K., Xiao T., Litkowski A.M., Pettis J.S. Asymmetrical coexistence of Nosema ceranae and Nosema apis in honey beesJ. Invertebr. Pathol, 2009, 101: 204null0 9.Higes M., Martn-Hernandez R., Botias C., Meana A. T

16、he presence of Nosema ceranae (Microsporidia) in North African honey bees (Apis mellifera intermissa) J. Apic Res. 2009, 48: 217219.Forsgren E, Fries I. Comparative virulence of Nosema ceranae and Nosema apis in individual European honey bees. Vet Parasitol, 2010, 170(3): 212-217.Fries I. Nosema ceranae in European hone

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