《蛙心搏的观察与描记期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流》由会员分享，可在线阅读，更多相关《蛙心搏的观察与描记期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流（7页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1 蛙心搏的观察与描记期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流实验日期： 5 月 7 号 室温： 28一、实验对象与实验材料1. 蛙 3 只2. 常规手术器械、蛙板、蛙心夹、毁髓针、棉球、滴管、纱布、棉线、任氏液、小烧杯（或培养皿） 、污物缸3. 秒表（手机秒表） 、两个针头（针灸针） 、双针形露丝刺激电极、张力换能器、支架、滑轮、双凹夹、 PowerLab 生理实验系统、蛙心插管（斯氏套管） 、套管夹4. 0.65%NaCl 溶液， 5%NaCl 溶液， 2%CaCl2 溶液， 1%KCl 溶液， 1:5000肾上腺素， 1:10000乙酰胆碱溶液， 300U/ml 肝素溶液二、实验方法与步骤(
2、一）蛙的心搏观察1. 双毁髓，暴露蛙心脏：小心剪去心包膜。2. 观察蛙心脏结构3. 观察心搏过程，记录正常心跳次数4. 斯氏第一结扎，观察记录静脉窦、心房和心室5. 斯氏第二结扎，观察记录静脉窦、心房和心室6. 重复步骤 1 制备另一个蛙心暴露，用于下面的心搏曲线实验（二）蛙的心搏曲线与心电图记录1. 连接实验装置： PowerLab 刺激输出线接双针形刺激电极，张力换能器接通道 2，通道 3 生物电输入线接针形电极2. 用蛙心夹轻夹心尖连接张力换能器， 可用滑轮， 棉线适当延长点， 角度放低3. 开机，打开 chart 软件，分别设置 ch2 和 ch3 放大参数，设置刺激为单脉冲。4. 针
3、形电极插入蛙上下肢皮肤，连接通道 3 5. 观察正常的蛙心搏曲线和心电图记录（三）期外收缩与代偿间歇实验1. 在方法二的基础上， 将刺激电极放到心室部位， 注意尽量不影响心脏的收缩舒张2. 分别在心室的收缩期， 舒张早期、 中期和晚期给予适当强度单脉冲 （阈上刺激） ，观察期外收缩和代偿间歇的发生。3. 保存数据4. 进入方法四，制备蛙的离体心脏灌流装置（四）蛙离体心脏灌流装置1. 双毁髓，暴露蛙的心脏，分辨连接蛙心脏的血管：动脉圆锥、左主动脉和2 右主动脉，静脉与静脉窦2. 用斯氏蛙心插管法制备离体蛙心。（五）离体心脏灌流实验项目1. 记录正常心搏曲线，准备好加药标记，以下实验过程中保持 c
4、hart 连续不停的记录2. 滴加 0.65%NaCl 溶液并标记，观察到心搏明显变化后，吸去套管内溶液并同时做冲洗标记，用新鲜的任氏液清洗 23 次，待心搏曲线恢复正常。注意， 换液时切勿碰套管， 保持灌流液面一致。 （以下实验同） 。 保持 Chart连续采样直到实验结束。3. 滴加 5%NaCl26 滴4.滴加 2%CaCl2 溶液 13 滴实验5.滴加 1%KCl 溶液 12 滴实验6.滴加 12 滴肾上腺素溶液（ 1:5000）实验7.滴加 12 滴 1:10000乙酰胆碱溶液实验8.实验结束，保存数据，回放记录，卸下实验装置，清理仪器、桌面卫生，并关 PowerLab 和电脑电源三
5、、实验结果：（ 1） 蛙心搏的观察与描记表 1. 斯氏结扎记录表实验项目频率 /次 *min -1静脉窦 心房 心室对照 60 55 55 第一结扎 60 42 42 第二结扎 60 42 37 实行斯丹尼氏第一结扎后， 静脉窦收缩的频率为 60 次 min-1 ， 而心房和心室的收缩频率相同均为 42 次 min-1 ；实行斯丹尼氏第二结扎后，静脉窦收缩的频率为 60 次 min-1 ，心房的收缩频率为 42 次 min-1 ，心室的收缩频率为 37 次 min-1 。（ 2） 期外收缩与代偿间歇的观测3 文件1通道2(mV)0.00.20.40.65:09 5:10 5:11 5:12 5
6、:13 5:14 5:15 5:16 5:17 5:18 5:19 5:20 5:21 5:22 5:232002-01-01 0:25:51.437图一、 刺激收缩期及舒张期早期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇文件1通道2(mV)-0.4-0.2-0.00.20.40.68:40 8:41 8:42 8:43 8:44 8:45 8:46 8:47 8:48 8:492002-01-01 0:25:51.437图二、刺激舒张期中期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇文件1通道2(mV)0.00.20.40.67:28 7:29 7:30 7:31 7:32 7:33 7:34 7:35 7:36 7:3
7、7 7:38 7:39 7:40 7:412002-01-01 0:25:51.437图三、刺激舒张期后期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇期 外 收缩 代 偿 间隙4 （ 3） 蛙类斯氏离体心脏灌流文件1通道2(mV)-0.3-0.2-0.1-0.00.10.20.310 12 14 16 18 20 22 242002-01-01 2:18:26.968图四、正常的蛙心搏曲线文件1通道2(mV)-0.2-0.1-0.00.10.20.33:05 3:10 3:15 3:20 3:252002-01-01 2:18:26.968图五、 5%NaCl2 对蛙离体心脏活动的影响09通道2(mV)-0.
8、2-0.1-0.00.10.26:42 6:44 6:46 6:48 6:50 6:52 6:54 6:56 6:58 7:002002-01-01 2:18:26.968图六、肾上腺素对蛙离体心脏活动的影响5 09通道2(mV)-0.2-0.1-0.00.10.210:32 10:34 10:36 10:38 10:40 10:42 10:44 10:46 10:48 10:50 10:52 10:542002-01-01 2:18:26.968图七、 2%CaCl2 对蛙离体心脏活动的影响09通道2(mV)-0.2-0.1-0.00.10.20.323:04 23:06 23:08 23:
9、10 23:12 23:14 23:16 23:18 23:20 23:22 23:24 23:262002-01-01 2:18:26.968图八、 1%KCl 对蛙离体心脏活动的影响四、分析讨论：(1) 关 于 蛙 心 搏 过 程 的 分 析 : 斯氏第一次结扎：实 验 过 程 中 观 察 到 房 室 沟 结 扎 后 ， 静 脉 窦 的 收缩 基 本 不 变 ，心 室 先 停 止 收 缩 ，隔 一 段 时 间 之 后 又 恢 复 收 缩 ，但 收 缩的 频 率 比 原 来 为 慢 。其 主 要 原 因 是 从 静 脉 窦 传 导 至 心 房 、心 室 的 电 信号 被 阻 断 ，分 离 了
10、 静 脉 窦 与 心 房 、心 室 之 间 的 传 递 。心 脏 的 自 律 性 完全 靠 静 脉 窦 来 提 供 ，如 果 截 断 静 脉 窦 与 心 脏 之 间 的 传 递 ，因 为 静 脉 窦对 异 位 起 博 点 有 超 速 抑 制 作 用 ，所 以 心 脏 会 停 止 跳 动 一 段 时 间 。而 后房 室 交 界 处 开 始 搏 动 ， 因 为 房 室 交 界 的 自 动 频 率 与 比 静 脉 窦 的 频 率慢 ，所 以 心 房 、心 室 的 跳 动 减 慢 。由 于 心 房 节 律 高 于 心 室 ，因 此 心 室的 节 律 服 从 于 心 房 的 节 律 。 斯 氏 第 二
11、次 结 扎 ：实 验 过 程 中 观 察 到 斯 氏 第 二 次 结 扎 后 ，静 脉窦 的 收 缩 基 本 不 变 ， 心 室 先 停 止 收 缩 ， 隔 一 段 时 间 之 后 又 恢 复 收 缩 ，但 收 缩 的 频 率 极 慢 。而 心 房 的 收 缩 节 律 与 第 一 结 扎 基 本 相 同 。其 主 要6 原 因 是 斯 氏 第 二 次 结 扎 是 阻 断 房 室 交 界 处 ， 截 断 了 心 房 与 心 室 之 间 的传 递 ，那 心 室 的 搏 动 则 由 浦 肯 野 纤 维 进 行 异 位 起 博 。因 为 静 脉 窦 对 异位 起 博 点 有 超 速 抑 制 作 用 ，
12、所 以 心 房 、心 室 会 停 止 跳 动 一 段 时 间 。当浦 肯 野 纤 维 开 始 搏 动 ，由 于 它 的 搏 动 频 率 比 房 室 交 界 更 慢 ，所 以 心 室的 跳 动 会 更 加 缓 慢 。所 以 实 验 出 现 了 跳 动 频 率 由 高 到 低 为 静 脉 窦 、心房 、 心 室 。(2) 蛙 心 室 肌 的 期 外 收 缩 和 代 偿 间 歇心肌的机能特征之一就是具有较长的不应期， 绝对不应期几乎占整个收缩期。在心室收缩期给以任何刺激，心室都不发生反应。而在心室舒张的早、中、晚期， 此时进入相对不应期， 给予单个阈上刺激， 则产生一次正常节律以外的收缩反应， 称为
13、期外收缩。 当静脉窦传来下一次兴奋恰好落在期外收缩的收缩期时，心室不再发生反应， 须待静脉窦传来下一次兴奋才能发生收缩反应。 因此， 在期外收缩之后，就会出现一个较长时间的间歇期，称为代偿间歇。 如 图 一 所 示 ，刺 激 收 缩 期 和 舒 张 期 早 期 ，其 心 搏 曲 线 没 有 出 现变 化 。这 是 因 心 肌 细 胞 在 心 搏 过 程 中 有 一 个 有 效 不 应 期 ，蛙 的 有 效 不应 期 为 整 个 收 缩 期 和 舒 张 期 的 早 期 。 有 效 不 应 期 期 间 ， Na+通 道 完 全失 活 或 刚 刚 开 始 复 活 ，即 便 予 以 再 大 的 刺 激
14、 也 不 能 引 起 动 作 电 位 ，所以 不 能 引 起 心 脏 的 收 缩 。 如 图 二 所 示 ， 刺 激 舒 张 期 中 期 ， 出 现 了 期 外 收 缩 和 代 偿 间 歇 。这 是 因 为 该 相 对 不 应 期 大 约 在 舒 张 期 的 中 期 ， Na+通 道 已 逐 渐 复 活 ，并 具 有 开 放 能 力 ，这 时 若 予 以 一 阈 上 刺 激 ，即 可 引 起 心 室 一 次 额 外 的收 缩 ，即 期 外 收 缩 。代 偿 间 歇 即 心 室 较 长 时 间 舒 张 期 ，是 跟 着 期 外 而出 现 的 。 由 于 期 外 收 缩 时 也 有 一 段 有 效
15、 不 应 期 。 在 这 个 过 程 中 ， Na+通 道 同 样 失 活 了 ，窦 性 节 律 传 过 来 正 好 落 在 了 有 效 不 应 期 内 ，心 室 就不 产 生 收 缩 ， 要 到 下 一 次 窦 性 节 律 传 来 的 时 候 ， 才 恢 复 正 常 。 心 室 肌 不 应 期 较 长 的 生 理 意 义心 室 肌 特 长 的 不 应 期 可 以 确 保 心 搏 有 节 律 地 工 作 而 不 受 过 多 刺激 的 影 响 ， 不 会 象 骨 骼 肌 那 样 产 生 强 直 收 缩 从 而 导 致 心 脏 泵 血 功 能 的停 止 。有 利 于 心 脏 进 行 长 期 不 疲
16、 劳 的 舒 缩 活 动 ，而 不 致 于 象 骨 骼 肌 那样 产 生 强 直 收 缩 而 影 响 其 射 血 功 能 。（ 3）蛙类斯氏离体心脏灌流 从图五可以看出，当任氏液中加入 Na+后，蛙的心搏曲线的基线明显下降，说明 Na+对蛙类心脏的收缩性起抑制作用，使心脏的收缩力降低。同时心搏7 曲线由密变疏，说明心率减慢。心肌细胞的兴奋 -收缩偶联在很大程度上依赖于胞外内流的 Ca2+，而当 Na+浓度升高时，由于 Na+与 Ca2+竞争性地与肌钙蛋白结合， 使得 Ca2+与肌钙蛋白的结合能力降低， 从而使得钙内流减少， 因此心肌收缩力减弱，同时也使心率变慢。如图六所示，当任氏液中加入肾上腺素（ Adr）后，蛙的心搏曲线呈上升趋势，说明肾上腺素（ Adr）对蛙类心脏的收缩性起促进作用，使心脏的收缩力增强。而心搏曲线由疏变密，说明心率变快。肾上腺素是一种儿茶酚胺，能激活心肌蛋白细胞膜上的 受体， cAMP 生成增加， 从而增加心肌细胞膜对 Na+和 Ca2+ 的通透性，降低膜对 K+
