《CREB磷酸化在电针结合重复经颅磁刺激激活脑缺血后内源性神经再生的作用机制研究（毕业设计-康复医学与理疗学专业）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《CREB磷酸化在电针结合重复经颅磁刺激激活脑缺血后内源性神经再生的作用机制研究（毕业设计-康复医学与理疗学专业）（83页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、华 中 科 技 大 学博 士 学 位 论 文CREB 磷 酸 化 在 电 针 结 合 重 复 经 颅 磁 刺 激 激 活 脑 缺 血 后 内 源 性 神经 再 生 的 作 用 机 制 研 究姓 名 ： 黄 国 付申 请 学 位 级 别 ： 博 士专 业 ： 康 复 医 学 与 理 疗 学指 导 教 师 ： 黄 晓 琳20090501华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文CREB 磷酸化在电针结合重复经颅磁刺激激活脑缺血后内源性神经再生的作用机制研究中文摘要第一部分、 PKA-CREB 信号通路在电针结合重复经颅磁刺激激活脑缺血后内源性神经再生中的作用及机制研究目的：探 讨 PKA-CR
2、EB 信 号 通 路 在 电 针 （ electro-acupuncture, EA） 结 合 重 复 经 颅 磁 刺 激（ repetitive Transcranial Magnetic Stimulation, rTMS） 激 活 脑 缺 血 后 内 源 性 神 经 再 生 中的 作 用 及 机 制 。研究方法：取 Wistar 大 鼠 150 只 ， 采 用 线 栓 法 制 备 大 鼠 大 脑 中 动 脉 闭 塞 模 型 廖 维 靖 ,刘 淑 红 ,范明, 等 .线栓阻断大鼠大脑中动脉制作缺血性脑损伤模型的改良. 中华物理医学与康复杂 志 ,2002,24(6):345-349.，随机
3、分为正常组、模型组、E A 组 、 rTMS 组 和 EA+rTMS组 ， 通 过 免 疫 组 化 和 Western blot 检 测 脑 缺 血 后 第 7d、 14d 与 28d 三 个 不 同 时 相 大 鼠缺 血 侧 海 马 PKA、 pCREB 表 达 的 变 化 ， 并 观 测 其 神 经 功 能 评 分 和 学 习 记 忆 能 力 。研究结果：（ 1） EA 组 、 rTMS 组 和 EA+rTMS 组 各 时 相 神 经 功 能 评 分 和 电 跳 台 实 验 评 分 均较 模 型 组 改 善 (p0.05） ； EA 组 、 rTMS 组 和 EA+rTMS 组 三 个时
4、相 均 高 于 模 型 组 ， 7d、 14d 时 高 于 正 常 组 ， 差 异 有 统 计 学 意 义 （ p0.05） ； EA+rTMS 组 7d、 14d 时 高 于 EA 组 和 rTMS9华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文组 ， 差 异 有 统 计 学 意 义 （ p0.05） ；（ 3） pCREB 阳 性 表 达 与 NSCs 增 殖 量 成 正 相 关 。研究结论：EA 结 合 rTMS 对 缺 血 性 脑 卒 中 后 神 经 功 能 的 恢 复 具 有 显 著 的 促 进 作 用 ， 缺 血 侧海 马 PKA-CREB 信 号 分 子 的 表 达 增 强 可
5、能 是 其 治 疗 缺 血 性 脑 卒 中 的 机 制 之 一 。关键词：脑 缺 血 ； 电 针 ； 重 复 经 颅 磁 刺 激 ； 蛋 白 激 酶 A-cAMP 反 应 元 件 结 合 蛋 白 ； 电 跳 台第二部分、电针结合重复经颅磁刺激对局灶性脑缺血大鼠内源性神经干细胞迁移、分化的影响研究目的：探 讨 电 针 （ electro-acupuncture, EA） 结 合 重 复 经 颅 磁 刺 激 （ repetitive TranscranialMagnetic Stimulation, rTMS） 对 局 灶 性 脑 缺 血 大 鼠 内 源 性 神 经 干 细 胞 迁 移 、 分 化
6、 的 影响 及 其 治 疗 缺 血 性 脑 损 伤 的 机 制 。研究方法：取 Wistar 大 鼠 120 只 ， 采 用 线 栓 法 制 备 大 鼠 大 脑 中 动 脉 闭 塞 模 型 廖维靖, 刘 淑 红 ,范明 ,等 .线 栓 阻 断 大 鼠 大 脑 中 动 脉 制 作 缺 血 性 脑 损 伤 模 型 的 改 良 .中 华 物 理 医 学 与 康 复 杂志 ,2002,24(6):345-349.， 随 机 分 为 正 常 组 、 模 型 组 、 EA 组 、 rTMS 组 和 EA+rTMS 组 ，采 用 免 疫 组 织 化 学 方 法 动 态 检 测 大 鼠 脑 缺 血 后 第 7
7、d、 14d 与 28d 三 个 不 同 时 相 、 不 同 脑区 多 唾 液 酸 神 经 细 胞 粘 附 分 子 (polysiolylated neural cell adhesion molecule, PSA-NCAM)与 PSA-NCAM/5-嗅 脱 氧 尿 嘧 啶 （ 5-bromodeoxyuridine, BrdU)、 神 经 核 抗 原 （ neuronalnuclear antigen, NeuN） 与 NeuN/BrdU、 钙 结 合 蛋 白 （ Calbindin） 等 标 志 物 的 免 疫 阳 性表 达 。研究结果：（ 1） PSA-NCAM 在正常组仅有少量稀疏表
8、达，染色淡；缺血后 7d 其 阳 性 细 胞10，华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文表 达 明 显 增 加 (P0.05)；（ 2） NeuN 在正常组仅有少量稀疏表达，缺血后 7d 其 阳 性 细 胞 的 表 达 明 显 增 加(P0.05)；（ 3） 正 常 组 大 鼠 脑 组 织 切 片 可 见 Calbindin-D28k 阳 性 神 经 元 表 达 清 晰 ， 神 经 元层 排 列 整 齐 而 致 密 ， 形 态 正 常 ， 神 经 元 表 达 多 ， 染 色 深 。 模 型 组 切 片 可 见 Calbindin-D28k阳性神经元胞体缩小，神经元排列紊乱而疏松，染色较
9、浅，表达较少。E A+rTMS 组切 片 Calbindin-D28k 阳 性 神 经 元 有 较 多 表 达 ， 形 态 基 本 正 常 ， 细 胞 染 色 较 深 。 EA 组 、rTMS 组 切 片 显 示 Calbindin-D28k 阳 性 神 经 元 表 达 欠 清 晰 ， 细 胞 形 态 不 规 则 ， 呈 缺 血坏 死 改 变 ， 阳 性 细 胞 表 达 较 少 ， 染 色 较 浅 。 EA 组 、 rTMS 组 各 时 相 及 EA+rTMS 组 第7d、 14d 时 Calbindin-D28k 阳 性 表 达 均 少 于 正 常 组 （ P0.05) ， EA 组 、 r
10、TMS 组 、 EA+rTMS 组 各 时 相Calbindin-D28k 阳 性 表 达 均 高 于 模 型 组 （ P0.05)。 各 组 SVZ、 SGZ 各 时 相 Calbindin-D28k 阳 性 表 达 均 高 于 梗 死 灶 周围 皮 质 。11华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文研究结论：EA 结 合 rTMS 促 进 缺 血 侧 不 同 脑 区 内 源 性 神 经 干 细 胞 的 增 殖 、 迁 移 和 分 化 及 整合 ， 促 进 神 经 再 生 及 损 伤 后 神 经 功 能 的 恢 复 ， 可 能 是 其 治 疗 缺 血 性 脑 卒 中 的 重 要 作 用
11、机 制 之 一 。关键词：脑 缺 血 ； 电 针 ； 重 复 经 颅 磁 刺 激 ； 多 唾 液 酸 神 经 细 胞 粘 附 分 子 ； 神 经 元 ； 钙 结 合蛋 白12华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文Role of CREB Phosphorylation in Neurogenesis in vivoActivated by Electro-acupuncture Combined with rTMS afterFocal Cerebral IschemiaAbstractPart Study on the role and mechanism of PKA-CREB S
12、ignalTransduction System in neurogenesis activated by electro-acupuncturecombined with repetitive Transcranial Magnetic Stimulation after focalcerebral ischemia in adult ratsObjective:To investigate the role and mechanism of PKA-CREB Signal Transduction System inneurogenesis activated by electro-acu
13、puncture combined with rTMS after focal cerebralischemia in adult rats.Methods:The model of transient focal ischemia was made by the middle cerebral arteryocclusion. One hundred and fifty Wistar rats were randomly divided into normal group,model group, EA group, rTMS group and EA combined with rTMS
14、group. To observe theneurologic impairment rating, ability of learning and memory at the 7th、 14th and 28th dayafter infarction respectively. Meanwhile, Immunohistochemistry and Western blot wereconducted to detect the expression of PKA and pCREB in hippocampus of ipsilateralhemispheres.Results:(1)
15、The improvement of neural motor function deficits as well as the indexes oflearning and memory were more obvious in EA group, rTMS, EA combined with rTMS13华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文group compared with the model group (p0.05).(2) The number of NeuN-positive cells and NeuN/BrdU positive cells in hippocam
16、pusincreased at day 7after MCAO (p0.05).(3) In EA combined with rTMS group, the neuron arrangement in peripheral cortex ofinfarction was regular just with mild cell loss and some darken dyeing nucleus. The averageoptical density of Calbindin in EA combined with rTMS group were higher than that inmodel group, EA group and rTMS group (P0.05） ；EA 组 、 rTMS 组 和 EA+r
