《2017生物一轮对点训练：29-1 基因工程的工具与操作程序 a 版含解析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2017生物一轮对点训练：29-1 基因工程的工具与操作程序 a 版含解析（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、生物备课大师 【全免费】“备课大师”全科【9 门】：免注册，不收费！ http:/ 该考点主要考查工具酶和载体的作用特点、目的基因的获取方法、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定，高考对该考点常以图像、材料形式考查基因表达载体的构建和目的基因的检测与鉴定，注重图示信息的获取能力和理解应用能力。命题法 1限制性核酸内切酶、DNA 连接酶等酶的作用 1.chlL基因是蓝藻 DNA 上控制叶绿素合成的基因，为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失 chlL 基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示，请据图分析回答：(1)与真菌相比较，蓝藻在结构上最主要的特点是_，
2、在功能上最主要的特点是_。(2) 过程中均使用的工具酶有_。(3)构建重组质粒 B 在整个操作过程中的目的是_和_。(4)若含有 chlL 基因的 DNA 片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如图乙所示。请回答：生物备课大师 【全免费】“备课大师”全科【9 门】：免注册，不收费！ http:/ chlL 基因的重组质粒 A 时，应选用的限制酶是_，对_进行切割。同时用酶 1 和酶 4 切割图乙中的质粒，则产生含有 1800 对碱基和 8200 对碱基的两种片段；用图中四种酶同时切割此质粒，则产生含有 600 对碱基和 8200 对碱基的两种片段；若换用酶 1 和酶 3 同时切割此质粒，则产生的片
3、段是_。答案(1) 没有以核膜为界限的细胞核能够进行光合作用(2)限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶(3)破坏 chlL 基因操作成功后筛选出该变异株细胞(4)酶 1 和酶 3质粒和含 chlL 基因的 DNA含有 1200 对碱基和 8800 对碱基的两种片段解析(1) 蓝 藻为原核生物，没有以核膜为界限的细胞核，其体内含有光合色素，能进行光合作用。(2)表达 载体构建 时需限制酶和 DNA 连接酶等工具酶。(3)由题 干信息 “构建该种生物缺失 chlL 基因的变异株细胞”知构建重组质粒 B 的目的在于破坏 chlL 基因并 筛选出变异株细胞。(4)由 图乙知，获得 chlL 基因需酶 1
4、 和酶 3 对此基因所在的DNA 进行切割，同时对质 粒也要用同种酶切割 处理，以便构建重组质粒 A。由题意知四种酶同时切割时含 600 对碱基的片段共有 3 个。若生物备课大师 【全免费】“备课大师”全科【9 门】：免注册，不收费！ http:/ 1 和酶 3 同时切割时，产生的片段有 82006008800 对碱基；另一为 60021200 对碱基。【解题法】确定限制酶的种类(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择Pst。不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择Sma 。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用
5、不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用 Pst和 EcoR两种限制酶( 但要确保质粒上也有这两种酶 的切点) 。(2)根据 质粒的特点确定限制酶的种类所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶 Sma 会破坏标记基因；如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。命题法 2基因工程的操作过程2.绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因，可以合成一种抗 TMV 蛋白，叶片对 TMV 具有抗感
6、染性。烟草是重要的经济作物，由于 TMV 的感染会导致其大幅度减产，研究人员利用转基生物备课大师 【全免费】“备课大师”全科【9 门】：免注册，不收费！ http:/ TMV 的烟草，主要流程如下图所示：(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗 TMV 基因转录的 RNA，然后合成目的基因。图中过程表示_，获得的 DNA 必须在两侧添加_和_。(2)过程 构建重组 Ti 质粒时，必须使用_和_两种工具酶。(3)由图分析，在过程构建的重组 Ti 质粒上应该含有卡那霉素抗性基因作为_，重组 Ti 质粒导入烟草体细胞的方法是_。(4)在过程 培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加_
7、，以保证受体细胞能培养成再生植株。(5)过程 可采取 _的方法，检测植株是否合成了抗 TMV 蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过_的方法来确定植株是否具有抗性。答案(1) 逆 (反)转录 启动子终止子(2)限制性核酸内切酶(限制酶 ) DNA 连接酶(3)标记基因农杆菌转化法(4)植物激素(生长素和细胞分裂素)(5) 抗原抗体杂交 接种烟草花叶病毒解析(1) 利用 RNA 获得目的基因的方法是反转录法，目的基因的两端分别为启动子和终止子。(3)质粒上的抗性基因常用作标记基因。(5)常用抗原抗体杂交的方法检测是否合成了特定的蛋白质；常用接种实验从个体水平上检测是否具有抗病性。【解题法】基因工程中的几种检测方法生物备课大师 【全免费】“备课大师”全科【9 门】：免注册，不收费！ http:/
