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1、文章来源 毕业论文网 ATP-TCA 法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究文章来源 毕业论文网 ATP-TCA 法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究 作者; 唐永梅，苏承武，蔡捷，唐东，李佳荃，李梅，田海梅，张伟摘要 目的 探讨体外 ATP 法化疗药物敏感试验在乳腺癌细胞中的可行性。方法 以 ATP-TCA 法，检测 37 例乳腺癌患者的癌细胞对 6 种常用化疗药物的敏感性。结果 ATP-TCA 法的可评估率为 91.89%；6 种试验用化疗药物的敏感率分别为：足叶乙甙 14.71%，紫杉醇 20.59%，丝裂霉素 32.35%，5-氟尿嘧啶 47.06%，草酸铂 58.82%，表阿霉素6
2、7.65%。结论 ATP-TCA 肿瘤细胞化疗药敏试验可作为乳腺癌患者个体化疗中化疗药物敏感性的预测。关键词 ATP-TCA 法；乳腺癌；化疗药物Application of ATPbioluminescence assay for screening chemotherapeutic agents of breast tumorAbstract Objective To study the application of the ex vivo ATPbioluminescence assay(ATP-TCA)in the chemotherapy of breast tumor.Method
3、s The surgical specimens of 37 patients were tested by the ATP-TCA.Results Evaluable test results were achieved in 34 of 37 patients，the evaluability rate was 91.89%.The sensitive rates of etoposid(Vp-16)，paclitaxel(TXL)，mitomycin(MMC)，5-fluoruracil(5-FU) ，oxaliplati(OXA) ，epirubicin(EPI)was 14.71%，
4、20.59%，32.35% ，47.06%，58.82%，67.65%，respectively.Conclusion ATPbioluminescence assay is a good option in the chemotherapeutic agents screening of breast tumors.Key words ATPbioluminescence；breast tumor；chemotherapy drug选择针对个体有效的药物进行化疗是治疗乳腺癌的重要手段之一。由于同一化疗方案对不同个体的类同肿瘤的疗效存在差异，化疗前对药物进行体外敏感试验，预测出有效的单药或有效
5、（或敏感）联合药物组成的化疗方案，是提高化疗药物疗效的潜在方法之一。ATP-TCA 法（三磷酸腺苷-肿瘤细胞药敏试验）是近年发展起来的敏感而稳定的药敏检测方法1 。本文应用 ATP-TCA 法对 37 例乳腺癌患者的乳腺癌细胞进行 6 种化疗药物的药敏试验，以探讨 ATP-TCA 法用于乳腺癌患者体外化疗药物检测在方法学方面的可靠性。1 材料与方法1.1 一般资料 收集 2003 年 3 月2005 年 5 月在本院手术治疗的乳腺癌（经病理确诊）患者 37 例标本。37 例患者最小年龄 25 岁，最大年龄 65 岁。文章来源 毕业论文网 1.2 材料 ATP-TCA 试剂盒（包括改良 PRMI
6、-1640 培养基）由北京金紫晶生物技术有限公司提供。MPL-1 型自发光分析仪为德国 Berthold 公司产品。化疗药物：5-氟尿嘧啶（5-FU，南通制药总厂） ，表阿霉素（EPI，浙江海政制药） ，足叶乙甙（VP-16，江苏恒瑞） ，紫杉醇（TXL，澳大利亚 FH 科贸有限公司） ，丝裂霉素（MMC，日本明治药厂） ，草酸铂（OXA，法国 Sanofi Winthrop 公司） 。1.3 方法 ATP-TCA 操作步骤（按试剂盒使用说明操作）：取肿瘤组织标本，在无菌条件下，剥离肿瘤组织的纤维、脂肪及结缔组织，然后用剪刀将肿瘤组织尽可能剪成小碎块，过 200 目钢网后放入肿瘤组织解离酶液中
7、，置 37、5%CO2、95% 湿度下孵育 1.53h。在室温下，以 1500r/mim 条件下离心 20min，弃上清液，用 Hanks 洗 2 次，以 PRMI-1640制成癌细胞悬液，取 35l 用台盼蓝染色，显微镜下计数，并观察细胞活性。调整细胞浓度至 2040 万/ml，以每孔 0.1ml 接种至 96 孔培养板内。按 400%、200% 、100%、50%、25%和12.5%的血浆峰值浓度，将药物加入培养孔每孔 0.1ml，每个浓度 3 个平行孔，并设最大抑制（MI）和无药物（MO）对照孔，于 5%CO2、37、95%湿度下孵育 67 天。加入肿瘤细胞 ATP 提取液 0.1ml，混匀后室温下 15min，取 0.05ml 混合液置微板荧光分析仪检测。
