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1、AMAMFSIs0225 茶 咖啡因 高效液相色谱法 AM-AM-FS-Is-0225 固态茶和速溶茶咖啡因含量的测定高效液相色谱法 1.适用范围： 本标准采用高效液体色谱法(HPLC) ，适用于咖啡因含量在 0.3%(m/m)以上的茶和速溶茶中咖啡因含量的测定。 2.原理概要： 在 90，氧化镁存在下，用水从试样中 萃取出咖啡因，过滤后用带紫外检测器的高效液相色谱测定咖啡因的含量。 3.主要仪器和试剂： 3.1 仪器 常规实验室仪器，主要有：带紫外检测器的高效液相色谱仪和色谱柱、过滤器、水浴(90 1 ) 、500ml 瓶子、分析天平( 可精确至 0.001g)。 3.2 主要试剂 除非另作
2、说明，试剂要用分析纯。水需满足 ISO 3696 的一级。主要试剂有：色谱纯级甲醇、移动相( 甲醇/ 水混合物) 、 1/4(V/V)乙醇/ 水混合物、氧化镁、咖啡因母液和咖啡因标准溶液 A、B 。 4.过程简述： 4.1 采样 重要的是实验室得到的样品要有代表性，在储运过程中未被损害或改变。取样见 ISO 1839(常规绿茶和黑茶) 、ISO 7516( 速溶茶) 。 按 ISO 1572 将试样研碎。从测得的含水量计算出干物质含量。 按不同茶进行称样。绿茶和黑茶称取 1.0g 试样，精确至 0.001g，放入瓶中；速溶茶称取 0.5g 试样，精确至 0.001g，放入瓶中。 4.2 测试
3、向瓶里的茶中加入 4.5g0.5 g 氧化镁和 300ml 水，盖上盖子后进行称重，精确至 0.1g。瓶中物质混合后，放在 90水浴上加热，并不停地摇荡。 20min 后从水浴上移走瓶子，冷却、烘干后称重，精确至 0.1g。 如果两次称重质量有差异，则需更换试样重新进行萃取。瓶子放置一会后，去掉盖子，用滤纸进行过滤。 移取 1.0ml 滤液至 10ml 容量瓶中，用水稀释至刻度线，混合均匀。 调整好 HPLC 仪，并用紫外检测器进行光谱测定。 5.精确度： 重复性和再现性值 样品 咖啡因含量， 重复性，r 再现性，R 黑茶，普通 绿茶，普通 速溶茶，普通 黑茶，脱咖啡因 速溶茶，脱咖啡因 2.9 1.8 6.5 0.3 0.1 0.192 0.126 0.167 0.028 0.027 0.358 0.167 0.381 0.043 0.029 6.来源： 国际标准化组织，ISO 10727 ：1995(E)
