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1、第10章 可见光分光光度法,10.1 基本原理10.2 可见光分光光度法10.3可见光分光光度法的应用,概 述,吸光光度法是以物质对光的选择性吸收为基础的分析方法。所用的仪器为分光光度计（又称为分光光度法）。根据物质所吸收光的波长范围不同，吸光光度法又有紫外、可见及红外分光光度分析法。本章重点讨论可见分光光度法。,10.1 可见光分光光度法的基本原理,10.1.1 物质对光的选择性吸收与物质的颜色10.1.2 光吸收的基本定律10.1.3 偏离朗伯-比尔定律的原因*,10.1.1 物质对光的选择性吸收与物质的颜色,人眼能感觉的波长在400750nm，为可见光区。,光波是一种电磁波。电磁波包括无
2、线电波、微波、红外光、可见光、紫外光、X射线、射线等。可见光只是电磁波中一个很小的波段。,不同波长的可见光使人们感觉为不同的颜色。,具有单一波长的光称为单色光。白光（日光）：是由各种单色光组成的复合光，当日光通过三棱镜时被分解为七色光（光的色散）：,手机辐射有害健康,手机和脑瘤之间有联系别太“牵挂”手机了。2008年06月16日 星期一 13:09 但最近美国纽约时报网站刊登的“专家关于手机和肿瘤之间的辩论死灰复燃”的文章，不禁又让人揪心起来；参议员爱德华肯尼迪被诊断患有脑癌，专家们一致认为使用手机和这种脑瘤之间有联系。别以为现在还没有发现脑瘤，就说明天下太平，“从开始频繁地使用手机到被诊断为
3、脑肿瘤，大约需要10至20年。”神经外科专家这样预测。,http:/ 黄,对于固体物质:当日光（复合光）照射到物质上时，如果物质对各种波长的光完全吸收则呈现黑色；如果完全反射则呈现白色；如果对各种波长的光均匀吸收则呈现灰色。,各种物质的颜色（透过光）与吸收光颜色的互补关系列于下表中：,物质颜色与吸收光颜色和波长的关系,（2）吸收曲线,E = E2 - E1 = h ：量子化 、选择性吸收；用不同波长的单色光照射，测其吸光度A;以波长为横坐标, A为纵坐标作出吸收曲线；找到最大吸收波长 max。,邻菲罗啉络铁()离子吸收曲线,吸收曲线的特点：,同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应
4、的波长称为最大吸收波长max不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似max不变（图中：c1 c2 c3 c4）。不同物质，它们的吸收曲线形状和max则都不同。,a.不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，在max=508nm处吸光度A 的差异最大。此特性可作为物质定量分析的重要依据。,吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的依据,b.在max处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。,图10-3 邻菲罗啉络铁()离子 不同浓度时的吸收曲线,10.1.2 光的吸收定律 （1）朗伯比耳定律,布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度
5、和吸收层厚度的关系。Ab 1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。Ac I0:入射光强度；It:透过光强度,二者的结合称为：朗伯比耳定律，其数学表达式为： Alg（I0/It)= b c 式中A：吸光度,描述溶液对光的吸收程度； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的摩尔浓度，单位molL； ：摩尔吸光系数，单位Lmolcm； 或: Alg（I0/It)= a b c c：溶液的浓度，单位gL a：吸光系数，单位Lgcm a与的关系为：a =/M （M为摩尔质量）,透光度(透光率)T,描述入射光透过溶液的程度 T = ItI0吸光度A与
6、透光度T的关系:Ab c lg T,朗伯比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。广泛地应用于紫外光、可见光、红外光区的吸收测量。,（2）摩尔吸光系数的特性,吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数，不随浓度c和光程长度b的改变而改变。 在温度和波长等条件一定时，仅与吸收物质本身的性质有关。 可作为定性鉴定的参数。 同一吸收物质在不同波长下的值是不同的。在最大吸收波长max处的摩尔吸光系数，常以max表示。max表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。,max越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。105：超高灵敏； =(610）104 ：高灵敏； 60nm。,
