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1、生物标本制作方法与技术的权威总结篇作者：football20002 文章来源：中国生命科学论坛 干制标本植物腊叶标本要保管在密封干燥的腊叶标本橱内。新制标本因为常有害虫和虫卵寄生，入橱最好用药消毒。就是用二硫化碳约 0.5Kg 盛在容器内，放入杀虫箱（1.7m 2）中，两日后开箱，使毒气散尽，拿出标本。二硫化碳气体比空气重。药品应放在标本上面。或者把未上台纸的标本放入 0.5%升汞酒精（工业用 75%）溶液中浸一次，制好后入橱。升汞有毒，并能与金属起化学作用，切忌使用金属器械。用时要带橡皮手套，事后用肥皂水洗手，标本用什么药品杀虫，应在台纸上注明，以防中毒。腊叶标本橱内要放樟脑精以防虫害。分类
2、 入橱标本要进行分类才便于利用。植物根、茎、叶花果实的干制标本，可按课本上的次序排列。分类标本在按照分类系统，分科排列。目前标本室常用的分类系统有恩格斯（AENGLER） 、克朗奎（A。 CRONGUIST）等分类系统。橱门上应有分科目录表，橱内要有分科标签，便于查找。维修 如果标本中的叶片脱落，可用毛笔刷胶水（植物胶）在叶背面，按照自然姿态贴好，阴干。枝茎断裂的要用醋酸乙烯胶粘贴，再贴上胶水纸。发霉和虫蛀的标本，用毛笔蘸 95%酒精或 10%福尔马林液洗刷，干后用毛笔刷除霉斑。台纸和盖纸破损的要调换新的。 移动标本，手脚要轻，不要翻转颠倒。入橱标本，不要太挤。标本外借，要多用填纸包装，注意防
3、潮。植物种子标本 要选择典型无病虫害的新种子，清除杂质后晒干，装入种子瓶中，并贴上标签，经常检查，以防发霉虫蛀。昆虫标本和植物病虫害等盒装标本 大型昆虫的腹部和柔软部分以及烘干的幼虫，都容易发霉。盒装的昆虫生活史、病虫害等标本里的安瓿容易破碎和标签脱落，可将损坏部分掉换。植物损坏部分可按照维修腊叶标本方法维修。盒装标本内应放入樟脑、硅胶等防虫防潮药品。其它 化石标本要防止震动和碰撞，损坏时用石膏填补和聚醋酸乙烯胶（乳白胶水）粘接。鸟卵标本卵壳损坏，可分块取下粘贴。循环系统干制标本是用赛璐珞作填充物的，脆性大，要防震，如果损坏，可以用毛笔蘸丙酮液粘接。浸制标本和材料浸制标本和实验材料都应有标签，
4、标签要贴实，外面涂蜡，按编号平稳地放入生物橱中保存。标本瓶不能震动，以免打碎，并且不宜放在有阳光直接照射、高温或 0以下的地方，以防封蜡熔化和玻璃瓶冻裂。植物实验材料也可以不用药液浸制，标本瓶底放些浸有 20%福尔马林的药棉，上盖白纸，再封口材料多时可以在塑料袋里放少量 20%福尔马林液体，再放入实验材料，扎紧袋口。也能长期保存。要用登记簿按记号记下每瓶标本的制作日期和药液配方，便于日后检查处理。原色标本要放在有板门的生物橱内，防止因阳光照射而退色。溶液发黄浑浊和标本露出液面，要及时更换和补充新液（加 10%福尔马林等）。 如果保存的实验材料将要变质，可增加保存液浓度。浸制透明标本会产生许多气
5、泡，可用注射器抽出。标本上贴字号等。如果标本脱落，可用药棉吸干脱落部位，用明胶液（明胶克，浸在 50 毫升水中泡一天后，再隔水加热到溶化）粘贴。如果固定标本的玻璃板打碎，用钻石刀划好玻璃，用砂轮奖四边磨平，重新固定放入。加换溶液和封瓶宜在夏季进行，因为夏季瓶盖容易开启，转动盖上的玻璃球，然后拨出瓶盖。也可用刀尖除去封蜡后开瓶。剥制标本剥制标本应按号放在生物橱中，过大的要自制玻璃橱箱存放，要防潮、防腐、防尘、防虫、防鼠。橱内用硅胶或生石灰（用两层纱布包好）作干燥剂，用樟脑制剂驱虫防霉（用纱布包好） 。剥制标本不能长期裸露放在橱顶上积尘。新剥制的未干标本不要放入生物橱。可以用烟熏剂消灭害虫，在春季
6、，把标本放在消毒箱里，箱里放碟子，上面放碗，碗里放硫磺，碗上放铁片条，点着硫磺，密封箱盖。两日后打开箱盖，拿出标本放入生物橱中保存。脊椎动物标本如果损坏，要选用种类、性别、大小相似的动物，切下损坏的相应部分，用大头针固定，涂上 40%福尔马林液防腐，干后作修补用材料。修补后再整形涂色。如鱼的鳍条、爬行动物的趾骨等断裂，可切成两个斜面，用聚醋酸乙烯胶帖。大型哺乳动物缺损可用油灰填补，再拔下腋窝、腹部等处毛，用聚醋酸乙烯胶帖在油灰上。骨骼标本骨骼标本要防止震动和撞散，用后盖好。受潮脱胶，关节容易掉落。阳光久射要发黄变色。骨骼断裂或脱落时，可用聚醋酸乙烯胶帖（用线固定） 。切片标本切片标本要编号放在
7、特别分格切片的木盒内，盒内两侧刻很多凹沟，载波片的两侧沿凹沟插入，使载玻片直立在盒中。每盒可装 50100 片。盒子要直放，使标本保持平放位置。盒内应有每片标本的编号和名称目录，以方便查找使用。木盒应放在干燥地方，避免日光照射。切片也可用玻片标本夹（格隔）保存。常用染料性能简介（一）天然染料1、苏木精 苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟” 。苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所
8、以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸-酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。2、洋红 洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末，提取出虫红，再用明矾处理，除去其中杂质，就制成洋红。单纯的洋红不能染色，要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。洋红使细胞核的优
9、良染料，染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜，尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。（二）人工染料人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。它的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。1、酸性品红 酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%） 。他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染，能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力
10、。酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。2、刚果红 刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水和酒精，遇酸呈蓝色。他能作染料，也用作指示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木精作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速。3、甲基蓝 甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。甲基蓝极易氧化，因此用
11、他染色后不能长久保存。4、固绿 固绿是酸性染料，能溶于水（溶解度为 4%）和酒精（溶解度为 9%） 。固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广。他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。5、苏丹 苏丹是弱酸性染料，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为 0.15%） 。苏丹是脂肪染色剂。6、伊红 这类染料种类很多。常用的伊红 Y，是酸性染料，呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状，溶于水（15 摄氏度是溶解度达 44%）和酒精（溶于无水酒精的溶解度为 2%） 。伊红在动物制片中广泛应用，是很好的细胞质染料，常用作苏木精的衬染剂。7、碱性品（复）红 碱性品红
12、是碱性染料，呈暗红色粉末或结晶状，能溶于水（溶解度 1%）和酒精（溶解度 8%） 。碱性品红在生物学制片中用途很广，可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁，又作为原球藻、轮藻的整体染色。在细菌学制片中，长用来鉴别结核杆菌。在尔根氏反应中用作组织化学试剂，已核查脱氧核糖核酸。8、结晶紫 结晶紫是碱性染料，能溶于水（溶解度 9%）和酒精（溶解度 8.75%） 。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广，是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的，用来显示染色体的中心体，并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料
13、染细胞核不能成功时，用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色，染色体染成红色，纺锤丝染成紫色，所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛，效果也很好。用结晶紫染色的切片，缺点是不易长久保存。 9、龙胆紫 龙胆紫是混合的碱性染料，主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要时龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫药水，主要成分是甲基紫，需要时能代替龙胆紫和结晶紫。10、中性红 中性红是弱碱性染料，呈红色粉末状，能溶于水（溶解度 4%）和酒精（溶解度 1.8%） 。它的碱性溶液中呈现黄色，在强碱性溶液中呈蓝色，而在弱酸性溶液中呈红色，所以能用作指示剂。中性红无毒，常做活体染色的染料
14、，用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液，用作显示尼尔体的常用染料。11、番红 番红是碱性染料，能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料，能染细胞核、染色体和植物蛋白质，示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织，还能染孢子囊。12、亚甲蓝或美蓝 亚甲蓝或美蓝是碱性染料，呈蓝色粉末状，能溶于水（溶解度 9.5%）和酒精（溶解度6%） 。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料，其优点是染色不会过深。13、甲基绿 甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状，能溶于水（溶解度 8%）和酒精（溶解度 3%） 。甲基绿是最有价值的细胞和染色剂，细胞学上常用来染染
15、色质，跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。常用药品试剂和培养基的配制（一） 反应剂1、检查葡萄糖试剂配方一： 本尼迪克（Benedict）溶液（1） 在 400 毫升蒸馏水中溶解 85 克柠檬酸钠和 50 克无水碳酸钠。（2） 在 50 毫升加热的蒸馏水中溶解 8.5 克硫酸铜。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅拌，如果产生沉淀，要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用（存放时间较久而产生沉淀是，取上层清液使用，不必重新配制） 。本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖，可测出 0.150.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时，如果未知物中有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉
16、淀物。配方二：裴林（Fehling）溶液（1）把 34.5 克硫酸铜溶于 500 毫升蒸馏水中。（2）把 125 克氢氧化钾（钠）和 173 克酒石酸钾钠溶解在 500 毫升蒸馏水中。上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时，使他们等量的混合，加入待测物的试管内，加热到沸腾。如果有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。2、检查淀粉的试剂 鲁哥氏（Lugols）溶液（碘液）取 6 克碘化钾溶于 20 毫升蒸馏水中，搅拌到溶解后，加入 4 克碘，等碘充分溶解，在加入 80 毫升蒸馏水，贮存在棕色试剂瓶内。碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉，也用作染色剂，例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。3、检查蛋白质的试剂配方一：米伦（Millon ）试剂在 60 毫升浓硝酸（比重 1.42）中溶解 40 克汞（水浴加温可助溶） ，溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释，静置澄清后，取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。在待测物中加入少量米伦试剂，加热，如果有蛋白质，会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的
