《行为学具体标准的操作方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《行为学具体标准的操作方法（13页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、行为学具体标准的操作方法，务必有参考文献整理我们之前做过的行为学具体标准的操作方法，务必有参考文献。这个比较简单。另外要开始学习细胞培养基础知识过段时间我带你做细胞实验 长：10.4宽：6.6高：18.1慢性社会挫败应激模型（chronic social defeated stress）首先根据需要选取一定数量的 CD1 小鼠作为攻击性小鼠，在正式实验前 2-3 周开始对其攻击性进行蹄选。具体方法就是：每个饲养笼中饲养雄性和雌性两只周龄相近的 CD1 小鼠，一定时间内让 CD1 雄性小鼠产生领地意识；1 周以后，将配对词养的雌鼠分离出饲养笼，随机放入一只陌生 C57 的小鼠作为领地入侵者，如果
2、 CD1 雄性小鼠在 1min 之内就开始对 C57 小鼠发动攻击，那么该 CD1 小鼠则被视为攻击性 CD1 小鼠。运用同样的方法筛选出所有需要的攻击性 CD1 雄性小鼠44 。正式实验前，选取雄性 C57 小鼠（7 周），随机分配成正常组和应激组，每组 10 只，对照组每 2 只一笼，其余均单笼饲养，给予正常饮食饮水一周充分适应环境。当实验幵始时，提前分离 CD1 雌鼠，取模型组 C57 小鼠一只，直接放入陌生 CD1 雄性小鼠（8-9 周）饲养笼中，使 C57 小鼠遭受雄性 CD1 小鼠持续性攻击约 5-10min；然后将两只小鼠用带有密集小孔的透明塑料隔板隔开，使两只小鼠彼此仍能互视和
3、闻嗅但是无法接触，运用这种方法持续到下次进行攻击前为止，完成该过程后即为第一天应激。第二天再将该 C57 鼠放入另一不同的 CD1 雄性鼠的笼中，使 C57 小鼠受到相同程度的应激；第三天再放入第三只 CD1 雄性鼠的笼中，同样使 C57 小鼠受到同样程度的应激。如此连续应激 10 天，并保证每天同一只 C57 小鼠受到不同 CD1 雄性鼠的攻击。在此期间，对照组和应激组 C57 小鼠均维持正常饮食饮水，而对照组则保持 2 只一笼，每天相互更换接触不同的小鼠。10 天连续应激结束后即开始行为学测试。根据糖水消耗，社会接触的行为学和悬尾测试的结果将 C57 小鼠分为正常组，抑郁敏感组，抑郁非敏感
4、组。糖水偏好实验糖水偏好测试是检测抑郁症快感缺失的经典方法。测试前用自来水配制好 1%庶糖水，与不含鹿糖的正常自来水同时放在 C57 模型鼠的鼠笼处，保证其自由饮用，同时提供充足的鼠食，每 12h 将糖水和白水互换位置，以防止 C57 模型鼠产生位置偏好。到第三天将所有的水和食物同时撤走，将 C57 模型鼠禁食 24h。禁食结束后分别称量糖水和白水的重量并记录，然后将两瓶水随机放在词养笼上供模型鼠自由饮用，1h 后取下两瓶水分别测量两瓶水剩下的重量，计算出糖水消耗重量 A 和白水消耗重量 B，利用公式 A/(A+B)*100%即得到CSDS 模型鼠的糖水偏好率。糖水偏好率的值与动物的快感程度呈
5、正相关，其值越小则表明动物快感缺失越严重。社会接触实验该实验方法主要用于检测小鼠对陌生目标的靠近，探索和躲避行为45。正常的喷齿类动物是社会性动物，当正常鼠与陌生鼠相遇后会与陌生鼠频繁接触；而遭受过社会挫败应激的小鼠则会产生孤立和逃避接触的行为，该行为一般判定为抑郁样行为；而相比之下，在一定的时间内，正常鼠在单位时间内与正常鼠接触的时间明显长于模型鼠在单位时间内与正常鼠接触的时间，因此，在规定时间内计算出模型鼠与攻击鼠接触的时间能反应出模型鼠的抑郁程度。其具体操作方法是：在敞箱（45*45*45cm）一侧的中央放入隔板（10*6cm，底部有密集小孔，用来放置 CD1 陌生小鼠），以中央放置 C
6、D1 小鼠的区域为中心，划出一矩形区域作为接触区域（14*26cm）46。结果通过由 Anilab 公司提供的软件进行接触时间的统计。整个实验步骤如下：（1 ）打开软件和摄像头后将实验笼放置到合适的位置，并不断地调整保证充分的视角，最后进行软件的设置；（2 ）不放入陌生的 CD1 小鼠，然后放入 C57 小鼠，然后开始计时，时间设定为 2.5min，最后得到接触区和非接触区的累积时间，此阶段为 Target absent；（3 ）放入陌生的 CD1 小鼠，然后放入 C57 小鼠，然后开始计时，时间设定为 2.5min，最后得到接触区和非接触区的累积时间，此阶段为 Target present；
7、（4 ）分别统计对照组和模型组的 Target absent 和 Target present 的累积时间，在 Target absent阶段，对照组和模型鼠无明显差异，但是在 Target present 阶段，模型鼠的接触时间明显降低。悬尾实验将高 60cm 的架子放置于安静的实验环境中，用夹子夹住小鼠尾巴末端 1cm 处，然后将夹子固定在架子上，使其倒吊于架子上，小鼠为克服不正常体位而挣扎活动，在此期间记录小鼠的不动时间。总共时间 6min，为开始 1min 为适应时间，随后 5min 为记录时间。44Tsankova NM,Berton O,Renthal W,Sustained hi
8、ppocampal chromatin regulation in a mouse model of depression and antidepressant action.Nat Neurosci 2006;9:519-25.45E.Venzala.A.L.Garcia,N.Elizalde,Chronic social defeat stress model:behavioral features,antidepressant action ,and interaction with biological risk factors.Psychopharmacology 2012,224,
9、313-25.46Wang X,Chen J,Li F,Lin Y.MIR-214 inhibits cell growth in hepatocellular carcinoma through suppression of -actenin.Biochem Biophys Res Commun.2012,30,428,525-31.1邓志芳.miR-214-3p 对慢性社会挫败应激所致小鼠抑郁样行为的作用及机制.华中科技大学博士学位论文.2014.5.最初的社会挫败 模型是由 Tornatzky 和 Miczek 于 1993 年在大鼠中建立的。模型建立过程如下:选取一批月龄、体重均较大的
10、雄性啮齿动物为居住者，即攻击者，使其能在斗争中占主导地位。因体重和月龄的差异，二者存在从属关系，居住者会对入侵者进行攻击，当入侵者出现顺从、投降姿势、发出痛苦的叫声时，直到攻击过程结束4。然后将入侵者放入带孔、透明的保护笼中，再置于居住者笼中，此过程允许存在嗅觉、视觉、触觉接触，但无直接接触。而上述两攻击鼠对实验鼠攻击的两个过程进行的时间随着实验方式及实验动物的改变而进行调整。与其他应激一样，社会挫败同样能引起动物长期的行为学改变。当进行 24d 连续的社会挫败应激，大鼠自发活动和探索行为显著性降低5-6，攻击性和性需求减弱，更易于屈服和焦虑7。而且，如果进行更多天数的社会挫败，会导致一系列的
11、抑郁相关行为改变。4Blanchard RJ,Blanchard DC.Aggressive behavior in the ratJ.Behav Biol,1977,21(2):197-224. 1桂舒佳,田绍文,谢明.社会挫败应激模型的研究进展 J.社区医学杂志.2015,13(24):81-83. Chronic social defeat stress procedureThe CSDS procedure was carried out following Tsankova et al. (2006), with minor modifications. Briefly, exper
12、imental mice were submitted to social defeat stress for 10 consecutive days. Every day, each mouse was introduced into the home cage of an unfamiliar resident. Resident mice were CD1 retired breeders selected for their attack latencies reliably shorter than 30 s upon three consecutive screening test
13、s. Once the experimental mouse had been physically defeated by three attacks, both animals (defeated and aggressor) were maintained in sensory contact for 24 h using a metallic mesh dividing the resident home cage into two halves.During the 10 days, control mice were individually housed in equivalen
14、t cages but with a member of the same strain in the other half of the cage.Tsankova 等人（ 2006）简单地说，实验小鼠连续 10 天提交给社会失败压力。每一天，每H 鼠标被引入一个陌生的居民的家庭笼子里。居民的小鼠 CD1 退休育种者选择攻击潜伏期短于 30 秒后可靠连续三屏幕宁试验。一旦实验老鼠已被心理物理攻击三，动物（打败侵略者）均保持在感官接触 24 小时使用金属网格划分将居民家庭的笼子分为两半，在 10 天里，对照组的老鼠被分别安置在相当的笼子里，但另一半的笼子里有一个相同的部分。Sucrose in
15、take testAnhedonic-like behavior was evaluated by monitoring of sucrose intake (Elizalde et al. 2008). Every 10 days, mice were given a 15-h exposure to the sucrose solution (2.5 %) and tap water from 6:00 p.m. until 9:00 a.m. and, during this test, no stressors were applied. The position of the two
16、 bottles (right/left) was varied randomly from trial to trial. Body weight measurements were taken weekly and relative sucrose intake was calculated as absolute intake (in grams) perweight.Behavioral testsSpontaneous locomotor activityLocomotor activity was measured in an open field consisting of nine black square boxes with light gray floor (435045) using a video tracking system (Ethovision XT 5.0, Noldus Information Technology B. V., Wagenin
