《一氧化氮与血管紧张素II的调节对大鼠心肌缺血的作用及血管内皮生长因子表达的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一氧化氮与血管紧张素II的调节对大鼠心肌缺血的作用及血管内皮生长因子表达的影响（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 论 著 NO与 Ang II的 调 节 对 大 鼠 心 肌 缺 血 的 作 用 及 VEGF表 达 的 影 响贾 凌 凤 李 悦 山 3(广 州 医 学 院 药 理 学 教 研 室 ,广 东 广 州 510182)摘 要 目 的 :探 讨 氧 化 亚 氮 (NO)与 血 管 紧 张 素 II(Ang II)的 调 节 对 大 鼠 心 肌 缺 血 的 作 用 及 血 管 内 皮 生 长因 子 (VEGF)表 达 的 影 响 。 方 法 :将 30只 SD大 鼠 随 机 分 成 5组 (每 组 均 为 6只 ) : A:对 照 组 (COL )、 B: 异 丙 肾上 腺 素 组 ( ISO)、
2、C:异 丙 肾 上 腺 素 +氯 沙 坦 组 (LOS)、 D:异 丙 肾 上 腺 素 +硝 基 左 旋 精 氨 酸 组 (L2NNA )、 E:异 丙肾 上 腺 素 +氯 沙 坦 +硝 基 左 旋 精 氨 酸 组 (LOS +L2NNA)。 由 异 丙 肾 上 腺 素 ( ISO)诱 导 大 鼠 心 肌 缺 血 模 型 ;选 用硝 基 左 旋 精 氨 酸 (L2NNA)阻 断 氧 化 亚 氮 合 酶 (NOS) ,氯 沙 坦 (LOS)阻 断 Ang II选 择 性 受 体 AT1 ; BL2420F生 物信 号 处 理 系 统 监 测 心 功 能 指 标 ;生 物 化 学 方 法 检 测
3、心 肌 NO、 血 清 肌 酸 激 酶 (CK) , HE染 色 观 察 心 肌 细 胞 损 伤 情况 ,免 疫 组 化 染 色 分 析 VEGF及 eNOS的 蛋 白 表 达 , RT2PCR半 定 量 检 测 VEGF、 eNOS在 心 肌 中 mRNA表 达 。 结果 : C组 心 功 能 与 B、 D、 E组 相 比 得 到 明 显 改 善 ( P 0. 05 ) ; C组 的 LVSP、 dP /dtmax、 Vmax明 显 升 高 , LVEDP显 著降 低 ,与 D组 、 E组 、 B组 相 比 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P0. 05) ; C组 的 CK活 性明 显
4、降 低 ,与 D组 、 E组 、 B组 相 比 差 异 有 统 计 学 意义 ( P 0. 05) ; C组 的 NO含 量 明 显升 高 ,与 B组 、 D组 、 E组 相 比 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P 0. 01)。 这 说 明 单 独 使 用 氯 沙 坦 可 以 升 高 异 丙 肾上 腺 素 诱 导 的 急 性 心 肌 缺 血 大 鼠 心 肌 的 NO含 量 ,而 和 硝 基 左 旋 精 氨 酸 一 起 使 用 或 单 独 使 用 硝 基 左 旋精 氨 酸 均 没 有 这 种 效 果 。表 1 各 组 大 鼠 的 心 功 能 指 标Tab. 1 L VSP( mm Hg)
5、, L VED P( mm Hg) , dp /dtmax ( mm Hg /m s) and Vmax ( mm Hg) in each group of ra ts( n = 6, x s)Group LVSP LVEDP + dp /dtmax - dp /dtmax VmaxCOL 158. 19 7. 573 - 7. 44 4. 083 7. 57 0. 333 - 6. 86 0. 473 157. 32 9. 423 LOS 146. 85 6. 983 - 4. 46 1. 863 6. 98 0. 483 - 6. 13 0. 143 146. 77 11. 533 L2N
6、NA 121. 18 5. 26 - 0. 30 3. 48 5. 26 0. 37 - 4. 30 0. 32 122. 54 8. 38LOS +L2NNA 115. 91 5. 21 0. 28 1. 92 5. 21 0. 7 - 4. 45 0. 23 115. 63 15. 06ISO 112. 07 5. 41 - 1. 03 1. 49 5. 41 0. 80 - 4. 82 0. 49 124. 38 8. 293 P 0. 01, vs ISO; P 0. 01, vs L2NNA; P 0. 01, vs LOS +L2NNA3第 5期 贾 凌 凤 ,等 . NO与 An
7、gII的 调 节 对 大 鼠 心 肌 缺 血 的 作 用 及 VEGF表 达 的 影 响表 2 各 组 大 鼠 血 清 的 CK活 性 及 心 肌 的 NO含 量Tab. 2 Serum CK activ ities and m yocard ia l n itr ic ox idecon ten ts in each group ra t( x s, n = 6)Group CK activity(U /L) NO content( mol/gp rot)COL 64. 3 11. 93 10. 4 1. 93 LOS 75. 1 11. 23 9. 0 2. 63 L2NNA 193. 4
8、 5. 8 4. 3 1. 3LOS +L2NNA 190. 0 4. 1 4. 5 1. 1ISO 187. 3 8. 7 5. 1 1. 63 P 0. 01, vs ISO; P 0. 01, vs L2NNA; P 0. 01, vsLOS +L2NNA2. 5 心 肌 组 织 VEGF及 eNOS蛋 白 表 达 的 变 化各 组 缺 血 心 肌 组 织 的 VEGF及 eNOS蛋 白 表 达量 见 图 2、 表 3。 B组 、 D组 及 A组 心 肌 组 织 的 VEGF及 eNOS蛋 白 表 达 很 少 , VEGF在 E组 亦 很 少 表 达 。C组 的 VEGF表 达 明 显
9、升 高 ,与 A组 、 B组 、 D组 、 E组 相 比 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P 0. 01)。 eNOS在 C组 及 E组 的 表 达 也 明 显 升 高 ,与 A组 、 B组 及 D组相 比 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P 0. 01)。 这 说 明 氯 沙 坦可 以 提 高 大 鼠 缺 血 心 肌 组 织 eNOS及 VEGF蛋 白 表达 量 ,氯 沙 坦 和 硝 基 左 旋 精 氨 酸 一 起 使 用 只 可 以 提高 eNOS的 表 达 ,但 对 VEGF没 有 影 响 ,单 独 使 用 硝基 左 旋 精 氨 酸 对 两 者 均 没 有 影 响 。表 3 VE
10、GF及 eNO S蛋 白 质 在 大 鼠 心 肌 的 表 达Tab. 3 VEGF and eNO S prote in expression in ra tm yocard ium ( x s, n = 6)Group VEGF(mean OD) eNOS(mean OD)COL 0. 099 0. 015 0. 098 0. 019LOS 0. 157 0. 0163 0. 154 0. 0153 L2NNA 0. 083 0. 018 0. 083 0. 015LOS +L2NNA 0. 089 0. 011 0. 145 0. 0163 ISO 0. 089 0. 014 0. 089
11、 0. 0113 P 0. 01, vs ISO; P 0. 01, vs L2NNA; P 0. 01, vsLOS +L2NNA; P 0. 01, vs COL4广 州 医 学 院 学 报 (J GZMC) 2007, 35 (5)A: VEGF (256bp) gene; B: 2actin (560bp) gene ; C: eNOS(357bp) gene1: ISO group; 2: LOS +L2NNA group; 3: L2NNA group; 4: LOS group; 5: COL group图 3 VEGF、 2actin 、 eNO S基 因 PCR产 物 琼 脂
12、 糖 电 泳 凝 胶 结 果F ig. 3 Agrose gel electrophoresis of VEGF gene, 2actin gene and eNO S gene PCR products2. 6 大 鼠 缺 血 心 肌 组 织 VEGF mRNA、 eNOS mRNA表 达 的 变 化由 图 3 可 见 B 组 、 D 组 及 A 组 心 肌 组 织 的VEGF及 eNOS基 因 表 达 很 少 , VEGF基 因 在 E组 亦很 少 表 达 。 然 而 , VEGF基 因 在 C组 , eNOS在 C组及 E组 的 缺 血 心 肌 组 织 中 大 量 表 达 。以 2act
13、in 为 内 参 照 ,各 组 缺 血 心 肌 组 织 的VEGF及 eNOS的 mRNA相 对 表 达 量 见 表 4。 C组及 E组 心 肌 组 织 的 eNOS基 因 表 达 量 显 著 高 于 A组 、 B组 及 D组 ( P 0. 01) ; C组 缺 血 心 肌 组 织 的VEGF基 因 表 达 量 明 显 高 于 A组 、 B组 、 D组 及 E组( P 0101)。 这 说 明 氯 沙 坦 可 以 提 高 缺 血 心 肌 组 织eNOS及 VEGF基 因 的 表 达 量 ,氯 沙 坦 和 硝 基 左 旋 精氨 酸 一 起 使 用 只 可 以 提 高 eNOS基 因 的 表 达
14、量 ,但对 VEGF基 因 没 有 影 响 ,单 独 使 用 硝 基 左 旋 精 氨 酸对 两 者 均 没 有 影 响 。表 4 VEGF及 eNO S基 因 在 大 鼠 心 肌 的 表 达Tab. 4 VEGF and eNOS gene expression in rat myocardium( x s, n = 6)Group Intensity of VEGF /Intensity of 2actin Intensity of eNOS/Intensity of 2actinCOL 0. 39 0. 04 0. 63 0. 27LOS 0. 72 0. 083 # 1. 22 0. 0
15、93 L2NNA 0. 40 0. 06 0. 59 0. 24LOS +L2NNA 0. 42 0. 12 1. 24 0. 513 3 P 0. 01, vs ISO; P 0. 01, vs L2NNA; P 0. 01, vsLOS +L2NNA, P 0. 01 vs COL3 讨 论本 研 究 证 实 ,阻 断 AT1 受 体 能 促 进 大 鼠 心 肌VEGF、 eNOS表 达 及 NO生 成 ,缓 解 由 ISO诱 导 的 心肌 缺 血 、 心 功 能 改 变 、 心 肌 细 胞 损 伤 。 这 个 结 果 证 明心 肌 缺 血 过 程 中 NO和 Ang II2AT1 受 体 信 号 转 导 通路 对 VEGF表 达 起 重 要 调 节 作 用 ,氯 沙 坦 可 部 分 通过 对 心 肌 eNOS、 VEGF表 达 及 NO释 放 的 调 节 起 到心 肌 保 护 作 用 。 心 肌 缺 血 时 ,心 肌 局 部 RAS激 活 ,Ang II生 成 增 加 , Ang II通 过 AT1 受 体 ,影 响 梗 死 心肌 的 恢 复 。 阻 断 AT1受 体 可 减 少 心 肌 梗 死 范 围 ,减轻
