分子生物学期末复习试题及答案

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1、1、名词解释分子生物学:包括对蛋白质和核酸等生物大分子的结构与功能,以及从分子水平研究生命活动RNA 组学:RNA 组学研究细胞中 snmRNAs 的种类、结构和功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下 snmRNAs 的表达具有时间和空间特异性。 增色效应: DNA 变性时其溶液 OD260增高的现象。减色效应: DNA 复性时其溶液 OD260降低的现象。Tm:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为 DNA 的解链温度,又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与 G+C 含量成正比。

2、解链曲线:如果在连续加热 DNA 的过程中以温度对A260(absorbance,A,A260代表溶液在260nm 处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。DNA 复性:在适当条件下,变性 DNA 的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。核酸分子杂交:在 DNA 变性后的复性过程中,如果将不同种类的 DNA 单链分子或 RNA 分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂化双链,这种现象称为核酸分子杂交。基因:广义是指原核生物、真核生物以及病毒的 DNA 和RNA 分子中具有遗传效应的核苷酸

3、序列,是遗传的基本单位。狭义指能产生一个特定蛋白质的 DNA 序列。断裂基因:不连续的基因称为断裂基因,指基因的编码序列在 DNA 上不连续排列而被不编码的序列所隔开。重叠基因:核苷酸序列彼此重叠的2个基因为重叠基因,或称嵌套基因。致死基因:删除后可导致机体死亡的基因。基因冗余:由于一基因在个体中有若干份拷贝,当删除其中一个时,个体的表型不发生明显变化。DNA 重组:DNA 分子内或分子间发生遗传信息的重新组合,又称为遗传重组或基因重排。同源重组:发生在同源序列间的重组称为同源重组,又称基本重组。接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒 DNA 从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(

4、细菌)的 DNA 转移称为接合作用(conjugation)。转化作用:通过自动获取或人为地供给外源 DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型,称为转化作用 (transformation)。 转导作用:当病毒从被感染的(供体)细胞释放出来、再次感染另一(供体)细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之间的 DNA 转移及基因重组即为转导作用位点特异重组:位点特异重组(site-specific recombination) 是由整合酶催化,在两个 DNA 序列的特异位点间发生的整合。12-23规则:重组发生在间隔为12bp 到23bp 的不同信号序列之间,称为12-23规则。转座子:(tran

5、sposon)在基因中可以移动的一段 DNA序列。转座:由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)。克隆:来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。DNA 克隆:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的 DNA)与载体 DNA 接合成一具有自我复制能力的 DNA分子复制子(replicon),继而通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增提取获得大量同一 DNA 分子,也称基因克隆或重组 DNA (recombinant DNA)。 基因工程:(genetic engineering)实现基因

6、克隆所用的方法及相关的工作称基因工程,又称重组 DNA 工艺学。限制性核酸内切酶:(restriction endonuclease, RE)是识别 DNA 的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链 DNA 的一类内切酶。同功异源酶:来源不同的限制酶,但能识别和切割同一位点,这些酶称同功异源酶。同尾酶:有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同,但切割 DNA 后,产生相同的粘性末端,称为同尾酶。载体:为携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些 DNA 分子。复制:(replication)是指遗传物质的传代,以母链 DNA为模板合成子链 DNA 的过程。半保留复制:(sem

7、i-conservative replication)DNA生物合成时,母链 DNA 解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的 DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的 DNA 都和亲代DNA 碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。复制子:(replicon)DNA 分子中能独立进行复制的单位称为复制子。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子。复制眼:(replication eye)DAN 正在复制的部分在电镜下观察起来犹如一只眼睛,称为复制眼。复制叉:(replication fork)

8、复制一开始,复制起始点要形成一个特殊的叉型结构,是复制有关的酶和蛋白质组装成复合物和新链合成的部位,这种结构称为复制叉。端粒:(telomere)指真核生物染色体线性 DNA 分子末端的结构。转录:(transcription) 生物体以 DNA 为模板合成 RNA的过程 。 不对称转录:(asymmetric transcription) 在 DNA 分子双链上某一区段,一股链用作模板指引转录,另一股链不转录;模板链并非永远在同一条单链上。模板链:DNA 双链中按碱基配对规律能指引转录生成 RNA的一股单链,称为模板链(template strand),也称作有意义链或 Watson 链。编

9、码链:相对的另一股单链是编码链(coding strand),也称为反义链或 Crick 链。 启动子:RNA 聚合酶结合模板 DNA 的部位称为启动子(promoter)转录泡:(transcription bubble)在转录延长过程中,由局部打开的 DNA 双链、RNA 聚合酶核心酶及新生成的RNA 三者结合在一起的复合体,为空泡状结构,又称转录复合物。转录因子:能直接、间接辨认和结合转录上游区段 DNA的蛋白质,现已发现数百种,统称为反式作用因子(trans-acting factors)。反式作用因子中,直接或间接结合 RNA 聚合酶的,则称为转录因子(transcriptional

10、 factors, TF)。 转录后加工(RNA 的成熟):在细胞内,由 RNA 聚合酶合成的原初转录物(pre-RNA)经过链的裂解、5端与3端的切除和特殊结构的形成、核苷的修饰和糖苷键的改变、以及拼接和编辑等过程,转变为成熟的 RNA 分子的过程称为 RNA 的成熟或转录后加工(post-transcriptional processing) 。RNA 编辑:改变 RNA 编码序列的方式称为 RNA 编辑。密码子:(codon)代表一个氨基酸或蛋白合成、终止信号的核苷酸三联体。开放阅读框:从 mRNA 5端起始密码子 AUG 到3端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个

11、蛋白质多肽链,称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。顺反子:遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子(cistron)。多顺反子:原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位,转录生成的 mRNA 可编码几种功能相关的蛋白质,为多顺反子(polycistron) 。单顺反子:真核 mRNA 只编码一种蛋白质,为单顺反子(single cistron) 。 翻译的跳跃现象:翻译中读码框发生位移或核糖体跳过一大段 mRNA 后 继续翻译称为翻译的跳跃现象。信号序列:(signal sequence)所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号,主要为 N 末端特异氨基酸序列,

12、可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位,这一序列称为信号序列 。信号肽:(signal peptide)各种新生分泌蛋白的 N 端有保守的氨基酸序列称信号肽。 线粒体定向肽:由核基因组编码的线粒体外膜蛋白的 N端具有的一段肽链。由富含带正电的氨基酸和丝氨酸、苏氨酸等。基因表达:(gene expression)基因经过转录、翻译,产生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。操纵子:(operon)是原核生物在分子水平上基因表达调控的单位,由结构基因、启动子、操纵基因和调节基因组成;通过调节基因编码的调节蛋白与诱导物、辅阻遏物协同作用,开启或关闭操纵基因,对操纵子结构基因的表达进行正、负控制。转录衰减

13、:(attenuation)是指转录可正常起动,但在转录进入第一个结构基因前即突然停止的过程。由于这一终止作用并不能使正在进行的结构基因转录中途停止,而仅是部分中途停止转录,所以称为转录衰减。2、填空题:1.分子生物学的发展分为三个阶段:人类对 DNA 和遗传信息传递的认识阶段,重组 DNA 技术的建立和发展阶段,重组 DNA 技术的应用和分子生物学的迅猛发展阶段。2.对 DNA 双螺旋结构的提出贡献最大的三位科学家是 J.Watson, F.Crick, O.Avery。DNA 序列测定法有两种,分别为 G:lbert 化学法, sanger 酶法。4.PCR 仪的发明者为 Kary B.M

14、ullis。5.核酸分子由碱基,戊糖,磷酸三部分组成。6.在 DNA 双螺旋结构中,氢键维持双链横向稳定性,碱基堆积力维持双链纵向稳定性。7.OD260=1.0相当于50ug/ml 双链 DNA,40ug/ml 单链 DNA,20ug/ml 寡核苷酸。8.DNA 的密度为1.7g/cm3,相当于8M CSCL 溶液的密度。9.质粒 PSC101中的 P 代表构建该质粒的研究者或单位。10.DNA 重组的种类同源重组,接合作用,转化作用,转导作用,位点特异的重组,转座。11.基因工程中常用载体可分为三类质粒 DNA,噬菌体 DNA,病毒 DNA。12.同一基因获取的方法有四种化学合成法,cDNA

15、 文库,基因组 DNA 文库,聚合酶链式反应(PCR) 。13.重组 DNA 导入受体菌时,对受体菌的要求为安全宿主菌,限制酶和重组酶缺陷,处于感受态;导入方式有转化,转染,感染三种。14.重组 DNA 技术操作过程可形象归纳为分,切,接,转,筛。15.1958年 Meselson 等氮的同位素试验证明了 DNA 复制为半保留复制的机制。16.复制的方向有单向复制,相向复制,双向复制。17.参与 DNA 复制的物质有底物,聚合酶,模板,引物,其他的酶和蛋白质分子。18.细菌的 RNA 聚合酶全酶的五个功能位点为 , ,。19.真核生物的转录过程可分为识别,起始,延伸,终止四个阶段。20.逆转录

16、酶是一类非常复杂的酶,在其简单的一条多肽链上具有多种酶活性 DNA 聚合酶活性,RNA 酶活性,DNA 内切酶活性,DNA 旋转酶活性,螺旋酶活性,tRNA 结合酶活性。21.遗传密码的特点有连续性,简并性,摆动性,通用性。22.基因表达是受调控的,可在多个层次上进行,包括基因水平,转录水平,转录后水平,翻译水平,翻译后水平的调控。三、翻译:脱氧核糖核酸(DNA) , 超螺旋(supercoil), 正超螺旋(positive supercoil) ,DNA-dependent DNA polymerase(依赖 DNA 的 DNA 聚合酶) , 解螺旋酶(helicase) ,引物酶(primase) , SSB(单链 DNA 结合蛋白), DNA ligase(DNA 连接酶), telomerase(端粒) , cDNA(互补 DNA), teminator(终止子), UBF(ups

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